
硫酸链霉素的水解.docx
4页本文格式为Word版,下载可任意编辑硫酸链霉素的水解 硫酸链霉素的水解测验 一、原理 硫酸链霉素的水解由温度和ph影响 碱性水解:硫酸链霉素+H2O???? OH?+其它降解物 回响速度按照一级回响动力学方程式ln?C0?x??lnC0?kt,式中 由始末浓,回响时间的可测量,可以得到回响速度常数k,但此回响的缺点是末浓度不好测由于吸光度A=ELC(A是吸光度, e是吸光系数, L是单位厚度,C是浓度),上式可变成ln?E??Et??lnE??kt是斜率为-k的二元一次方程,就轻易的k的值 生成的麦芽酚在酸性溶液下与铁离子回响生成紫红色络合物,用络合物比色法举行测定 3 3 +Fe3+ → 在两个温度下分别测得两个常数k由ln应的活化能E kT2kT1?E11从而得到反(?), RT1T2二、测验用品 722型分光光计1个, 恒温度槽2个, 碘量瓶(150ml)2个 碘量瓶(250ml)一个, 秒表一个, 移液管(20ml)一支, 移液管(5ml)一支, 烧杯(500ml)1个, 量筒(100ml)一个, 广泛ph试纸, 确定量 0.4%硫酸链霉素水解溶液, 2N氢氧化钠溶液, 0.5%的铁试剂。
四、概括测验 ㈠ Et的测量:100ml量筒量取100ml 0.4%硫酸链霉素水溶液放入 150ml碘量瓶中(防止挥发),室温下用2mol/L氢氧化钠溶液调制ph=12为止(调理至12易于麦芽酚的生成,广泛的ph试纸范 围大所以选择广泛ph试纸),调好后等分为两份各50ml于150ml 碘量瓶中(先调理ph再分开,可减小ph的调理误差,即两 份式样的ph差值),立刻放入40度和50°恒温水浴中,,开头计 时40℃的每隔15min取样一次,50℃的每隔5min取样一次(这由 硫酸链霉素的半衰期抉择),分别取六次的样,取样时用移液管 切实吸取5.00ml回响液,移到枯燥的50ml碘量瓶中,用移液管切实参与20.00ml0.5%铁试剂,至紫红色(此处两步理应快速操作),用722型分光光度计在520nm测吸光度,记录每次的取样时间和吸光度 ㈡ E的测定:取样完毕后,将剩余溶液置于沸水浴中加热10min (此处可以适当延时,但是还是同样要求不能挥发),冷却 至室温后吸取5.00ml溶液与枯燥50ml碘量瓶中,参与20.00ml 铁试剂,摇匀,测吸光度,即为全部水解的吸光度。
㈢ 由所得数据可计算的不同温度下的k值,即可求得活化能E — 4 —。
