免疫球蛋白细胞免疫检测肿瘤标志物.ppt

临床常用免疫学检测李朝虹 徐医临床学院 内科诊断教研室第一节血清免疫球蛋白检测概述n免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)是指一 组具有抗体活性的球蛋白n由浆细胞合成与分泌，存在于机体的血 液、体液、外分泌液和部分细胞的膜上 n按其功能和理化性质分IgG、IgA、IgM 、IgD、IgE五大类一、免疫球蛋白G检测免疫球蛋白G（IgG）n为人体含量最多和最主要的Ig，占总Ig的70～80％；n对病毒、细菌和寄生虫都有抗体活性；n唯一能够通过胎盘的Ig一、免疫球蛋白G检测参考值：7.0~16.6g/L 临床意义： 1、IgG增高： ①多克隆增高：即IgG、IgA、IgM均增高 常见于慢性感染、慢性肝病、淋巴瘤 、肺结核、链球菌感染及自身免疫性疾 病如SLE、RA一、免疫球蛋白G检测临床意义：1、IgG增高：②单克隆增高：仅有某一种Ig增高主要见于免疫增殖性疾病，如分泌型 MM（分为IgG型、IgA型、IgD型、IgE 型）一、免疫球蛋白G检测临床意义：2、IgG降低：①各种先天性和获得性体液免疫缺陷病②肾病综合征：蛋白丢失③病毒感染：抑制免疫④应用免疫抑制剂患者二、免疫球蛋白A检测nIgA分为血清型IgA与分泌型IgA（SIgA ）n血清型IgA占血清总Ig的10～15％nSIgA在外分泌系统中有重要的免疫功能 ：如呼吸道、消化道、泌尿生殖道的感染、炎症、肿瘤二、免疫球蛋白A检测参考值：血清IgA：0.7~3.5g/LSIgA： 唾液平均为 0.3 g/L泪液 30～80 g/L初乳平均为 5.06 g/L粪便平均为 1.3 g/L二、免疫球蛋白A检测临床意义：1、IgA增高：IgA型MM、SLE、肝硬化、肾脏疾病2、IgA降低：反复呼吸道感染、非IgA型MM、原发性和继发性免疫缺陷病三、免疫球蛋白M检测nIgM是分子质量最大的Ig;n占血清总Ig的 5~10％;n是有效的凝聚和溶解细胞的因子。

参考值：0.5~2.6g/L三、免疫球蛋白M检测临床意义：1、IgM增高：初期病毒性感染、肝硬化、RA、SLE、原发性巨球蛋白血症2、 IgM降低：IgG型重链病、IgA型MM、先天性免疫缺陷症、免疫抑制疗法四、免疫球蛋白E检测n血清中最少的一种Ig;n与变态反应、寄生虫感染和过敏反应有关参考值：ELISA法：0.1~0.9mg/L四、免疫球蛋白E检测临床意义： 1、IgE增高：IgE型MM、重链病、肝脏病、结节病、RA以及各种过敏性疾病（哮喘、荨麻疹、寄生虫感染）四、免疫球蛋白E检测临床意义： 2、IgE降低：①先天性或获得性丙种球蛋白缺乏症②恶性肿瘤③应用免疫抑制剂五、血清M蛋白检测M蛋白又称单克隆免疫球蛋白，是一 种单克隆B细胞增殖产生的具有相同结构 和电泳迁移率的免疫球蛋白分子及其分 子片段参考值：阴性五、血清M蛋白检测临床意义：阳性提示单克隆免疫球蛋白增殖病MM 、巨球蛋白血症、重链病、轻链病、半分子病、7S IgG病第二节血清补体检测概述n补体（complement,C）是一组具有酶原活性的糖蛋白；n补体参与灭活病原体的免疫反应；n补体也参与自身免疫损伤；一、总补体溶血活性检测nCH50以溶血素致敏的绵羊红细胞（抗原 抗体复合物）激活待测血清的C1，引起 补体活化的连锁反应，最终引起绵羊红 细胞溶解。

n溶血程度与补体量呈正相关，为S形曲线 关系n一般以50％溶血作为检测终点（ CH50 ） 一、总补体溶血活性检测参考值：试管法50～100kU/L临床意义：主要反映补体传统途径 活化的活性程度①CH50增高：见于急性炎症、组织损伤、恶性肿瘤一、总补体溶血活性检测临床意义：①CH50减低：更有意义见于各种免疫复合物性疾病，如肾小球肾炎、自身免疫性疾病（SLE）、感染性心内膜炎、病毒性肝炎和慢性肝病三、补体C3检测n补体C3是一种由肝脏合成的β2－球 蛋白，由α和β两条多肽链组成；n在补体系统各成分中含量最多；n是传统途径和旁路途径被激活的关 键物质；三、补体C3检测参考值：0.8~1.5g/L临床意义： ①增高：见于急性炎症、传染病早期、肿 瘤、排异反应 ②减低：见于急性肾小球肾炎、链球菌感 染后肾炎、狼疮肾炎；活动性的SLE、 RA四、补体C4检测n是一种多功能β1－球蛋白.n在补体活化、促进吞噬、防止免疫 复合物沉着和中和病毒方面发挥作 用.参考值：0.2~0.6g/L四、补体C4检测临床意义： ①升高：急性风湿热、结节性动脉炎 、皮肌炎 ②降低：自身免疫性肝炎、1型糖尿病 、SLE、狼疮肾炎、RA、SSc、IgA 性肾病、胰腺癌。

第三节细胞免疫检测概述n人体淋巴细胞分为T、B、NK等细胞 群；n其分别有若干亚群，并各有其特异 的表面标志和功能；n临床上各种免疫病可出现不同淋巴 细胞数量和功能的变化；一、T细胞亚群的检测（一）T细胞花结形成试验T细胞表面有绵羊红细胞（SRBC ）受体，可与SRBC结合形成花结样 细胞，称为红细胞玫瑰花结形成试 验或E玫瑰花结形成试验（ERFT） 一、T细胞亚群的检测n以每个T淋巴细胞粘附≥3个羊红细胞 者称为花结形成细胞（EtRFC）n显微镜下计数花结形成细胞占淋巴 细胞的比例，而检测T细胞的数量n不能反映T细胞的免疫功能 参考值：EtRFC 64.4±6.7％一、T细胞亚群的检测临床意义： ①降低：：见于免疫缺陷疾病，如恶性肿 瘤、免疫性疾病、大面积烧伤、多发性 神经炎等 ②升高：见于甲亢、甲状腺炎、重症肌无 力、慢活肝、SLE活动期和器官移植排 斥反应一、T细胞亚群的检测（二）T细胞转化试验⑴体外培养时，T淋巴细胞被PHA和 ConA刺激，转化为母细胞⑵计数淋巴细胞和转化的母细胞数 ，求出转化率一、T细胞亚群的检测参考值：形态学法：转化率60.1±7.6％ 临床意义：同T淋巴细胞花结试验，但Down综合征时明显增高。

①反映T细胞的免疫功能；②估计疾病的疗效和预后；一、T细胞亚群的检测（三）T细胞分化抗原测定nT细胞膜表面有许多特异性抗原，统称为 白细胞分化抗原（CD）；n CD3代表总T细胞CD4代表T辅助细胞（TH）CD8代表T抑制细胞（TS）一、T细胞亚群的检测参考值：免疫荧光法 流式细胞术CD3 63.1±10.8％ 61~85％CD4 42.8±9.5％ 28~58％CD8 19.6±5.9％ 19~48％ CD4/CD8 2.2±0.7/1 0.9~2.0/1一、T细胞亚群的检测临床意义： ⑴ CD3减低：见于自身免疫性疾病，如 SLE、RA ⑵ CD4减低：见于恶性肿瘤、遗传性免疫 缺陷症、艾滋病、应用免疫抑制剂者 ⑶ CD8减低：见于自身免疫性疾病或变态 反应性疾病一、T细胞亚群的检测临床意义： ⑷ CD4/CD8比值增高：①见于恶性肿瘤、自身免疫性疾病、 病毒感染、变态反应；②提示器官移植后的排斥反应一、T细胞亚群的检测临床意义： ⑸ CD4/CD8比值减低：见于艾滋病（常300µg/L 2、生殖腺胚胎癌（睾丸癌、卵巢癌、畸胎瘤）、胃癌、胰腺癌时，AFP可增高。

一、蛋白质肿瘤标志物的检测临床意义：3、病毒性肝炎、肝硬化AFP ↑（20~200µg/L） 4、妊娠3～4月， AFP开始增高，7～8月达到高峰，然后下降多低于300µg/L一、蛋白质肿瘤标志物的检测（二）癌胚抗原（CEA）测定nCEA是一种富含多糖的蛋白复合物 ，胎儿六月后渐减少，出生时含量 极低nCEA水平对肿瘤的诊断、预后、复 发的判断有意义一、蛋白质肿瘤标志物的检测参考值： ELISA法和RIA法60µg/L 2、CEA浓度随病情变化而波动一、蛋白质肿瘤标志物的检测临床意义： 3、结肠炎、胰腺炎、肝脏疾病、哮喘等也常见CEA轻度增高 4、胃液和唾液中CEA对胃癌诊断有一定价值二、糖脂肿瘤标志物检测（一）癌抗原-50（CA-50）测定CA-50是一种肿瘤糖类相关抗原， 对肿瘤的诊断有广泛性参考值：IRMA和CLIA法0～2.0万u/L二、糖脂肿瘤标志物检测临床意义： 1、增高见于87％的胰腺癌、80％胆囊 癌、73％的原发性肝癌、50％的卵 巢癌、20％的结肠癌、乳腺癌、子 宫癌二、糖脂肿瘤标志物检测临床意义：2、动态观察其水平变化对肿瘤疗效 、预后判断及复发检测具有意义3、鉴别良恶性胸腹水。

4、慢性肝病时增高二、糖脂肿瘤标志物检测（三）糖链抗原19-9（CA19-9）CA19-9是一种糖蛋白，在成人的 胰、胆部位少量存在参考值：健康人血清CA19-9<3.7万u/L二、糖脂肿瘤标志物检测临床意义： 1、胰腺癌、肝胆和胃肠道疾病可明显 增高其阳性率胰腺癌85～95％， 胆囊癌和胆管癌85％，胃癌、结肠 癌40％但无早期诊断价值 2、结合CEA检测，对胃癌诊断符合 率85％二、糖脂肿瘤标志物检测临床意义： 3、连续检测对病情进展、手术疗效、 预后估计、复发诊断有重要意义 4、急性胰腺炎、胆汁淤积型胆管炎、 胆石症、急性肝炎亦增高二、糖脂肿瘤标志物检测（四）癌抗原125（CA125）测定CA125是一种糖蛋白性肿瘤相关抗 原，存在卵巢肿瘤的上皮细胞内参考值：<3.5万u/L二、糖脂肿瘤标志物检测临床意义： 1、对诊断卵巢癌（阳性率60～90％） 有较大临床意义 2、宫颈癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、 胃癌、肺癌等 3、良性卵巢瘤、子宫肌瘤、肝硬化三、酶类肿瘤标志物检测（一）前列腺酸性磷酸酶测定PAP是一种前列腺外分泌物中能 水解磷酸脂的糖蛋白参考值：RIA法和CLIA法≤2.0µg/L三、酶类肿瘤标志物检测临床意义： 1、前列腺癌时明显增高，与癌瘤发展呈平行关系。

2、前列腺肥大、前列腺炎时，PAP水平升高三、酶类肿瘤标志物检测（三）异常凝集酶原（APT）测定肝细胞癌时可生成大量的APT， 故其测定是反映肝细胞癌的一种标 志物参考值：<20µg/L三、酶类肿瘤标志物检测临床意义： 1、APT增高：见于90％以上的肝细胞 癌，均值高达900µg/L 2、AFP水平较低的肝细胞癌，APT往 往增高 3、慢性肝炎、VitK缺乏症三、酶类肿瘤标志物检测（四）-L-岩藻糖苷酶（AFU）测定nAFU是一种溶酶体酸性水解酶，参 与糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢n原发性肝癌的标志物之一三、酶类肿瘤标志物检测参考值：ELISA法和分光光度连续监测法234~414µmol/L临床意义：1、原发性肝癌患者血清AFU增高，与AFP联合提高其诊断阳性率三、酶类肿瘤标志物检测临床意义： 2、动态观察以判断肝癌的疗效、预后、复发 3、在转移性肝癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌中可增高；肝硬化、慢性肝炎亦可轻度增高n掌握免疫球蛋白的参考值和临床意 义；n掌握补体的临床意义；n掌握T、 B淋巴细胞的临床意义；n掌握常见肿瘤标志物的检测结果和 临床意义；。