克林霉素磷酸酯乳膏剂的研制及其质量控制.doc

克林霉素磷酸酯乳膏剂的研制及其质量控制沈阳药学院药学系 2002 级 李烨堃摘要： 目的：介绍克林霉素磷酸酯乳膏剂的处方工艺研究过程，并对其质量 控制方法进行了研究方法：以硬脂酸、十八醇等作为油相辅料，制成克林霉素 磷酸酯水包油型乳膏剂，确定质量控制方法并进行稳定性研究 结果：按试验处 方工艺制备的样品经温度40°C、相对湿度75%条件下考察6各月，有关物质略有 上升，其它项目均无明显变化室温留样稳定性考察 12 个月，有关物质略有上升， 所检其它各项目均无明显变化结论：工艺可行，所得样品质量可控，具有刺激 性小，性质相对稳定的特点关键词 克林霉素磷酸，乳膏剂，质量控制，稳定性克林霉素磷酸酯乳膏剂主要用于治疗痤疮痤疮是一种最常见的皮肤病， 11~30 岁年龄组发病率较高，严重者可持续数年，甚至导致瘢痕，给病人造成严重 的精神损害其发病机理是由于皮脂腺管道阻塞，毛囊中皮脂腺产生过量的皮脂 及毛囊壁脱落的角质细胞过多而厌氧微生物痤疮丙酸杆菌可在过量的皮脂与毛 囊细胞的环境中繁殖，产生趋化因子及炎症前介质，引起炎症[1]克林霉素磷酸酯作用机制为抑制细菌蛋白质合成，其抗菌谱与盐酸林可霉素 相同，抗菌活性比盐酸林可霉素强 4-8 倍；克林霉素磷酸酯比盐酸克林霉素的脂 溶性和渗透性好，刺激性小。

品主要对革兰氏阳性球菌及厌氧菌有很强的抗菌活 性，对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血性链球菌、草绿色链球菌、肺炎链 球菌、白喉杆菌等革兰氏阳性菌以及消化链球菌、脆弱类杆菌、梭杆菌属、拟杆 菌属、丙酸杆菌属、真杆菌等厌氧球菌有抗菌作用克林霉素磷酸酯在试管中虽然没有活性，但表皮及粘膜上的磷酸酯酶可将克 林霉素磷酸酯水解成克林霉素而发挥作用文献报道 [2]，克林霉素可抑制所有培 养的痤疮丙酸杆菌，其最低抑菌浓度MIC约为0.4mg/ml本品与其它外用药物如 过氧化二苯甲酰及维甲酸比较疗效相同，但副作用如红肿、脱皮及痕痒等明显减 少克林霉素于1966年由Magerlein等研制成功，克林霉素磷酸酯于1989年在 美国上已开发的剂型有注射剂、溶液剂、凝胶剂等将克林霉素磷酸酯制成 O/W 型乳膏，适用于干燥或敏感皮肤的痤疮患者，同时避免其它酒精溶剂的外用药对 皮肤造成的过度干燥或刺激，无油腻感，故我们研制了克林霉素磷酸酯乳膏剂， 国外上市外用制剂规格为：10mg： 10g和20mg： 20g，我们确定制备本品规格为： 20mg： 20g1、 仪器与试药电子天平（上海天平仪器厂）；电动搅拌器（博山电机厂）；恒温水浴（博山恒温设备有限公司）岛津高效液相色谱仪，LC-10Advp泵，SPD-lOAvp检测器， SIL-1OA自动进样器，CLASS-VP5.0色谱工作站。

克林霉素磷酸酯（安徽先锋医药有限公司）；硬脂酸（上海化工试剂有限公司）； 十八醇（沈阳试剂一厂）；尼泊金甲酯（江苏昆山日用化工厂）2、处方工艺筛选过程2.1 工艺条件的选择按水包油型乳膏剂的常规制备工艺［4］，将水溶性成分溶于水中制成水溶液；水 不溶性成分在水浴中加热熔化成油性基质；搅拌条件下将油性基质缓缓加入到水 溶液中，保温，搅拌条件下冷却成均匀乳状半固体状态即得水包油型乳膏剂2.2 处方组成的确定及处方筛选过程2.2.1 处方组成的确定 克林霉素磷酸酯易溶于水，适合制备水包油型乳膏剂，可以将其溶解于水中 制成水溶液；油相采用常用辅料硬脂酸、单硬脂酸甘油酯等辅料［3］；甘油作为保湿 剂；尼泊金甲酯作为抑菌剂；十二烷基硫酸钠（或吐温-80）作为乳化剂2.2.2 处方筛选过程处方筛选主要以静置 12 小时后外观、稠度、显微镜下观察均匀性等为指标， 进行初步筛选，按较为理想的处方制备样品进行刺激性试验、质量研究及稳定性 研究后，确定最终处方处方筛选过程按下表进行试验：原辅料名称投料量（制备lOOOg样品） 单位：g处方1处方2处方3处方4处方5处方6克林霉素磷酸酯12.012.012.012.012.012.0硬脂酸8090100100100100.0单硬脂酸甘油酯505060606060.0甘油707070808080.0尼泊金甲酯1.01.01.01.01.01.0十二烷基硫酸钠5.07.510.010.0叶 温-80————10.020.0蒸馏水加至100010001000100010001000试 验 结静置12小时 后外观分层分层不分层不分层分层不分层稠度稀稀较稀适中适中适中显微镜下均 匀性——均匀均匀均匀均匀刺激性———阳性—阴性由上表可见，按处方 6 制备的样品分散均匀、稠度适中，刺激性小，结果较 为理想，初步确定处方 6 为基本处方，制备样品进行质量研究及稳定性研究。

3、样品制备[4]3.1取处方量的硬脂酸、单硬脂酸甘油酯在75°C水浴中加热熔化成油性基质；3.2取处方量的克林霉素磷酸酯、尼泊金甲酯及甘油加入到水中，以75C水 浴加热并搅拌使完全溶解，得澄明溶液；3 .3 边搅拌边将油性基质缓缓加入到水溶液中，保温 15 分钟，搅拌条件下 冷却，即得水包油型乳膏剂3.4 模拟上市乳膏剂药品包装，以铝管包装，每管 20g4、质量控制4.1 方法【pH值】 应为4.0~6.0 （参照中国药典2000年版二部附录WH）含量测定】克林霉素磷酸酯 照高效液相色谱法（参照中国药典2000年版二部附录VD）色谱条件与系统适用性实验 用十八烷基键合硅胶为填充剂，以磷酸二氢钾溶 液（10.54g KH2PO4溶于800ml水中，用磷酸调pH2.66）—乙腈（800： 210）为 流动相，检测波长为210nm,理论塔板数按克林霉素磷酸酯计算不应低于1000对照品溶液的制备取克林霉素磷酸酯对照品约30mg，精密称定，置于50ml 容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液的制备 精密量取本品2g于50ml容量瓶中，用流动相稀释至刻 度，摇匀，即得测定法精密量供试品溶液10M1注入液相色谱仪，记录色谱图，另取对照品 溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算供试品中可林霉素（C H ClNOS）的含18 33 2 5量，应为标示量的 90%~110%。

有关物质测定】测定方法参照含量测定，按外标法以峰面积计算供试品中 有关物质的量不应超过标示量的 5%4.2 方法学验证仪器与试药仪器Waster515泵，Waster2487紫外检测器，Waster717自动进样器试药 磷酸二氢钾（分析纯），磷酸（分析纯），乙腈（色谱纯）色谱条件色谱柱：ZORBAX SB-C18 4.6X 150mm 5um；流动相：磷酸二氢钾溶 液（磷酸二氢钾10.54g溶于900ml水中）-乙腈（900： 210）,用磷酸调pH2.65 检测波长：210nm；柱温：40°C ；流速：1.0ml/min4.2.1 杂质分离试验分别称取克林霉素磷酸酯乳膏约3g于50ml量瓶中，分别加0.1mol/L氢氧化 钠溶液0.5ml、3mol/L盐酸溶液0.5ml、双氧水0.3ml,振摇5分钟，加流动相适 量，于60C水浴中加热至基质熔化，放冷至室温，用流动相稀释至刻度，于冰箱 中冷冻 30 分钟，立即过滤，取滤液作为供试品溶液精密吸取 10ul 注入液相色 谱仪，记录色谱图结果表明，各条件下降解物与克林霉素磷酸酯峰及辅料峰分 离良好4.2.2 检测限及定量限精密称取克林霉素磷酸酯 20.60mg 于 50ml 量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻 度，逐步稀释该溶液，当浓度稀释至0.412ug/ml时进样10ul，记录色谱图，克林 霉素磷酸酯峰的峰高约为基线噪音的 3 倍；当浓度稀释至 1.236ug/ml 时，进样 10ul，克林霉素磷酸酯峰的峰高约为基线噪音的10倍，重复进样6次，RSD%为： 0.4%，因此用该方法测定有关物质检测限为4.12X 10-9g，定量限为1.236X 10-8g。

5、稳定性研究样品：根据上述工艺制得样品，样品号分别为： A、 B、 C、 D规格： 20g： 0.2g5.1 影响因素试验本品为乳膏剂，在影响因素考察过程中，若裸露放置，基质挥发，影响各指标 的测定因此，在对其进行光照、高温、低温等项考察中将其封入无色透明的玻 璃瓶中试验过程如下：5.1.1 光照试验取样品A将其封入无色透明玻璃瓶中，于光强为4500Lx进行光照试验，分别 于 5、 10 天取样，测定其有关项目（性状、有关物质、酸度、含量等），检验结果 见表一本品经光照10天考察，所检各项目均无明显变化，证明本品对光有相对 的稳定性高温试验：取样品A将其封入无色透明的玻璃瓶中，分别置于40C、60C恒温箱中，分别于5、10天取样测定结果如下：试验条件试验日期（天）性状酸度含量（ %）有关物质（ %）0白色乳状软膏4.5198.561.35光照5白色乳状软膏4.5898.061.4010白色乳状软膏4.5598.481.460白色乳状软膏4.5198.561.3540C5白色乳状软膏4.6098.521.6010白色乳状软膏4.5897.961.8040°C考察结果表明，本品经40°C考察10天，所检各项目均无明显变化，证 明本品在40C条件下有相对的稳定性。

60C考察3天，其基质完全熔化，取出后温度降低，乳膏分为液相和固相， 无法进行其有关项目的检验，证明本品在60C条件下不稳定5.2 加速试验将克林霉素磷酸酯乳膏样品（样品B、C、D）按模拟上市包装（铝管包装） 在温度40C、相对湿度75%条件下进行加速稳定性试验，分别于1个月、2个月、 3个月、 6个月末进行有关项目的检验，检验结果如下：批号考察时间（月）性状酸度含量（ %）有关物质 （ %）0白色乳状软膏4.44104.81.341白色乳状软膏4.45104.21.49B2白色乳状软膏4.48104.71.623白色乳状软膏4.48104.51.736白色乳状软膏4.55105.22.110白色乳状软膏4.53104.11.431白色乳状软膏4.53104.51.50C2白色乳状软膏4.56104.41.663白色乳状软膏4.58104.21.816白色乳状软膏4.58104.52.280白色乳状软膏4.48104.41.351白色乳状软膏4.45104.61.47D2白色乳状软膏4.48104.41.533白色乳状软膏4.50104.71.79白色乳状软膏4.53104.22.19结果表明，本品经温度40°C、相对湿度75%条件下考察6各月，有关物质略 有上升，其它项目均无明显变化。