人免疫缺陷病毒阳性者免疫印迹试验带型分析.doc

人免疫缺陷病毒阳性者免疫印迹试验带型分析张玲1，(通讯作者)李中江2吴林伯3,王廷杰41达州市通川区妇幼保健院；四川达州 6350002达州市中心医院检验科；四川达州 6350003达州市中心医院输血科；四川达州 6350004达州市中心医院内科四川达州 635000摘要：目的通过用免疫印迹实验对人免疫缺陷病毒(HIV)特异蛋白抗体的检 测，探讨WB带型在HIV感染者和艾滋病患者中的临床关系方法：对省、市疾 控中心确诊的HIV者118例作带型分析结果：HIV感染者和艾滋病患者WB带 型分析基本上都能测出 gpl60、gpl20、p66、p55、p51、gp41、p31、p24、pl7 井9个区带其中HIV感染者39例检出P17条带31例(79.49%), p55条带17 例(43.59%);艾滋病患者79例检出P17抗体46例(58.23%),p55条带17例(21.52%). HIV感染者的WB带型主要有5种类型，艾滋病患者WB带型主要有13种类型; 两组病例中HIV感染者WB带型9个IX带较为齐全,而艾滋病患者WB带型有P17、 P55带缺失，P17和P55均缺失以及严重的P24缺失。

结论：艾滋病患者的P17 和P55条带的检出率显著低于HIV感染者(P<0.01); HIV感染者的WB带型主 要有5种类型，而艾滋病患者的WB带型则有13种不同的类型，是HIV感染者 的2.6倍艾滋病患者9个区带齐全的检出率显著低于HIV感染者，而除P55带 缺失、P17缺失及P17和P55均缺失两组间无显著差异外，艾滋病患者出现其他 各种区带的发生率显著高于HIV感染组(P<0.01)关键词：HIV感染者；艾滋病患者；免疫印迹法WB带型随着艾滋病毒感染的不断上升，虽然HIV检测的实验也较多，但免疫印迹实验(western blot, WB，)仍然是首选的确诊HIV感染的重要实验，HIV感染 后的免疫反应可使抗体在不同时期出现不同的血清学反应，这对病原检测和诊断 具有非常重要的意义为此我们通过用免疫印迹实验(western blot，WB)对HIV(+ )特异蛋白抗体的检测，探讨WB带型在HIV感染者和艾滋病患者中的临床 关系1资料与方法1.1 一般资料1.1.1病人：达州市中心医院因症住院的HIV(+)患者，通川区妇幼保健 院的疑似送检患者然后确诊HIV(+)患者，以及门诊检査被确诊为HIV(+)患者。

首 先经本院输血科作初筛实验，初筛HIV(+)阳性患者.再采血送省市疾控中心作确诊 实验，确诊实验阳性患者纳入本文观察分析的例数所有病例的诊断符合2008 年制定的卫生行业《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准》［其中男86例，女32 例，平均年龄44.53岁，最大80岁，最小19岁1.2仪器与试剂1.2.1仪器：奥地利Tecan公司免疫印迹仪，型号：Profiblot48.1.2.2试剂：MP生物医学亚太私人有限公司北京市西美杰科技有限公 司人类人免疫缺陷病毒(HIV1+2型)抗体检测试剂盒(免疫印迹)1.3方法：我们根据HIV ( + )者有无临床症状将其分为HIV无症状感染 组和有症状艾滋病患者组，其中HIV感染组中还包括来院门诊检查被确诊为HIV(+) 患者；然后按组分析HIV感染者和艾滋病患者的WB带型，分别统计苏各类带型 的检出百分比(％),并作卡方分析及显著性检验1.4统计学处理：分别统计其各类带型的检出百分比(％)组间比较用 X2检验，统计应用SAS6.12软件处理2结果2.1 HIV感染者和艾滋病患者的各WB带型分析的比较见表2-1,由表2-1可见，表2-1 HIV感染组与艾滋病组的各WB带型分析的比较注：两组别比较P17带型*: p<0.01 ； p55带型*: p<0.01。

2.2 HIV感染者和艾滋病患者的WB带型变化分析见表2-2、表2-3,由表2-2可见，HIV感染者的WB带型主要有5种类型，由表2-3可见艾滋病患者 的WB带型则奋13种不冋的类型，是HIV感染者的2.6倍表2-2 HIV感染者的WB带型变化分析表2-3艾滋病患者的WB带型变化分析2.3两组病例中，各种WB带型的检出率比较见表2-4,艾滋病患者9 个区带齐全的检出率显著低于HIV感染者，而除P55带缺失、P17缺失及P17和 P55均缺失两组间无显著差异外，艾滋病患者出现其他各种区带的发生率显著高于 HIV 感染组(P<0.01)o表2-4艾滋病组与HIV感染者各种WB带型检出率的比较注：两组比较出现八型*: p<0.01出现其它p<0.01o3讨论HIV感染已成为各国严重的社会问题及医学难题，其危害难以估汁［1-2］ 据WHO统计2007年末中国就有84万人感染HIV病毒，并处于流行的高速增长 期［3】，能准确检测出HIV病毒就非常重要，尤其是HIV的检测要提高AHI阶段(只 体内病毒迅速复制，病毒量猛增，但抗体尚不可检测的阶段)的检出率特别是 受血者一旦接触了未检测出的HIV病毒血，就会100%的楷率感染［4］，从而不断 的寻求更特异，灵敏的检测各阶段的特异性物质还是长期的目标。

目前感染了 HIV可以通过HAART方案治疗来提高CD4+T淋巴细胞的数量来提高免疫力［5］, 同吋根据病程来指导用药剂量，能准确诊断HIV感染和判断其病程从而为防止其 传播和指导用药就尤为重要尽管国内彭庭海［6］报道：一般人群中ELISA检测与 WB实验阳性符合率分别达到了 89.93%和93.39%，但不能准确判断病情发展情 况B前己有罗氏、生物梅里埃、西门子等多家知名企业研制出通过免疫印迹技 术检查HIV特异性抗体的试剂，来检测针对HIV病毒各结构蛋白的抗体,从而达 到病情进程的判断按照HIV抗原从大到小的顺序排列有:gpl60、gpl20、p66、p55、p51、gp41、p31、p24、pl7.其中p24和gpl60抗体首先出现，随着病情的进展，针对HIV不同组分的抗体也陆续出现并持续整个潜伏期当病程进展到 AIDS期吋，病毒人量复制消耗了人量的p24抗体，这些变化均可在WB的试验 带型中反映出来观察结果表明：1、HIV感染者和艾滋病患者奋不同类型的WB带型变 化，艾滋病者的P17和P55条带的检出率显著低于HIV感染无症状期(P<0.01), 与李燕等报道的P31阳性率也奋显著差异不符,可能是感染的途径比例不同［7］。

2、HIV感染者的WB带型主要有5种类型，而艾滋病患者的WB带型则旮13种 不同的类型，是HIV感染者的2.6倍，这些差别可能与李桂英［8］等报道的人免疫 缺陷病毒具有适疲环境和免疫逃逸的高度变异的特点相关3、艾滋病患者9个 区带齐全的检出率为15.19%,与朱荣华［9］等报道的21.45%相近，显著低于HIV 感染者的41.02%,而除P55带缺失、P17缺失及P17和P55均缺失两组间无显 著差异外，艾滋病病例中P24缺失者仅6例，出现艿他各种区带的发生率显著高 于 HIV 感染组(P<0.01)o冇临床观察认为，W出现gpl60和P24是HIV早期感染［10］的重要信息； 全带型或基本全带型，提示当时的受检者均处于HIV感染期，且感染吋间大致相 同高凯［11］等也报道p24在HIV-1感染者的血清转换期出现的楷率为38%左石 通过我们调査出现p24缺失的受检者6例已3死，因此p24缺失是AIDS期的重 要标志之一观察可见，抗gpl60与抗gpl20持续存在於疾病的各阶段，偶有(1/79 例)艾滋病患者gpl20和gp41缺失者,而抗pl7, p24、p51、p55抗体及抗gp4l 的检出率，随着病情变化，呈明显下降；并出现多种WB带型。

带型的变化, 主要见于HIV病毒的核心和基质蛋白产物及POL逆转录酶与内源性核酸酶抗体等 结构基因产物的不同程度的缺失，提示病情的进展，包括env抗病毒外壳蛋白产 物，gag病毒核心和基质蛋白产物及POL逆转录酶与内源性核酸酶抗体等3个结 构基因产物的各种缺失，应当是艾滋病病情和病程的反映，探索WB带型与临床 的关系，有利于对病程和病情的判断，指导临床对艾滋病的诊治参考文献[1] Sun XWang N,Li D.The development of HIV/AIDS surveillance China〔J) AIDS, 2007,21(Suppl8):33-38.[2] Hladik W,Musinguzi,KIRUNGI W,et al. The estimated burden HIV/AIDS indganda 2005〜2010 ⑴ AIDS,2008,22(4):503-510.[3] Wang L.Overview of the HIV/AID Sepidemic.scientific researcha Government responses in China [J].AIDS,2007,21(Suppl8):3-7.[4] 张艳梅，胡消艳。

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