细菌形态学检查.ppt

细菌形态学检查细菌形态学检查细菌的显微镜检查细菌的显微镜检查显微镜：光学显微镜显微镜：光学显微镜所用放大倍数：所用放大倍数：10×100＝＝1000所用镜头：油镜头所用镜头：油镜头镜油：香柏油或石蜡油镜油：香柏油或石蜡油香柏油折光率（香柏油折光率（n＝＝1.515）与玻片折光率）与玻片折光率（（n＝＝1.52）接近）接近显微镜使用完毕须擦拭镜头显微镜使用完毕须擦拭镜头不染色标本检查不染色标本检查应用：主要用于观察活菌的动力和运动应用：主要用于观察活菌的动力和运动方式方式常用方法：压滴法、悬滴法、暗视野映常用方法：压滴法、悬滴法、暗视野映光法光法压滴法压滴法载玻片载玻片细菌悬液细菌悬液盖玻片盖玻片悬滴法悬滴法镜检镜检染色标本的检查染色标本的检查染色方法的种类染色方法的种类单染法单染法:采用一种染料染色采用一种染料染色复染法（复染法（鉴别染色鉴别染色））:采用两种或两种以采用两种或两种以上的不同染料进行先后染色，使不同种上的不同染料进行先后染色，使不同种类的细菌、同种细菌的不同结构，分别类的细菌、同种细菌的不同结构，分别染上不同的颜色，以便鉴别细菌染上不同的颜色，以便鉴别细菌染色标本检查的基本程序染色标本检查的基本程序涂片－涂片－→干燥－干燥－→固定－固定－→染色染色★★涂片方式涂片方式★★干燥的方法干燥的方法★★固定的方法、目的固定的方法、目的★★染料种类：碱性染料、酸性染料、中性染染料种类：碱性染料、酸性染料、中性染料，料，碱性染料最常用碱性染料最常用复染法基本程序复染法基本程序初染－初染－→媒染－媒染－→脱色－脱色－→复染复染革兰染色法（革兰染色法（Gram染色）染色）染液组成：染液组成： 结晶紫染液、卢戈碘液、结晶紫染液、卢戈碘液、95％乙醇、稀释％乙醇、稀释复红复红染色方法：染色方法：结晶紫结晶紫 初染初染卢戈碘液卢戈碘液 媒染媒染95％乙醇％乙醇 脱色脱色稀释复红稀释复红 复染复染1分钟分钟30S～～1min1分钟分钟影响革兰染色的关键步骤是影响革兰染色的关键步骤是脱色脱色革兰染色结果革兰染色结果紫色－－革兰阳性菌紫色－－革兰阳性菌红色－－革兰阴性菌红色－－革兰阴性菌染色结果图染色结果图革兰阳性菌革兰阳性菌革兰阴性菌革兰阴性菌染色原理染色原理★★渗透学说：与肽聚糖结构有关渗透学说：与肽聚糖结构有关★★化学学说：与细菌细胞质中核糖核酸镁盐化学学说：与细菌细胞质中核糖核酸镁盐有关有关★★等电点学说：与细菌所带电荷有关等电点学说：与细菌所带电荷有关革兰染色意义革兰染色意义★★有助于鉴别细菌有助于鉴别细菌★★有助于选择用药有助于选择用药★★有助于了解细菌的致病性有助于了解细菌的致病性影响革兰染色的因素影响革兰染色的因素操作因素操作因素★★涂片的厚薄涂片的厚薄★★脱色时间的长短脱色时间的长短染液因素染液因素★★卢戈碘液放置时间过长卢戈碘液放置时间过长★★ 95％乙醇挥发％乙醇挥发★★结晶紫与草酸铵混合时间太长结晶紫与草酸铵混合时间太长细菌因素：细菌因素： ★★细菌种类、细菌种类、 ★★细菌菌龄细菌菌龄抗酸染色抗酸染色用于区别抗酸菌与非抗酸菌用于区别抗酸菌与非抗酸菌细菌特殊染色细菌特殊染色负染色法负染色法。