生理学综合实验论文.doc

温度胁迫对植物膜系统的伤害摘要：小麦幼苗为实验材料，设置不同温度处理（高温、低温、常温），以常温为对照, 分别用电导法和双组分分光光度计法测定得出小麦幼苗对温度胁迫的反映关键词:小麦幼苗；温度胁迫；MDA一、 弓［言现今环境，全球不稳定的温度是对植物的最大威胁，而温度又是影响植物抗 逆性的一个重要因素，所以通过测定温度胁迫对植物的伤害来研究提高植物抗逆 性的方法本实验则是用电导法和双组分光光度计法测定小麦幼苗对•温度胁迫的 反映二、 实验目的这次实验通过电导率仪法测定小麦幼苗的抗逆性，使我们进一步认识到膜系 统的结构和功能;而通过细胞膜脂过氧化作用的测定，使我们掌握了内二醛（MDA） 测定的原理和技术三、 实验原理电导率仪法的测定原理在于植物受到逆境环境（高温、低温）伤害时•膜的功 能受损或结构遭到破坏而透性增大，细胞内的水溶性物质外渗到无高子水中，导 致组织浸泡液的电导率产生变化，通过测定外液的导电能力即可比较不同逆境下 植物的抗逆性强弱双组分分光光度计法测定MDA含量的原理在于MDA为植物在逆境（高温、低 温）伤害时发生过氧化作用的产物之一，而MDA在酸性、高温条件下与硫代巴比 妥酸（TBA）反应生成红棕色的三甲川。

通过测定MDA的含量即可反映出不同逆 境（高温、低温）伤害下植物细胞膜脂的过氧化作用四、 实验材料分别经过高温、常温、低温处理过的小麦幼苗五、 实验器材和试剂电子天平、研钵、剪刀、TBA溶液、移液管、离心机、离心管、分光光度计、 电导率仪、恒温水溶锅、试管、镣子、TCA溶液等六、 实验步骤1、 由于实验两个同学一•组，于是一人先分别取高温、常温、低温处理过的 小麦幼苗的根系上端的叶子1g,剪碎放于3个研钵中，再分别加入2mlTBA溶液, 然后开始研磨，成匀浆后再分别加入8mlTBA,搅匀后倒入3个离心管，用标签 标注好高温、常温、低温，放入离心机离心2、 再分别取不同温度处理后的小麦幼苗10株（尽量不伤害根系），用锲子 除去幼苗上的胚乳，先用自来水冲洗，再用蒸儒水冲洗，然后轻轻放入3支塑料 大试管中，加入蒸馄水，盖上盖子，并标注3、 一人将上述3支塑料大试管摇晃20mino4、 在第1步后离心后，另一人拿出离心管，取上清液5ml于3支试管中， 并标注好在常温试管中加入2ml蒸馄水，在高温和低温两支试管中分别加 2mlTBA,再拿去沸水浴15mino5、 摇晃好后拿到电导率仪下测定电导率，一•人测定，一•人作好记录。

完后 将3支塑料大试管进行沸水浴lOmino6、 此口寸洗好实验台桌面上的研钵等器材7、 将沸水浴中3支装有离心过后的溶液的试管拿出，迅速冷却后再放入离 心机进行离心8、 此时一人将沸水浴中有完整根系的塑料大试管拿出，摇晃20mino9、 另一人拿出离心机里的离心管，分别取上清液测定450nni、53211E、600nin 波长下的消光度，另一人作好记录10、 最后将摇晃好了的装有完整根系的塑料大试管拿到电导率仪下测定煮沸 后的电导率，一人测定，另一人作好记录11、 收拾实验台面，清洗器材七、实验结果分析1、细胞膜脂过氧化作用实验现象：研磨过的小麦溶液呈淡褐色；离心后的 上清液中加入TBA,煮沸后溶液呈红棕色分光光度计数据：450nm532nm600nm对照高温0. 2770. 1130. 0441.231低温0. 2780. 1140. 0461.013常温0. 2430. 1150. 0501.057MDA 浓度（umol • L ‘）=6. 45 （0愿厂（颇）-0. 560D45oMDA含量（umol • g ）=（提取液总体积*反应液总体积）/（植物组织鲜重*参加反应 的提取液体积）*MDA浓度由上,得出结果:MDA含量:高温=1. 15972umol • g1低温=1. 18328umol • g 1常温=1. 13268umol • g 1分析图见下低温I oj iim常温含量植物器官在高温、低温下时，发生了膜脂过氧化作用。

其MDA含量应高于常 温，根据上图可知，高温和低温时的MDA含量均高于常温时的含量，并旦低温下 MDA的含量大于•高温下MDA的含量，所以说低温逆境的破坏程度比高温逆境的破 坏程度大，故本实验结果相对准确2、电导率数据:煮沸前煮沸后伤害率高温47.3172.327. 45%低温61.7183.433. 64%常温49.4182. 127. 13%伤害率二处理电导率 煮沸电导率xlOO%汽细胞受到高温或低温条件时，细胞膜差别透性就会改变或丧失，导致细胞 内的物质（尤其是电解质）大量外渗，导致组织浸泡液的电导率增大通过上图 可知，高温和低温条件下的伤害率比常温下高，并且低温下的伤害率大于高温下 的伤害率，所以低温对植物的伤害大于高温对植物的伤害八、总结植物的生长发育需要一定的温度条件，汽环境温度超出了它们的适应范围, 就对植物形成胁迫;温度胁迫持续一•段时间，就可能对植物造成不同程度的损害 温度胁迫包括高温胁迫、低温胁迫和剧烈变温胁迫通过这次实验，结果表明低、高温都对植物膜系统造成伤害，低温伤害更 大参考文献：《植物生理学》（箫浪涛 王三根主编）2003年12月《植物生理学实验技术指导》（王三根主编）。