乳猪料用原料检测方法.doc

第一部分:乳猪料用原料检测方法 山东六和集团技术部编辑 2006-01-05目 录1: 饲用玉米脂肪酸值的测定………………………………2: 油脂碘价的测定…………………………………………3: 油脂的酸价及过氧化值的测定……………………4: 鱼粉中酸价的测定…………………………5: 乳清粉中乳糖的测定…………………………..………6: 油脂TBA值的测定方法……………………….………7: 呕吐毒素(DON)的检测ELISA法………..……………8: 黄曲霉毒素的测定ELISA法…………………….……9: 鱼粉中组胺的测定………………………….…………10:挥发性盐基氮的测定(VBN)………………..…………11:饲料中免疫球蛋白lgG的测定………………….……12:玉米副产品中二氧化硫残留量的测定…………….…13:鱼粉中脲醛聚合物的鉴别…………………….………14:谷物中淀粉含量的测定……………………….………15:次粉中泥沙及矿物质的测定……………….…………16:镜检过程中的定性实验(鱼粉、肉骨粉、玉米蛋白粉、豆类蛋白粉、大米蛋白粉)…17:淀粉糊化度分析方法……………………………….…18:大豆制品中尿素酶活性分析方法(PH增值法)……..……19:油脂定性试验…………………………….……………20:乳糖测定附表……………………………………….…一.饲用玉米脂肪酸值的测定1.试剂：1.1 KOH乙醇标准溶液C(KOH)=0.01mol/L取KOH溶液[C(KOH)=0.1mol/L] 100ml，用乙醇（95%）稀释到1 升，然后按GB601标定。

1.2 酚酞指示剂：2g/l乙醇溶液1.3 无水乙醇2 步骤：将平均样品按四分法制得约80g样品粉碎，过0.45mm孔径筛（40目），立即称取10g样品（精确到0.01g），于150ml具塞三角瓶内，加50ml无水乙醇，加塞振动10分钟，过滤，并用无水乙醇洗3次，每次15ml，然后加酚酞3滴，用0.01mol/lKOH乙醇标准溶液滴定到溶液呈微红色，同时取90ml乙醇作空白3计算：脂肪酸值(mgKOH/100g)按下式计算（V-V0）×C×56.1脂肪酸值= ×100 m 式中：V——-样品耗碱标准溶液的体积，mlV0——空白耗碱标准溶液的体积，mlC——-KOH标准滴定溶液的浓度，mol/lm——-样品质量,g二、油脂碘价的测定1 试剂与溶液1.1 韦氏液的配制：称取三氯化碘7.9g和纯碘8.7g分别溶于冰乙酸中，合并两液，再用冰乙酸稀释至1L，贮于棕色瓶内1.2 KI溶液 150g/L1.3硫代硫酸钠标液滴定溶液C（NaS2O3）=0.1mol/L）1.4 三氯甲烷CHCl3 AR2.步骤：按附表称取试样（准确至0.0002g）于干燥的碘量瓶中，加20ml CHCl3溶解试样，加25.00ml韦氏液立即加塞，以KI溶液封口，摇匀后，在20±5℃条件下，置黑暗处30min（碘价在130以上时放置1h），到时立即加入KI溶液20ml和水100ml,用C（NaS2O3）=0.1mol/L）硫代硫酸钠标液滴定至浅黄色时，加入1ml 5g/L淀粉指示剂，滴定至兰色消失。

同样条件做空白两个，取平均值结果的表示和计算：碘价按下式计算碘价=×100 式中：V1——试样消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积；mlV2——空白消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积；mlC——-硫代硫酸钠标准溶液的浓度；mol/Lm——-试样的质量；g0.1269—与1.00ml硫代硫酸钠标准溶液(C（NaS2O3）=1.000mol/L)的相当的以克表示的碘的质量附表：碘价数值与试样用量碘价试样用量范围（g）碘价试样用量范围（g）200.8461～1.58651200.2115～0.2644400.6346～0.79351400.1813～0.2266600.4231～0.52881600.1587～0.1983800.3173～0.39661800.1410～0.17621000.2538～0.31732000.1269～0.1586三、油脂的酸价及过氧化值的测定一.油脂的酸价的测定：1 试剂与溶液1.1乙醚-乙醇溶液（2+1）配制时加入酚酞，并用碱调至中性1.2 NaOH标准滴定溶液C（NaOH）=0.1mol/L1.3酚酞指示剂 1g/L2 步骤将需用的锥形瓶烘干；分别移取油脂上层、中层、下层液各1~2ml置于烘干的锥形瓶中精密称量。

加入50ml乙醚-乙醇溶液使其溶解，可以微热，加入酚酞指示剂3-5滴,然后用NaOH标准溶液进行滴定至粉红色，且1分钟不褪色为终点同时做空白计算：酸价(mgKOH/g)按下式计算酸价=C×(V-V0 )×56.1/m式中： C——NaOH标准溶液的浓度；mol/LV——消耗标准溶液的体积；mlm——样品的重量；g 56.1——与1.00mlC（NaOH）=1.000mol/L相当的以mg表示的KOH的质量说明： 酸价是指中和1.0g油脂所含游离脂肪酸所需KOH的毫克数,同一种油若酸价高，表明油脂因水解而产生更多的游离脂肪酸二..油脂的过氧化值的测定1.原理：油脂氧化过程产生过氧化物，与KI作用，生成游离碘，以淀粉作指示剂，用硫代硫酸钠标准溶液滴定2试剂与溶液2.1三氯甲烷—冰乙酸的混合液（4+6）2.2硫代硫酸钠标准滴定溶液C（Na2S2O3）=0.01mol/L2.3淀粉指示液10g/L2.4碘化钾KI AR3 步骤：称取2-- 3g(准确到0.0002g)混匀的样品，置于250ml烘干的碘量瓶中，加入30ml三氯甲烷—冰乙酸（4+6）的混合液，使样品完全溶解，加入约2g的碘化钾，紧密塞好瓶塞，并轻轻振摇30秒钟，然后在暗处放置3分钟，取出加100ml水，摇匀，立即用的硫代硫酸钠标准溶(C（Na2S2O3）=0.01mol/L)液滴定至淡黄色时，加1ml淀粉指示液（10g/L），继续滴定至兰色消失为终点，同样条件做空白。

4计算：过氧化值（I2%）按下式计算过氧化值（I2%）=（V1－V0）×C×0.1269×100/m式中： V1——-样品消耗硫代硫酸钠的体积；mlV0——-空白消耗硫代硫酸钠的体积；mlC——--硫代硫酸钠标准溶液的浓度；mol/Lm——--样品的重量；g 0.1269——与1.00mlC（Na2S2O3）=1.000mol/L相当的以克表的I2的质量 g5 过氧化值二种单位的换算:meq/kg == I2 % * 78.9四、鱼粉中酸价的测定1 试剂与溶液1.1乙醚-乙醇溶液（2+1）配制时加入酚酞，并用碱调至中性1.2 NaOH标准滴定溶液C（NaOH）=0.05mol/L1.3酚酞指示剂 1g/L2.步骤 称取2～3g（准确到0.0002g）鱼粉于干燥带塞的三角瓶中，加40ml乙醚与乙醇（2+1）混合溶液，在振荡器上振摇30min，干过滤于150ml三角瓶中，并用少量乙醚乙醇溶液洗涤三角瓶三次，加3滴的酚酞，用氢氧化钠标准溶液[C（NaOH）=0.05mol/L]滴定至粉红色，半分钟内不褪色为终点，同样条件做空白3.结果的表示和计算：酸价（mgKOH/g）按下式计算酸价（mgKOH/g）= 式中：C——NaOH标准滴定溶液的浓度；mol/LV——鱼粉消耗标准溶液的体积；mlV0——空白消耗标准溶液的体积；mlm——鱼粉样品的质量；g56.1——与1.00mlNaOH标准滴定溶液[C（NaOH）=1.000mol/L]相当的以mg表示的KOH的质量。

mg五、乳清粉中乳糖的测定1 试剂与溶液1.1酒石酸铜甲液：34.639gCuSO4溶于水，加入0.5ml浓H2SO4，稀释到500ml 酒石酸铜乙液：173g酒石酸钾钠，加50gNaOH，稀释到500ml1.2 氢氧化钠溶液c(NaOH)= 1mol/L1.3硫酸铁溶液 50g/L1.4高锰酸钾标准滴定溶液c（1/5 KMnO4）=0.1mol/L2 步骤：称2g样品（准确到0.0002g）于200ml烧杯中，加50ml水，电炉加热到80℃，加酒石酸铜甲液10ml，加NaOH（1mol/L）5ml，搅拌后放置到室温，用水定容于250ml容量瓶中，摇匀，静止1h后干过滤吸取滤液25.00ml于三角瓶中，加25ml酒石酸铜甲液，再加25ml酒石酸铜乙液，在电炉上加热并煮沸2min（要保证在3min内煮沸），取下过滤，并用水洗涤沉淀4～5次，之后将滤纸及沉淀物（Cu2O）一起放入三角瓶中，加入硫酸铁（50g/L）25ml，再加25ml水，用玻璃棒搅拌并微热到看不到Cu2O的红色为止，然后用高锰酸钾标准滴定溶液(c（1/5 KMnO4）=0.1mol/L)的标准溶液滴定到呈微红色为终点同样条件做空白3.结果的表示和计算：乳糖含量按下式计算Cu2O=（V-V0）×C×71.54由Cu2O的质量查表求乳糖的质量m乳：样品中乳糖的含量:乳糖%=m乳/m样×100式中： m乳——样品中乳糖的质量；gm样——-样品的质量；V——-样品消耗KMnO4的体积；mlV0——-空白消耗KMnO4的体积；ml71.54—常数；C——--KMnO4标准溶液的浓度，mol/L六、油脂TBA值的测定方法原理：油脂受到光、热、空气中氧的作用，发生酸败反应，分解出醛、酸之类的化合物。

丙二醛就是分解产物的一种，它能与硫代巴比妥酸(TBA)作用生成粉红色化合物，在532nm波长处有吸收高峰，利用此性质即能测出丙二醛含量，从而推导出油脂酸败的程度1 试剂2.1硫代巴比妥酸(TBA)水溶液：准确称取TBA 0.288g溶于水中，并稀释至100ml（如TBA不易溶解，可加热至全溶澄清，然后稀释至100ml），相当于0.02mol/L；2.2 三氯乙酸混合液：准确称取三氯乙酸（分析纯）7.5g及 0.1g EDTA，用水溶解，稀释至100.00ml；2.3 氯仿（分析纯）；2.4 丙二醛标准溶液：称取0.315g 1，1，3，3-四乙氧基丙烷，溶解后稀释至1000.00ml，此溶液每ml相当于丙二醛100μg，置于冰箱内保存准确吸取10ml，稀释至100.00ml，此溶液每ml相当于丙二醛10微克(μg)，备用2 操作步骤3.1标准曲线的绘制准确吸取每ml相当于丙二醛10μg的标准溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于纳氏比色管中，加水至总体积为5ml，加入5ml TBA溶液，然后按样品测定步骤进行，测得光密度绘制标准曲线3.2样品测定：准确称取融化均匀的油脂样品5.0g，置于100ml具塞三角瓶内，加入50.0ml三氯乙酸混合液，振摇半小时（保持油脂融溶状态，如冷结可在70℃水浴上略微加热使之融化后继续振摇）用双层滤纸过滤，除去油脂。

滤液重复用双层滤纸过滤一次准确移取上述滤液5.0ml置于25ml比色管内，加入5.0 mlTBA溶液，混匀，加塞，置于90℃水浴内保温40min，取出，冷却1h，移入小试管内，离心5min，上。