
IPTG-X-gal平板制作-l蓝白斑筛选.doc
1页IPTG-X-gal 平板制作IPTG储液配置:一般将IPTG配成20% (mN)(约0.84M)的母液称取0.5克IPTG粉末,用2 ml蒸馏水将其完全溶解后,补加蒸馏水至 2.5ml,用孔 径0.22卩苗勺小型注射型过滤器(预先装好滤膜灭菌备用)过滤除菌, -20 C冻 存X-gal 储液配置: 用二甲基甲酰胺溶解 X-gal 配制成的 20mg/ml 的贮存液称 取0.2克X-gal,加入10ml二甲基甲酰胺(DMF ),溶解后保存于一小血清瓶 内,装有 X-gal 溶液的血清瓶须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏,并应贮存于 -20 CX-gal溶液无须过滤除菌IPTG-X-gal平板制备:在含氨苄或卡那抗生素平板上,滴加 40 L的X-gal储 液及5此的IPTG储液(怕体积过小影响涂布均匀,可适当稀释后再 涂布),涂布均匀后晾干后使用在临使用前提前 1h 制备注:也可以将X-gal储液(40 L)及IPTG储液(5丄)加入到将要用于涂板的100丄的细菌悬液里,混匀后直接涂平板可以当长出菌落后,如果蓝白斑还不够明显,可以放置于 4 度冰箱里一段时间, 待蓝白斑明显后,再挑去白色菌落进行 PCR 检测。
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