γ-谷氨酰基转移酶测定标准操作规程.docx

Y-谷氨酰基转移酶测定标准操作规程1.检验原理：（L-L谷氨酰-3-羟基-对硝基苯胺底物法）以上广谷氨酰刀-羟基-4-硝基苯胺为底物,双甘氨肽为谷氨酰基的受体在谷氨酰基转移酶（GGT）的催化下，谷氨酰转移到双氨肽上同时释放出黄色的2-硝基-5-氨基苯甲酸,后者可使405nπr410nm处吸光度增高在底物过剩的情况下，5-氨基-2-硝基苯甲酸的生成速率与血清中GGT浓度成正比，因而可监测5-氨基-2-硝基苯甲酸生产速率测定血清GGT活性浓度GGT活性测定的反应式如下：1.-L谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺+双廿氨肽<侬>Lr-谷氨酰-双甘氨肽+2-硝基-5-氨基苯甲酸1.-L谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺+Lr-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺.〉2-硝基-5-氨基苯甲酸+L-l谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺2.试剂主要组成成分组成成分浓度Rl3羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH8.0）1OOmmo1/L双甘肽1OOmmo1/LR2Ll谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺6mmol∕L3.样本要求：新鲜无溶血血清在22〜25°C保存8小时，2〜8°C保48小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融！样本中抗坏血酸含量W0.3g/L、胆红素含量W0.4g∕L∖血红蛋白含量W5.0g/L、乳糜含量W5.0g∕L对检测结果基本无影响。

4.检验方法；仪器法（详见DF-603∕DI-600标准操作规程）5.参考范围：样本参考范围（U/L）血清男性11-50女性7-326.检验结果的解释：6. 1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W∕V）的氯化钠溶液稀释样本建议最大稀释不超过10倍7. 2.单位换算:ukat∕L=U∕L×16.67×IO-37.检验方法的局限性7.1 结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制7. 2若试剂浑浊，或以水空白在405nm处吸光度大于0.800时不能使用8. 3检验结果仅供参考，不作为临床诊断唯一依据8.试剂性能指标8.1 试剂外观：R1：无色透明液体，无悬浮物及沉淀R2：无色或淡黄色透明液体，无悬浮物及沉淀8. 2装量：不低于标识值8. 3试剂空白8.3. 1试剂空白吸光度：在37℃、405nm处，光径ICm时，空白吸光度AW0.808. 3.2试剂空白吸光度变化率：在37℃、405nm处，光径ICnl时，用生理盐水作为样品加入试剂测试时，Z∖A∕minWO.005.8 .4分析灵敏度：在405nm处，光径ICnI时，测量50U/L的L谷氨酰基转移酶时，吸光度变化4A∕min20.019 .5线性区间：试剂的线性区间为[10-450]U∕L,在此线性区间内：a)线性相关系数r应不小于0.9900；b)[10-50]U/L区间内，线性绝对偏差不超过±5U∕L;(50-450)U/L区间内,线性相对偏差不超过±10%。

8. 6精密度8.6. 1重复性：CV≤5%8. 6.2批间差:R≤10%9. 7准确度：相对偏差应不大于±15机10. 床意义：丫-谷氨酰转肽酶(GGT)用于肝胆疾病的诊断和疗效监测，患有此类疾病时GGT的活性通常会升高，并是己知的最敏感的指标之一GGT亦是隐性酒精中毒的筛查试验长期服用苯巴比妥和苯妥英的患者血清中GGT的活性升高。