二非发酵菌鉴定药敏测试板使用说明书.doc

1非发酵菌非发酵菌 IDS-96IDS-96 测试板测试板 使用说明书使用说明书 【【概述概述】】本测试板专供在细菌学检验中，对氧化酶阳性的革兰氏阴性杆菌（主要是非发酵菌）进行鉴定和各 种抗菌药物的敏感度测定将被测菌加入测试板经孵育后，通过本系统分析即可将属于非发酵菌的 11 个 属，以及氧化酶阳性的发酵菌中 5 个属的细菌快速而准确地鉴定到种，同时判断被测菌对多种抗生素的 MIC，分析其耐药程度，打印出详细的检验报告，是国内迄今最完善而简便实用的细菌分析系统 药敏部分则完全按 NCCLS（2007）文件的规定执行菌株测试与国外同类产品进行数百株菌种的平行 比较符合率达 95%左右因此本产品具有较高的规范性和可靠性 【【试剂盒组成试剂盒组成】】 1．非发酵菌 IDS-96 测试板 10 块 2．非发酵菌稀释液（3ml/瓶） 10 瓶 3．非发酵药敏培养液（10ml/瓶） 10 瓶 4．简易操作流程 1 份 5．辅助试剂（硝酸盐还原试剂 A、硝酸盐还原试剂 B、无菌石蜡油、靛基质试剂、 ） 【【生化试验操作方法生化试验操作方法】】 1.所有的操作过程应避免杂菌污染。

2.使用本测试板的被测菌应符合以下三项要求： ●无特殊营养要求的革兰氏阴性杆菌； ●氧化酶试验阳性，或氧化酶阴性但厌氧葡萄糖不产酸； ●18-24 小时分离培养的单个纯菌落（或纯培养物） 3.菌液制备：挑取纯培养单个菌落于生化鉴定稀释液（3ml）瓶内壁研磨呈细菌悬液（0.5 麦氏单位） 4.连续移液器（配无菌吸头）吸取该菌液加入测试板 A1-A11 孔，B1- B10 孔，每孔 100ul 5.在 A1 孔(GLU)、A2 孔(H2S)分别滴加无菌石蜡 2 滴 【【药敏试验操作方法药敏试验操作方法】】 1、自非发酵菌稀释液吸菌悬液 100ul，加至非发酵菌药敏培养液内，混匀，继续加入测试板的其 余各孔， （所有的药敏孔、药敏生长对照 C+及 6.5%Nacl） ，每孔 100ul 2、剩余的菌液及吸头浸入杀菌溶液内浸泡灭菌 3、 撕开不干胶的纸对齐贴于鉴定板，35-37℃孵育 4、孵育 18-24h，于 A11 孔（IND）滴加靛基质试剂一滴，数分钟后再于 A10 孔（NIT）滴加硝酸盐 还原试剂 A、B 各一滴，立即判读结果 【结果判读】 1.将测试卡放进微生物自动分析仪读板，读板完毕后，传送到电脑，点击“判别”键后，即显示被测菌名称和各项药敏的分析结果，并打印报告单。

详细操作请参照黑马微生物分析系统 6.0中 4.10 的自动测试卡检测 2.具体操作详见黑马微生物分析系统《操作手册》 非发酵菌科非发酵菌科 IDS-96 测试板示意图测试板示意图2UREARGLYSORNGLUH2SGLUMNEXYLFRULACGEL16CAZ328C+SXT4CTX648CPS64CFP64 328GEN164TOB164AMS32PTZ1281632CHL32 16TET1642LEV8NITESCINDMANSUCMAL6.5%Nacl841CIP4TIM1283232PIP1286416OFL816FEP32168AMK64 32168NET32 168NOR16842IPM16848MRP1684ATM32 168CITMLT264166416168ONPG241【注意事项】 1．本测试板各孔底物系在无菌条件下真空冷冻干燥，密封包装，临用时先置室温预温，再在无菌操 作下打开，扳盖不可随意掀启，以防空气杂菌污染 2．使用前请仔细阅读本说明书、微生物分析仪《操作手册》和分析仪软件中的“帮助”系统 3．被测菌必须是新鲜的纯培养物，严格避免从平皿上刮取两种或两种以上的菌落或用陈旧的培养物 进行试验。

4．必须事先做好板外的鉴定试验，即革兰氏染色镜检和氧化酶试验（必要时还要观察动力） ，如果 未做，或做得不准确，板上的鉴定结果将可能出现根本性的错误板外试验的方法和要求详见黑马微生 物分析系统软件中的“帮助”栏 5．霍乱孤菌必须立即用诊断血清作玻片凝集试验，并在规定的时间内迅速报告 6．孵育 48 小时以后的反应结果不能作为判断的依据贮存】2-8℃保存废弃培养物处理】 高压灭菌或焚烧后丢弃有效期】1 年3附表附表 A A 反应结果判读标准反应结果判读标准结结 果果孔号孔号试验名称试验名称阴性阴性阳性阳性A1GLU 葡萄糖发酵紫色黄色A2H2S 硫化氢黄色或灰白色灰黑色A3URE 尿素酶黄色红色A4ARG 精氨酸水解黄色红色A5LYS 赖氨酸脱羧黄色紫色A6ORN 乌氨酸脱羧黄色红色A7ESC 七叶苷水解黄色或黄绿色褐色或黑色A8CIT 枸橼酸盐利用黄色或黄绿色蓝色A9MLT 丙二酸盐利用黄色或黄绿色蓝色A10NIT 硝酸盐还原加试剂后黄或深黄色加试剂后红色或红褐色A11IND 靛基质加试剂后黄色加试剂后红色B1GLU 葡萄糖氧化蓝色 黄色B2MAN 甘露醇产酸蓝色黄色或黄绿色B3SUC 蔗糖产酸蓝色黄色或黄绿色B4LAC 乳糖产酸蓝色黄色或黄绿色B5MNE 甘露糖产酸蓝色黄色或黄绿色B6MAL 麦芽糖产酸蓝色黄色或黄绿色B7FRU 果糖产酸蓝色黄色或黄绿色B8XYL 木糖产酸紫色黄色B9ONPG 半乳糖苷酶无色黄色B10GEL 明胶水解轻轻搅动后黑色颗粒不弥散 轻轻搅动后黑色颗粒弥散C126．5%Nacl清晰无色或淡黄色混浊或沉淀其余孔药敏试验清晰无色或淡黄色混浊或沉淀4附表附表 B B 药敏试验抗菌药物表药敏试验抗菌药物表类别类别药物名称（缩写）药物名称（缩写）NCCLS 分组分组哌拉西林（PIP）A替卡西林/棒酸（TIM）C氨苄西林/舒巴坦（AMS）C含 β-Lac 抑制剂的青霉素哌拉西林/他唑巴坦（PTZ）C头孢他定（CAZ）A头孢哌酮（CFP）B头孢吡肟（FEP）B头孢类头孢噻肟（CTX）头孢哌酮/舒巴坦（CPS）CC庆大霉素（GEN）A阿米卡星（AMK）B妥布霉素（TOB）B氨基糖苷类奈替米星（NET）C环丙沙星（CIP）B氧氟沙星（OFL）U诺氟沙星（NOR）U喹诺酮类左氧沙星（LEV）U磺胺类复方新诺明（SXT）C四环素类四环素（TET）U氯霉素类氯霉素（CHL）C亚胺培南（IPM）C氨曲南（ATM）C碳青酶烯类美罗培南（MRP）C注：NCCLS 分组说明： A 组：为一级试验的首选药物，必须常规报告其敏感度，若敏感，治疗时应优先选用。

B 组：也为一级试验的首选药物，但可以有选择地报告，当细菌对 A 组同类药物耐药或其他原因不 能使用及无效时，可以选用于治疗 C 组：替代性或补充性药物，有选择地报告，在细菌对 A、B 组药物耐药或不适用时，可选本组替 代 U 组：仅用于治疗泌尿道感染的药物，其他部位分离的病菌不必报告。