结核分枝杆菌特异性抗原检测在临床诊断中的意义.doc

呼吸内科专业优秀论文呼吸内科专业优秀论文 结核分枝杆菌特异性抗原检测在临床诊断结核分枝杆菌特异性抗原检测在临床诊断中的意义中的意义关键词：结核分支杆菌关键词：结核分支杆菌 特异性抗原特异性抗原 肺结核肺结核 卡介苗卡介苗 临床诊断临床诊断摘要：近年来结核病疫情呈现上升趋势，是目前感染率和死亡率最高的传染性 疾病，结核病的快速诊断是全球控制结核病的重要措施目前对结核病的诊断 主要依据细菌学检查与结核菌素试验，由于结核分枝杆菌(mycobacrterium tuberculosis，MTB)本身生长特点以及卡介苗(Bacillus Calmette- Guerin，BCG)接种在我国的广泛使用，使得这些方法对结核病诊断极为有限 ESAT-6(early secretory antigrntic target-6，ESAT-6)是一种特异性低分子 质量分泌性蛋白lt;#39;[9]gt;，仅存在于致病性结核杆菌中， 如人型、牛型、非洲及某些非典型分枝杆菌(如堪萨斯、苏尔加和海水分枝杆菌)， 而 BCG 及其他非致病性分枝杆菌则不含有ESAT-6 能刺激机体产生特异性免疫 球蛋白，因此利用其结合特性，采用 ELISA 方法检测患者血清抗原和抗体含量， 就可以区分 MTB 感染还是接种了 BCG。

CFP-10 (culture filtrate protein-10)是 1998 年鉴定出来的低分子质量蛋白，能被特异性识别并释放 γ 干扰素(interfe ron-γ，IFN-γ)因此，CFP-10 可作为 T 细胞诊断抗原 CFP-10 和 ESAT-6 联合可使敏感性提高到 90％，特异性提高到 97％ 本文 通过 ELISA 实验在血清中检测 CFP-10 和 ESAT-6 这两种结核分枝杆菌特异性抗 原在确诊肺结核病患者、肺炎患者以及排除了其他传染病的正常人群中的表达， 与结核菌素实验在上述人群中的检测及这两种实验方法在特异度和灵敏度的比 较，研究及评价该实验在临床诊断中的意义 实验材料与方法: 1、病例 选择选取沈阳市胸科医院住院患者 60 例，其中 20 例为确诊肺炎患者，其中 40 例为肺结核确诊病例，其中男性 23 例，女性 17 例，年龄在 16 到 69 岁之间 (所有患者满足以下标准 1．初治患者尚未开始用结核药；2．复治患者未用结 核药一年以上)正常对照组 20 例，选取结核菌素(PPD)实验阴性人群，主要为 10 岁以下儿童 2、标本处理 采集所有受试对象(结核病患者在接受抗结 核治疗前)空腹静脉血 2ml，3000 转/min 离心 3 分钟，分离血清，-20℃保存。

3、实验方法测定 (1)ELISA 实验 ①取 100ul 不同浓度的标准品及血清加 入反应在孔中，25℃放置 1 小时 ②冲洗 3 次后，加入酶标记的抗体，2512 放置 1 小时 ③冲洗 3 次后， 、加入显色液，20 分钟后，在所有孔内都加入 100ul 终止液，混匀后即用酶标仪在 450nm 处测定各孔溶液的吸光度值 (2)结 核菌素实验(PPD 实验)实验方法：TST 法选择左侧前臂曲侧中上三分之一处， 0.1ml(5IU)皮内注射，用 26 号 10mm 长的一次性短斜面的针头和 1ml 注射器， 注射后应能产生凸起的皮丘，边界清楚，上面可以看见明显的小凹实验后 48-72 小时看结果 实验结果: 1、通过 ELISA 法对三组人群进行结核菌 检测的阳性率的比较，结果分别为肺结核组与肺炎组的 P 值lt;0.01，肺 结核组与正常对照组的分析结果 P 值lt;0.01，在正常组与肺炎组的对照 结果 P 值gt;0.05其中肺结核组与肺炎组比较的特异度和灵敏度分别为 92.5％和 80％，肺结核组和正常组比较的灵敏度和特异度分别为 92.5％和 90％。

说明肺结核病患者与肺炎组和正常组比较均有统计学意义，而肺炎组与 正常组比较没有统计学意义 2、通过皮试法(TST 法)进行结核菌素实验对三组人群结核菌阳性率的比较得出的结果肺结核组与肺炎组的 P 值 gt;0.05，无统计学意义，灵敏度为 95％，特异度仅为 5％;肺结核组与正 常对照组的比较中 Plt;0.01，有统计学意义，灵敏度和特异度分别为 95％和 100％;肺炎组和正常对照组 P 值lt;0.01，有统计学意义 结 论: 本次实验通过两种实验方法对三组人群进行了结核菌感染情况的检验及 对比，并对检验结果进行了统计学分析，对该实验的可行性给予了明确表述， 实验结果表明 ELISA 实验法在各组人群的对照中灵敏度特异度均普遍高于 PPD 实验方法，并且在肺结核和肺炎的鉴别诊断中有统计学意义，说明该实验在临 床中对肺结核的鉴别诊断是有价值的正文内容正文内容近年来结核病疫情呈现上升趋势，是目前感染率和死亡率最高的传染性疾 病，结核病的快速诊断是全球控制结核病的重要措施目前对结核病的诊断主 要依据细菌学检查与结核菌素试验，由于结核分枝杆菌(mycobacrterium tuberculosis，MTB)本身生长特点以及卡介苗(Bacillus Calmette- Guerin，BCG)接种在我国的广泛使用，使得这些方法对结核病诊断极为有限。

ESAT-6(early secretory antigrntic target-6，ESAT-6)是一种特异性低分子 质量分泌性蛋白lt;#39;[9]gt;，仅存在于致病性结核杆菌中， 如人型、牛型、非洲及某些非典型分枝杆菌(如堪萨斯、苏尔加和海水分枝杆菌)， 而 BCG 及其他非致病性分枝杆菌则不含有ESAT-6 能刺激机体产生特异性免疫 球蛋白，因此利用其结合特性，采用 ELISA 方法检测患者血清抗原和抗体含量， 就可以区分 MTB 感染还是接种了 BCG CFP-10 (culture filtrate protein-10)是 1998 年鉴定出来的低分子质量蛋白，能被特异性识别并释放 γ 干扰素(interfe ron-γ，IFN-γ)因此，CFP-10 可作为 T 细胞诊断抗原 CFP-10 和 ESAT-6 联合可使敏感性提高到 90％，特异性提高到 97％ 本文 通过 ELISA 实验在血清中检测 CFP-10 和 ESAT-6 这两种结核分枝杆菌特异性抗 原在确诊肺结核病患者、肺炎患者以及排除了其他传染病的正常人群中的表达， 与结核菌素实验在上述人群中的检测及这两种实验方法在特异度和灵敏度的比 较，研究及评价该实验在临床诊断中的意义。

实验材料与方法: 1、病例 选择选取沈阳市胸科医院住院患者 60 例，其中 20 例为确诊肺炎患者，其中 40 例为肺结核确诊病例，其中男性 23 例，女性 17 例，年龄在 16 到 69 岁之间 (所有患者满足以下标准 1．初治患者尚未开始用结核药；2．复治患者未用结 核药一年以上)正常对照组 20 例，选取结核菌素(PPD)实验阴性人群，主要为 10 岁以下儿童 2、标本处理 采集所有受试对象(结核病患者在接受抗结 核治疗前)空腹静脉血 2ml，3000 转/min 离心 3 分钟，分离血清，-20℃保存 3、实验方法测定 (1)ELISA 实验 ①取 100ul 不同浓度的标准品及血清加 入反应在孔中，25℃放置 1 小时 ②冲洗 3 次后，加入酶标记的抗体，2512 放置 1 小时 ③冲洗 3 次后， 、加入显色液，20 分钟后，在所有孔内都加入 100ul 终止液，混匀后即用酶标仪在 450nm 处测定各孔溶液的吸光度值 (2)结 核菌素实验(PPD 实验)实验方法：TST 法选择左侧前臂曲侧中上三分之一处， 0.1ml(5IU)皮内注射，用 26 号 10mm 长的一次性短斜面的针头和 1ml 注射器， 注射后应能产生凸起的皮丘，边界清楚，上面可以看见明显的小凹。

实验后 48-72 小时看结果 实验结果: 1、通过 ELISA 法对三组人群进行结核菌 检测的阳性率的比较，结果分别为肺结核组与肺炎组的 P 值lt;0.01，肺 结核组与正常对照组的分析结果 P 值lt;0.01，在正常组与肺炎组的对照 结果 P 值gt;0.05其中肺结核组与肺炎组比较的特异度和灵敏度分别为 92.5％和 80％，肺结核组和正常组比较的灵敏度和特异度分别为 92.5％和 90％说明肺结核病患者与肺炎组和正常组比较均有统计学意义，而肺炎组与 正常组比较没有统计学意义 2、通过皮试法(TST 法)进行结核菌素实验对 三组人群结核菌阳性率的比较得出的结果肺结核组与肺炎组的 P 值 gt;0.05，无统计学意义，灵敏度为 95％，特异度仅为 5％;肺结核组与正 常对照组的比较中 Plt;0.01，有统计学意义，灵敏度和特异度分别为 95％和 100％;肺炎组和正常对照组 P 值lt;0.01，有统计学意义 结论: 本次实验通过两种实验方法对三组人群进行了结核菌感染情况的检验及 对比，并对检验结果进行了统计学分析，对该实验的可行性给予了明确表述， 实验结果表明 ELISA 实验法在各组人群的对照中灵敏度特异度均普遍高于 PPD 实验方法，并且在肺结核和肺炎的鉴别诊断中有统计学意义，说明该实验在临 床中对肺结核的鉴别诊断是有价值的。

近年来结核病疫情呈现上升趋势，是目前感染率和死亡率最高的传染性疾病， 结核病的快速诊断是全球控制结核病的重要措施目前对结核病的诊断主要依 据细菌学检查与结核菌素试验，由于结核分枝杆菌(mycobacrterium tuberculosis，MTB)本身生长特点以及卡介苗(Bacillus Calmette- Guerin，BCG)接种在我国的广泛使用，使得这些方法对结核病诊断极为有限 ESAT-6(early secretory antigrntic target-6，ESAT-6)是一种特异性低分子 质量分泌性蛋白lt;#39;[9]gt;，仅存在于致病性结核杆菌中， 如人型、牛型、非洲及某些非典型分枝杆菌(如堪萨斯、苏尔加和海水分枝杆菌)， 而 BCG 及其他非致病性分枝杆菌则不含有ESAT-6 能刺激机体产生特异性免疫 球蛋白，因此利用其结合特性，采用 ELISA 方法检测患者血清抗原和抗体含量， 就可以区分 MTB 感染还是接种了 BCG CFP-10 (culture filtrate protein-10)是 1998 年鉴定出来的低分子质量蛋白，能被特异性识别并释放 γ 干扰素(interfe ron-γ，IFN-γ)。

因此，CFP-10 可作为 T 细胞诊断抗原 CFP-10 和 ESAT-6 联合可使敏感性提高到 90％，特异性提高到 97％ 本文 通过 ELISA 实验在血清中检测 CFP-10 和 ESAT-6 这两种结核分枝杆菌特异性抗 原在确诊肺结核病患者、肺炎患者以及排除了其他传染病的正常人群中的表达， 与结核菌素实验在上述人群中的检测及这两种实验方法在特异度和灵敏度的比 较，研究及评价该实验在临床诊断中的意义 实验材料与方法: 1、病例 选择选取沈阳市胸科医院住院患者 60 例，其中 20 例为确诊肺炎患者，其中 40 例为肺结核确诊病例，其中男性 23 例，女性 17 例，年龄在 16 到 69 岁之间 (所有患者满足以下标准 1．初治患者尚未开始用结核药；2．复治患者未用结 核药一年以上)正常对照组 20 例，选取结核菌素(PPD)实验阴性人群，主要为 10 岁以下儿童 2、标本处理 采集所有受试对象(结核病患者在接受抗结 核治疗前)空腹静脉血 2ml，3000 转/min 离心 3 分钟，分离血清，-20℃保存 3、。