抗核抗体检测和抗核抗体谱检测在复发性流产诊断中的应用分析.docx

    抗核抗体检测和抗核抗体谱检测在复发性流产诊断中的应用分析    陆子贇 岳朝艳 应春妹【Summary】目的：通过对复发性流产（RSA）患者抗核抗体（ANA）检测结果的分析，探讨 ANA 检测与 RSA 的相关性方法：采用间接免疫荧光法（IIF）测定2020年7～12月收集的1432例 RSA 患者（观察组）与同时期无不良孕产史的134例正常孕妇（对照组）的 ANA，采用免疫印迹法（LIA）测定其 ANA 谱比较两个组别检测结果，并分析其与 RSA 关系结果：观察组中检出 ANA阳性292例（20.39%）对照组检出 ANA阳性9例（6.72%）观察组常见 ANA 核型为颗粒型（36.32%）和致密型（32.89%）观察组 ANA 谱检测，各类抗体均有检出，其中抗 Ro-52抗体（24.55%）和抗 SS-A 抗体（24.19%）检出率最高， ANA 阴性者也有 ANA 谱检出ANA 与 ANA 谱联合检测，两种方法联合检测阳性率达到27.65%，两种方法联合检测总体符合率达到.79.40%，观察组 ANA 和 ANA 谱联合检测的灵敏度为 98.49%，特异度为99.61%;观察组联合检测阳性率显着高于对照组，差异有统计学意义（χ2=20.47， P<0.01）。

结论： ANA及 ANA谱联合检测有助于 RSA 的临床诊断Key】复发性流产;抗核抗体;抗核抗体谱R446A 2096-5249（2022）06-0135-05Analysis of application of antinuclear antibody detection and an- tinuclear antibody spectrum detection in diagnosis of recurrent abortionLu Zi-yun， Yue Chao-yan， Ying Chun-mei△Department of Laboratory Medicine， Obstetrics and Gynecology Hospital Affiliated to Fudan University， Shanghai 200011， China【Abstract】Objective：To investigate the correlation between ANTinuclear antibody（ANA）and RSA in pa- tients with recurrent abortion（RSA）. Methods：Indirect immunofluorescence assay（IIF）was used to measure ANA in 1432 RSA patients（observation group）collected from July to December 2020 and 134 normal pregnant women（control group）without adverse pregnancy history during the same period. The results of the two groups were compared，and the relationship between RSA and the two groups was analyzed. Results：In the observa- tion group，292 cases（20.39%） were ANA positive. In the control group，9 cases（6.72%） were ANA positive. The common ANA karyotypes in the observation group were granular（36.32%）and dense（32.89%）. ANA spectrum detection showed that all kinds ofantibodies were detected in the observation group，among which anti-Ro-52 an- tibody（24.55%）and anti-SS-A antibody（24.19%）had the highest detection rates. ANA spectrum detection was also found in ANA negative patients. ANA and ANA spectrum combined detection，the positive rate of the com- bined detection of the two methods reached 27.65%，the overall coincidence rate of the combined detection of thetwo methods reached 79.40%，the sensitivity and speci?city ofthe combined detection of antinuclear antibody and antinuclear antibody spectrum of the observation group was 98.49%，99.61%. The positive rate of combined de- tection in observation group was significantly higher than that in control group，and the difference was statistically significant（χ2=20.47，P<0.01）. Conclusion：The combined detection of ANA and ANA spectrum is helpful forthe clinical diagnosis ofRSA.【Key words】Recurrent spontaneous abortion;Antinuclear antibodies;Antinuclear antibody spectrum复发性流产（recurrent spontaneous abortion，RSA）也称为习惯性流产，其定义为连续发生3次或3次以上的自然流产，通常发生的时间在妊娠20周前[1]。

引起 RSA 的病因既复杂多又样，而且可能同时有多种因素异常而致其发病，其中能够被识别的病因包括染色体异常、生殖道异常、内分泌和免疫功能异常等约占全部病因的50%进一步研究发现，夫妻染色体异常包括平衡易位、罗伯逊易位等可以影响 RSA 的染色体核型和基因多态性，从而表现为胚胎发育的基因出现病理性异常，影响免疫、内分泌等多种胚胎发育障碍，甚至引起胚胎死亡[2]引起 RSA 的原因之一是免疫反应，而抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）则是免疫反应的常见指标，很多研究表明 ANA 与 RSA 有相关性本研究旨在通过分析本院2020年7～12月1566例 RSA 患者和正常妊娠孕妇血清中的 ANA 及 ANA谱检测，分析导致 RSA 的相关指标，为临床 RSA 患者的诊断和治疗提供实验室依据1 对象与方法1.1研究对象选取在本院2020年7～12月收集的1432例 RSA 患者作为观察组，选取同时期就诊于本院的正常妊娠妇女共134例作为对照组观察组年龄22～47（34.4±4.3）岁，对照组年龄21～41（32.6±3.8）岁纳入标准： RSA 诊断符合世界卫生组织的相关标准：妊娠在20周以前终止，胎兒体重在500 g以下;均为自然受孕。

排除标准：合并有生殖器感染、畸形等相关病变;有自然流产史、死胎和死产史;精神异常不能配合研究1.2方法1.2.1试剂ANA 检测由德国欧蒙公司EUROBlotMasterⅡ全自动免疫印迹仪及相应配套试剂进行相关检测1.2.2试验方法抽取静脉血2 mL，静置30 min后离心（3000r/ min，10 min）血清操作过程严格按照仪器使用说明书进行并进行结果判定1.2.3原理检测 ANA 采用猴肝片及HEP-2细胞作为抗原基质，应用间接免疫荧光法（IIF）检测位置抗原和抗体采用免疫印迹法（LIA）检测 ANA谱，将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合，首先进行 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），然后进行电转移和酶免疫定位，综合SDS-PAGE 的高分辨力和 ELISA法的高特异性和敏感性，根据抗原抗体的特异性结合检测样品中的某种蛋白1.3统计学方法应用 SPSS 24.0进行数据统计和分析计数资料用[ n（%）]表示，应用χ2检验;计量资料符合正态性分布，则选择独立性 t 检验进行分析，以（±s）表示以 P<0.05认为差异有统计学意义2 结果2.1 ANA检测结果对比本研究中，观察组共1432例血清样本，检出ANA 阳性292例（20.39%）;对照组134例血清样本，检出 ANA 阳性9例（6.71%）。

观察组与对照组的 ANA 检测结果阳性率比较，差异有统计学意义（P<0.0001），见表12.2 ANA核型分布对比通过荧光显微镜下的细胞形态以及荧光染色模型的特征对 ANA 核型进行分类本研究患者血液样本中主要分离出颗粒型、胞浆型、致密型和核仁型，其中观察组颗粒型和致密型最常见，所占比例为36.30%和33.22%，对照组颗粒型和胞浆型更常见，所占比例为33.33%和33.33%观察组和对照组 ANA 核型分布比例比较无显着统计学差异（P>0.05），见表22.3 ANA谱检测结果对比对观察组1432例血液样本进行 ANA谱检测结果得出， ANA谱阳性的有205例（14.32%），相较于对照组134例样本的 ANA谱检测阳性的7例（5.22%）明显增高，差异具有统计学意义（P<0.001），见表32.4 ANA与ANA谱联合检测结果比较观察组 ANA 的阳性率为20.39%（292/1432），ANA 谱的阳性率为14.32%（205/1432）两种方法联合检测时，396例样本为阳性，阳性率达到27.65%，两种方法联合检测的总体符合率达到79.40%;对照组中 ANA 检测阳性率为6.72%（9/134），ANA谱检测阳性率为5.22%（7/134）。

两种检测方法联合检测时阳性率为9.70%（13/134），总体符合率达到92.54%两种方法联合检测时，观察组结果和对照组检测结果差异有统计学意义（P<0.001），见表42.5 ANA谱抗体类型分布对比ANA谱可检测15种特异性抗体，包括核糖核蛋白（nRNP）抗体、抗史密斯抗体（Sm）、抗组氨酰转运 RNA 合成酶（Jo-1）抗体、干燥综合征相关抗体SSA 和 SSB、 ROPM-Scl、CENPB、抗增殖细胞核抗原（PCNA）抗体、抗双链 DNA（dsDNA）抗体、抗核小体抗体（AnuA）等本研究中，观察组中有205例 ANA谱阳性，各种不同 ANA谱抗体共检出277例次，百分比居前2位的抗体分别是抗Ro-52抗体和抗SS-A抗体，所占比例分别是24.55%和24.19%，见表5本研究中，对照组中有3例 ANA 阳性和 ANA谱同时阳性的样本，8例样本 ANA 阴性而 ANA谱呈阳性，共计检出11例次 ANA谱阳性抗体观察组与对照组 ANA谱抗体类型分布无统计学差异（P>0.05），见表52.6抗核抗体和抗核抗体谱联合检测的准确性将观察组1432例 RS。