输血管）吸收放散试验课件.ppt

吸收放散试验输血管）吸收放散试验吸收试验放散试验试 验 原 理试 剂操 作 步 骤注 意 事 项临 床 应 用 加热放散法 乙醚放散法试 验 原 理操 作 步 骤注 意 事 项临 床 应 用试 验 原 理操 作 步 骤注 意 事 项临 床 应 用主要内容输血管）吸收放散试验吸收试验原理待检红细胞已知效价的抗A或抗B血清吸收液已知抗原的红细胞滴定比较吸收前后血清中抗体效价红细胞上有无相应抗原及其强度间接判定待检红细胞血型及其亚型种类输血管）吸收放散试验试剂n抗A及抗B分型血清n2%A型及B型红细胞n受检红细胞输血管）吸收放散试验操作步骤1、吸收液的制备： 取受检红细胞用生理盐水洗涤3次，末次洗涤后将盐水倒尽，取压实红细胞1份，与等量抗A血清混合， 另取1份与等量抗B血清混合，置4冰箱至少1小时，每10分钟摇动试管1次（红细胞充分吸收抗体），离心后取上清液（即吸收液）输血管）吸收放散试验2、倍量稀释： 排列10mm60mm小试管4排，每排5支，每管各加生理盐水0.2 ml第1、3两排第1管分别加己吸的收抗A及抗B血清 0.2 ml；第2、4两排第1管分别加未吸收的抗A及抗B血清0.2 ml；分别作232的倍量稀释。

输血管）吸收放散试验3、第1、2两排每管各加2%A型红细胞盐水悬液0.2ml，第3、4两排每管各加2%B型红细胞盐水悬液0.2ml4、将试管振摇使红细胞充分混匀，置室温1小时（或1000r/min离心1min），观察凝集反应输血管）吸收放散试验结果判定1、吸收后，抗A效价较未吸收抗A效价显著降低或消失者为A型（同理判定B型），若吸收后抗A和抗B都显著下降为AB型，若吸收后抗A和抗B效价都无显著差异者为O型 输血管）吸收放散试验2、若试验目的是鉴定A亚型， 则按受检红细胞的吸收强度,A1A2A3AxAm的规律来判定 B亚型鉴定与此类似输血管）吸收放散试验注意事项1、试验所用抗A及抗B血清效价不宜过高，应先将抗血清效价稀释到32倍为宜若抗血清效价太高，抗血清被A亚型红细胞吸收后效价下降不明显，难以判断结果 输血管）吸收放散试验2、红细胞经洗涤压实，盐水应尽量去尽，以免抗血清被稀释3、吸收试验的温度应根据抗原抗体反应的最适温度来确定ABO系统以4为宜，Rh系统以37为宜输血管）吸收放散试验临床应用 本试验用以间接证明红细胞上血型抗原及其强度，常用于ABO亚型鉴定、全凝集或多凝集红细胞定型以及某种原因引起红细胞血型抗原减弱时的定型等。

输血管）吸收放散试验放散试验分类1、ABO血型IgM类抗体常用热放散法2、Rh血型IgG类抗体常用乙醚放散法输血管）吸收放散试验加热放散试验原理待检红细胞分型血清物理条件的改变（加热）抗体待检红细胞试 剂红细胞确定抗体的种类和强度判定待检红细胞上抗原的型别放散凝集或致敏输血管）吸收放散试验试剂1、 抗A和抗B分型血清2 、2%A型和B型试剂红细胞盐水悬液3 、受检红细胞输血管）吸收放散试验操作步骤1 、将受检红细胞以大量生理盐水洗涤3次，末次洗涤后，将盐水除尽，取压实红细胞1份，分别与2份抗A和抗B分型血清混合置4C 1 h，每隔10分钟将试管振摇1次，使充分混合(充分吸附) 输血管）吸收放散试验2 、离心去掉上清液，以4C冷盐水洗涤红细胞34次，倾去洗涤液，留取压实红细胞用1/2容积的生理盐水, 置56C水浴10分钟，每隔15秒振摇1次，使吸附在红细胞上的抗体充分放散输血管）吸收放散试验3、立刻以3000r/min离心，离心式套管内放温水，使温度尽量保持在56C， 分离得到的上清液即为放散液4 、将放散液用2%A型和B型试剂红细胞鉴定抗体，即可检出受检红细胞的血型输血管）吸收放散试验结果判定n鉴定A亚型：用已知A亚型红细胞按放散液抗体的强度A1A2A3AxAm，判定受检红细胞A亚型的型别。

nB亚型的放散液鉴定方法相似输血管）吸收放散试验1、为了获得最大量的抗体， 应加大吸收血清量2 、放散时，应严格注意温度和时间温度过高红细胞易溶解；温度过低，抗体从红细胞上放散不完全 注意事项输血管）吸收放散试验3、 放散液中抗体易变性，故应立即进行鉴定若需保存，应将抗体放散于AB血清或牛白蛋白溶液中输血管）吸收放散试验临床应用n热放散法常用于ABO亚型的鉴定，全凝集或多凝集红细胞的定型，类B的放散实验以及新生儿溶血病的诊断等输血管）吸收放散试验乙醚放散试验原理受检者血 清已知抗原的红细胞致敏已致敏红细胞乙醚放散液除去乙醚后鉴定抗体输血管）吸收放散试验试剂1、受检者血清 2、相应抗原的红细胞（抗凝血）3、乙醚（分析试剂）4、AB型血清输血管）吸收放散试验操作步骤1、 取具有相应抗原的抗凝血，离心后吸取血浆，加大量生理盐水洗涤1次，离心后取压实红细胞备用 2、 取受检者血清5ml，加压实红细胞1ml，混匀后放在适当温度中1h，期间摇匀12次，离心输血管）吸收放散试验3、离心后取出，将上清液吸出另放1管，鉴定上清液中抗体4、将红细胞用盐水洗涤3次，离心压实红细胞5、取1体积压实红细胞，加1体积AB型血清或生理盐水和2体积乙醚，颠倒混匀10min，然后以3000r/min离心5min。

输血管）吸收放散试验6、 离心后即分成三层，最上层是乙醚，中层是红细胞基质，下层是具有抗体的放散液，其色深红 7、用清洁的吸管吸出放散液 若有混浊，可再离心1次 8、将放散液放置37水浴30min（除尽乙醚），然后鉴定抗体输血管）吸收放散试验临床应用 本试验适用于鉴定Rh抗体最大优点用于检测获得性溶血性贫血，此种患者的红细胞为直接抗球蛋白试验阳性，说明在体内已有自身抗体吸附在红细胞上这种抗体常有Rh特异性 输血管）吸收放散试验Thank you！输血管）吸收放散试验输血管）吸收放散试验。