细胞复苏的步骤.docx
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主要器材：一次性滴管、打火机、酒精灯、大镊子、中镊子、记号笔、 废液缸、封口膜、剪子主要试剂：PBS、培养液、消化酶（胰酶）、75%酒精、双抗PBS 配制:NaCL :4g KCL:0.1g Na2HPO4：1.745g KH2PO4 :0.1g二蒸水：500mL，溶解后咼压灭菌培养基配制：5mL双抗、50mL血清，加入培养基中细胞复苏步骤：1、 水浴锅打开，调到35.8° C〜37° C2、 打开超净台，放入主要用具，开紫外灭菌30min主要器具包 含：镊子、离心管、酒精灯、封口膜、一次性滴管、培养瓶、废 液缸3、 将培养液带入细胞间，瓶上喷酒精，放入超净台，过火，撕封口 膜，过火灭菌4、 用滴管取3ml培养液放入离心管中5、 从液氮中取出螺口瓶，放入之前开好的水浴锅中迅速融化6、 快速去细胞间，喷洒酒精灭菌，开盖，将细胞吸出放入离心管中， 1000转离心5min7、 培养瓶中加入5ml培养液，过火灭菌8、 取出离心管，倒掉培养液，用滴管取1ml培养液冲洗离心好的细 胞，移到培养瓶中，轻轻摇匀，显微镜下观察喷酒精灭菌，放入孵育箱中整理超净台。
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