电泳技术的临床应用完整版ppt课件.ppt材料报告 教育.docx

本文格式为Word版，下载可任意编辑，页眉双击删除即可电泳技术的临床应用完整版ppt课件.ppt 材料报告 教育 现代电泳技术的临床应用 1 使用范围和检测原理使用范围和检测原理 电泳技术就是利用在电场的 作用下 由于待分别样品中 各种分子带电性质以及分子 本身大小 样子等性质的差 异 使带电分子产生不同的 迁移速度 从而对样品进行 分别 鉴定或提纯的技术 在生化检测中 主要用于分 离各类蛋白分子 2 进展历程进展历程 1809年俄国科学家列伊 斯首先发觉电泳现象 1937年瑞典科学家 Tiselius建立了界面电泳 技术 并首次证明了血清 是由白蛋白及 球蛋白组成的因此获得 1948年诺贝尔化学奖 1950年后 区带电泳从发 展到成熟 1980年以来 毛细管电泳渐渐受到重视 3 常用的电泳技术常用的电泳技术 滤纸电泳 醋酸纤维素薄膜电泳 凝胶电泳 琼脂糖凝胶电泳 琼脂糖凝胶适用于蛋白质和核酸的 电泳支持介质 本钱低 结果易保存 聚丙烯酰胺凝胶电泳 最常用的定性分析蛋白质的电 泳方法 特殊是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白质分 子量 一般用于科研 毛细管电泳 经典电泳技术和现代微柱分别 相结合的产物 4 电泳技术的医学应用电泳技术的医学应用 蛋白质电泳分析是试验室必备的检测手 段 可全面精确 描绘出患者蛋白质的全 貌 对疾病的早期诊断 疗效观看及预后 推断具有特别重要的临床价值 5 蛋白的电泳检测蛋白的电泳检测 依据使用的染料或者是底物的不同 我 们可以检测到不同类型的蛋白 血清蛋白 脂蛋白 运送脂类 各种酶类 血红蛋白 6 电泳技术在临检中的应用电泳技术在临检中的应用 急 慢性炎症 造血系统疾病 多发性 骨髓瘤 巨免疫球蛋白 血症 肾脏疾病 肝脏疾病 中枢神经系统疾病 多 发性硬化症 o 遗传性疾病 地中海 贫血 o 代谢性疾病 糖尿病 o 心血管疾病 心梗 动 脉粥样硬化 o 恶性肿瘤 7 正确解释电泳结果正确解释电泳结果 为临床对疾病的推断提供可靠参考为临床对疾病的推断提供可靠参考 8 9 g b 2 白蛋白 1 a1酸性糖蛋白 1抗胰蛋白酶 结合珠蛋白 2 巨球蛋白 脂蛋白 铜蓝蛋白 转铁蛋白 血液结合素 C3补体 b脂蛋白 免疫球蛋白 血清蛋白电泳 10 蛋白染色蛋白染色 血清蛋白电泳后会呈现出5 或者 6 条带 染色后 每个条带呈现出的不同程度的染色对应 着各自的蛋白浓度 如何检测染色程度 需要使用光密度仪 11 正常的电泳图谱 12 出现单克隆免疫球蛋白的电泳图谱 13 蛋白电泳检测的不同步骤蛋白电泳检测的不同步骤 制备胶片 加样 启动电源 开始电泳 染色 脱色 结果检测 14 血清蛋白电泳的目的是什么血清蛋白电泳的目的是什么 检测异样 含量的改变 条带中蛋白含量的增加或减 少 性质的改变 异样条带的出现 15 临床意义临床意义 将电泳作为常规检测之一 基于蛋白含量 的改变 有助于我们对以下疾病的筛查 炎症 养分不良 肺气肿 16 临床意义临床意义 对异样条带的筛查 有助于我们检测以下疾病 骨髓瘤 巨球蛋白血症 Waldenstrom 细菌和病毒感染 在这些状况下 必需要做其他帮助测试 比方说 免疫固定 使用不同类型的抗血清对异样蛋白 进行检测 对于后期治疗有很重要的指导意义 17 电泳结果的临床应用及常见电泳结果分析电泳结果的临床应用及常见电泳结果分析 电泳检测 18 什么状况下必需进行电泳检测什么状况下必需进行电泳检测 qA G比例改变 q血液沉降速度发生异样改变 q出现恶性疾病征兆 q在免疫球蛋白定量检测中发觉 某一种免疫球蛋白出 现大量异样增加 19 电泳区带分析 20 双白蛋白 或者一条宽峰 或者在白蛋白条带出 现附属条带可能是由以下缘由造成 遗传性双白蛋 临时性的双白蛋白血症可能是由于药物刺激导 致的 急性胰腺炎导致的双白蛋白血症 大量的胰酶的 出现可以导致白蛋白降解 白蛋白区带 21 双白蛋白血症 22 双白蛋白血症 23 24 q在以下状况下白蛋白会出现下降 肾病综合症 蛋白流失 胃肠病 检查尿蛋白 淋巴细胞增生综合征 养分不良 肝脏功能不全 慢性炎症 严峻烧伤 血液稀释 25 q在以下状况中白蛋白会出现增加 脱水症状 血液浓缩 白蛋白注射 26 Alpha 1 globulins Alpha 1 globulins 1 1 球蛋白区带球蛋白区带 q将会在以下状况下出现下降 蛋白流失 肝功能不全 先天性抗胰蛋白酶缺乏症 q出现两个条带 抗胰蛋白酶的不同基因型 q出现增加 炎症症状 27 A1AT不同的基因型 28 A1AT A1AT 等电聚焦电泳等电聚焦电泳 29 急性炎症电泳图谱急性炎症电泳图谱 30 Alpha 2 Alpha 2 globulins globulins 2 2 球蛋白区带球蛋白区带 q以下状况中出现下降 肝功能不全 血管内溶血 31 q 出现两个条带 溶血标本 结合珠蛋白 血红蛋白复合体 结合珠蛋白不同基因型 出现单克隆免疫球蛋白 带有大量负电荷 Alpha 2条带在电泳图谱中 是一个很特殊的条带 因为这一条带中 含有五种蛋白 HDL Haptoglobin Alpha 2 Macroglobulin Ceruloplasmin and Gc globulin 由于结合珠蛋白有不同的基因表 现型 增加了这一条带的冗杂程度 结合珠蛋白特别靠近Alpha 1条 带 出现溶血时结合珠蛋白的迁移率会发生转变 同时 由于HDL的 含量或者是存放过久的标本 HDL的迁移速度可能会更快 32 溶血的标本 33 出如今 2区域的单克隆免疫球蛋白 34 q以下状况下Alpha2区域会出现增加现象 炎症症状 肾病综合征 出现游离轻链 35 肾病综合征 36 37 38 Beta Beta globulins globulins 球蛋白区带球蛋白区带 q在以下状况下会出现下降 肝功能不全 C3 长期缺乏 或者 C3 代谢过快 also in aging sample C3 denaturation splitted in up to 4 fractions 1 between 2 and b 1 on b1 1 on b2 and 1 on g 39 q在以下状况下会出现两个条带 长期存放的标本或者是高胆固醇的标本 LDL 有不同的迁移率 从而导致LDL电泳是偏移 Beta位置 40 q Beta球蛋白在以下状况下会出现增加现象 胆管堵塞 肾病综合征 肝硬化 缺铁性贫血 血球蛋白异样 高脂蛋白血症 大量溶血 41 脂蛋白 42 酒精性肝硬化中的 桥 43 44 45 46 出如今 b 区域的单克隆免疫球蛋白 47 游离轻链病 48 Gamma globulins Gamma globulins 免疫球蛋白区带免疫球蛋白区带 q在以下状况中会出现下降现象 部分的或全部的免疫缺陷 免疫抑制治疗 游离轻链病或非分泌型骨髓瘤 49 50 51 低免疫球蛋白血症低免疫球蛋白血症 52 q多克隆免疫球蛋白的增加 炎症 肝硬化 亚急性和慢性感染 q 检测到其他条带 单克隆免疫球蛋白 寡克隆免疫球蛋白 53 高免疫球蛋白血症 54 血清蛋白021216 狼疮病 血清蛋白030127 酒精肝B r桥 55 微量单克隆免疫球蛋白 56 大量单克隆免疫球蛋白 57 双克隆免疫球蛋白 58 q与以下各类疾病相关的寡克隆免疫球蛋白 多个 条带 自身免疫病 先天性免疫缺陷症 病毒感染 C Hepatitis HIV disease CMV 巨细胞病毒 EBV 免疫抑制治疗 59 Oligoclonal pattern 寡克隆免疫球蛋白 60 血清蛋白电泳是 M蛋白 Monoclonal Protein 多克隆 polyclonal Protein 寡克隆 Oligoclonal Protein 的首选检测项目 61 什么是什么是MM蛋白蛋白 M蛋白疾病 Monoclonal gammapathies MG 是由于单一克隆浆 细胞无限增殖产生的均一单克隆蛋白 Monoclonal proteins 所导致的一组疾 病 M蛋白疾病的 M 含义是Myeloma Macroglobulinemia Malignant lymphoma和Monoclonal Gammapathies均以 M 开头 M蛋白在 电泳上表现为高而狭窄的尖峰 62 63 表1 646例M蛋白类型分类 型别 例数 IgG型骨髓瘤 205 31 73 IgA型骨髓瘤 93 14 40 IgM型骨髓瘤 56 8 67 IgD型骨髓瘤 12 1 86 重链病 5 0 77 轻链病 214 33 13 半分子病 1 0 15 7S IgM 2 0 31 BMG 49 7 59 双M蛋白病 8 1 24 64 多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤 Multiple Multiple Myeloma MM Myeloma MM MM是造血系统的恶性肿瘤 占整个恶性肿瘤的 1 常见于中 老年人 50 70岁居多 40岁以下少 见 以往对此病认识缺乏 漏诊 误诊可达 到70 以上 随着寿命的延长对此病认识的提 高病例数显著增加 65 MMMM临床表现特点临床表现特点 骨痛 骨骼肿块与病理性骨折 骨质疏松和溶骨现象 贫血 免疫功能低下 反复感染 肾脏损害 高钙 高粘 血浆相对黏度6以上 高尿酸血症表现 MM的临床表现多样化 经常因此就诊于 骨科 肾脏内科等 延误诊治 66 多发性骨髓瘤的免疫学特征多发性骨髓瘤的免疫学特征 血中出现M蛋白 正常Ig水平明显减低 尿中出现M蛋白和轻链蛋白 BJP 骨髓中浆细胞明显增加 无免疫活性Ig导致免疫功能低下 67 多发性骨髓瘤病人溶骨报告多发性骨髓瘤病人溶骨报告 骨骨 盆盆 68 多发性骨髓瘤病人溶骨报告多发性骨髓瘤病人溶骨报告 69 多发性骨髓瘤病人溶骨报告多发性骨髓瘤病人溶骨报告 颅颅 骨骨 70 临床实例临床实例 71 72 73 74 意义未明的单克隆免疫球蛋白疾病 Benign MC 在法国 在对献血者进行检测时 会检测到 0 15 比例的单克隆免疫球蛋白携带者 在老龄人群中检测到的携带者比例更高 80岁以上人群 在对60到99岁人群的检测显示 出现Ig的比例 从2 6 上升至19 2 平均值 5 MGUS 75 MGUS携带者特征 未出现临床和影像学特征 未出现不良反应 未检测到血钙升高 也未出现肾功 能衰竭 未见骨髓瘤的临床特征 单克隆免疫球蛋白 20g l 其他免疫球蛋白都是正常的 同时在患者尿液中未检 测到本周氏蛋白 单克隆免疫球蛋白的浓度随着时间的推移未发生增 加现象 其他的免疫球蛋白的浓度也未随时间推移而出现下降 在20 的状况中 MGUS 将会转化成恶性疾病 6 10 years 76 Kyle reportKyle report显示显示 通过对通过对13841384名含出名含有MGUS的患者的 20 35 average 22 years 年的跟踪监测发觉 24 24 的的患者最终演化成恶性的淋巴细胞增生症 multiple myeloma macroglobulinemia amyloidosis 从检测到单克隆免疫球蛋白 直到作出多发性骨髓瘤的诊 断报告 这段时间是不定的 从2 29年 平均是10年左 右 77 大量报告显示 在以下状况中 进展成为恶性淋巴细胞 增生疾病的可能性很小 单克隆免疫球蛋白 IgG 15 g L IgA 10 g L IgM 67kDa 67 kDa 尿蛋白含量增加尿蛋白含量增加 117 肾性尿蛋白分析肾性尿蛋白分析 118 在 HYDRAGEL 5 PROTEINURIE 凝胶上 主要的尿蛋白的电泳条带区域分析 起源于肾小管 的各类蛋白 分子量 67 kDa 白蛋白 分子量 67 kDa 1 微球蛋白 MW 33 kDa 游离轻链 MW 25 kDa 转铁蛋白 MW 80 kDa Cystatin MW 11 kDda b2 微球蛋白 MW 12 kD。