聚乙二醇400操作规程.pdf

学 海 无 涯 题 目 聚乙二醇 400 检验标准操作规程 编码: B.ZL.YJ.FL.02.05 共 4 页 第 1 页 制 定 审 核 批 准 制定日期 审核日期 批准日期 颁发部门 GMP 办 颁发数量 5 份 生效日期 分发单位 质管部 一 目 的：制定的聚乙二醇 400 检验标准操作规程，规范公司聚乙二醇 400 的检验 二 适用范围：适用于聚乙二醇400的检验 三 责 任 者：质管部、化验员 四 标准依据： 《中华人民共和国兽药典》XXXX 年版一部 五 正 文： 1 质量标准：见《聚乙二醇400质量标准》 2 试 剂：按试剂配制操作规程配制 纯化水、稀盐酸、甲醇、10%磷钼酸溶液、氯化钡试液、氢氧化钠滴定液、酚酞 的吡啶溶液（1→100） 、0.001%乙醛溶液、50%氯化镁的无水乙醇混悬液 3 仪器与用具：分光光度仪、电子天平、高效气相色谱仪、量瓶、试管 、 试管 架、玻璃棒、 烧杯、锥形瓶、扁形称量瓶、烘箱（或干燥器） 、坩埚、移液管、 量筒、毛细管、滴定管 4 操作步骤 4.1 性状 4.1.1 本品为无色或几乎无色的黏稠液体；略有特臭。

4.1.2 本品在水或乙醇中易溶，在乙醚中不溶 4.1.3 相对密度 本品的相对密度为 1.110～1.140 4.1.4黏度 本品的运动黏度， 在40℃时 （毛细管内径为0.8mm） 应为37～45mm2/s 4.1.5 羟值 本品的羟值为 264～300 4.2 鉴别 4.2.1 取本品 0.05g，加稀盐酸 5ml 和氯化钡试液 1ml，振摇，滤过；在滤液中加 入 10%磷钼酸溶液 1ml，产生黄绿色沉淀 4.2.2 取本品 0.1g，置试管中，加入硫氰酸钾和硝酸钴各 0.1g，混合后，加入二 氯甲烷 5ml，溶液呈蓝色 4.3 检查 4.3.1 平均分子量 取本品约 1.2g，精密称定，置干燥的 250ml 具塞锥形瓶中， 精密加邻苯二甲酸酐的吡啶溶液 （取邻苯二甲酸酐14g， 溶于无水吡啶100ml中， 放置过夜，备用）25ml，摇匀，置沸水浴中，加热 30～60 分钟，取出冷却，精 密加入氢氧化钠滴定液（0.5mol/L） 50ml，以酚酞的吡啶溶液（1→100）为指 示剂，用氢氧化钠滴定液（0.5mol/L）滴定至显红色，并将滴定的结果用空白试 验校正供试量（g）与 4000 的乘积，除以消耗氢氧化钠滴定液（0.5mol/L）的 容积（ml） ，即得供试品的平均分子量，应为 380～420。

学 海 无 涯 题 目 聚乙二醇 400 检验标准操作规程 编码: B.ZL.BZ.FL.02.005 共 4 页 第 2 页 计算公式： VFT 稀释倍数 %= 100% m 取样 式中：F——为摩尔浓度换算因子 V——为供试品所消耗滴定液体积 T——为滴定度 4.2.2 酸度 取本品 1.0g，加水 20ml 溶解后，依法测定，pH 值应为 4.0～7.0 溶液的澄清度与颜色 取本品 5.0g，加水 50ml 溶解后，溶液应澄清无色；如显 浑浊， 与 2 号浊度标准液比较， 不得更浓； 如显色， 与黄色 2 号标准比色液比较， 不得更深 4.2.3 乙二醇与二甘醇 取乙二醇与二甘醇各 50mg，置 100ml 量瓶中，加水稀释 至刻度，摇匀，作为对照溶液；另取本品 4.0g，置 10ml 量瓶中，加水稀释至刻 度，摇匀，作为供试品溶液取上述溶液，照气相色谱法，以硅藻土为载体，山 梨醇为固定相，在柱温 160℃测定含乙二醇与二甘醇均不得过 0.25% （g/g） 4.2.4 环氧乙烷与二氧六环 取本品 1g，精密称定，置顶空瓶中，精密加入超纯 水 1.0ml，密封，摇匀，作为供试品溶液。

量取环氧乙烷 300μl（相当于 0.25g 环 氧乙烷） ，置含 50ml 经过处理的聚乙二醇 400（以 60℃，1.5～2.5kPa 旋转蒸发 6 小时，除去挥发性成分）的 100ml 量瓶中，加入相同溶剂稀释至刻度，摇匀，作 为环氧乙烷对照品贮备液精密称取 1g 冷的环氧乙烷对照品贮备液，置含 40ml 经过处理的聚乙二醇 400 的 50ml 量瓶中， 加相同溶剂稀释至刻度 精密称取 10g， 置含 30ml 水的 50ml 量瓶中， 加水稀释至刻度 精密量取 10ml， 置 50ml 量瓶中， 加水稀释至刻度， 摇匀， 作为环氧乙烷对照品溶液 取二氧六环适量， 精密称定， 用水制成每 1ml 中含 0.1mg 的溶液，作为二氧六环对照品溶液精密称取本品 1g，置顶空瓶中，精密加入 0.5ml 环氧乙烷对照品溶液及 0.5ml 二氧六环对照品 溶液，密封，摇匀，作为对照品溶液量取 0.5ml 环氧乙烷对照品溶液置顶空瓶 中， 加入新鲜配制的 0.001%乙醛溶液 0.1ml 及二氧六环对照品溶液 0.1ml， 密封， 摇匀，作为系统适用性试验溶液照气相色谱法试验以聚二甲基硅氧烷为固定 液，起始温度为 35℃，维持 5 分钟，以每分钟 5℃的速率升温至 180℃，然后以 每分钟 30℃的速率升温至 230℃，维持 5 分钟（可根据具体情况调整） 。

进样口 温度为 150℃，检测器温度为 250℃顶空瓶平衡温度为 70℃，平衡时间为 45 分钟 取系统适用性试验溶液顶空进样，调节检测灵敏度使环氧乙烷峰和乙醛峰 的峰高约为满量程的 15%，乙醛峰和环氧乙烷峰之间的分离度不小于 2.0，二氧 六环峰高应为基线噪音的 5 倍以上分别取供试品溶液及对照品溶液顶空进样， 重复进样至少 3 次 环氧乙烷峰面积的相对标准偏差应不得过 15%， 二氧六环峰 面积的相对标准偏差应不得过 10%按标准加入法计算，环氧乙烷不得过 0.0001%，二氧六环不得过 0.001% 学 海 无 涯 题 目 聚乙二醇 400 检验标准操作规程 编码: B.ZL.BZ.FL.02.005 共 4 页 第 3 页 计算公式： 式中： CX 为供试品的含量 CR为对照品的含量 AX 为供试品的峰面积或峰高 AR 为对照品的峰面积或峰高 MR 为对照品的质量 MX 为供试品的质量 B 为供试品的水份 4.2.5 环氧乙烷对照品贮备液的标定 取 50%氯化镁的无水乙醇混悬液 10ml． 精 密加入 20ml 乙醇制盐酸滴定液（0.1mol/L）混匀，放置过夜。

取 5g 环氧乙烷对 照品贮备液，精密称定，置上述溶液中，放置 30 分钟，照电位滴定法，用乙醇 制氢氧化钾滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正，每 1ml 乙醇制氢氧化钾滴定液相当于 4.404mg 的环氧乙烷，计算，即得 计算公式： VFT 稀释倍数 %= 100% m 取样 式中：F——为摩尔浓度换算因子 V——为供试品所消耗滴定液体积 T——为滴定度 4.2.6 甲醛 取本品 1g，精密称定，加入 0.6%变色酸钠溶液 0.25ml，在冰水中 冷却后，加硫酸 5ml，摇匀，静置 15 分钟，缓缓定量转移至盛有 10ml 水的 25ml 量瓶中，放冷，缓缓加水至刻度，摇匀，作为供试品溶液另取甲醛 0.86g，精 密称定，置 100ml 量瓶中，加水稀释至刻度，精密量取 1ml，加水定量稀释至 100ml；精密量取 1ml，自“加 0.6%变色酸钠溶液 0.25ml”起，同法操作，作为对 照溶液取上述两种溶液，照紫外－可见分光光度法，在 567nm 波长处测定吸 光度， 并用同法操作的空白溶液进行校正供试品溶液的吸光度不得大于对照溶 液的吸光度（0.003%） 。

4.2.7 水分 取本品 2.0g，照水分测定法测定，含水分不得过 2.0% 炽灼残渣 不得过 0.2% 4.2.8 重金属 取本品 4.0g，加盐酸溶液（9→1000）5ml 与水适量，溶解后，用 稀醋酸或氨试液调节 pH 值至 3.0～4.0，再加水稀释至 25ml，依法检查，含重金 属不得过百万分之五 4.2.9 砷盐 取本品 0.67g，置凯氏烧瓶中，加硫酸 5ml，用小火消化使炭化，控 制温度不超过 120℃（必要时可添加硫酸，总量不超过 10ml） ，小心逐滴加入浓 过氧化氢溶液，俟反应停止，继续加热，并滴加浓过氧化氢溶液至溶液无色，冷 AX MR CR AR MX（1-B） 含量（CX）= 学 海 无 涯 题 目 聚乙二醇 400 检验标准操作规程 编码: B.ZL.BZ.FL.02.005 共 4 页 第 4 页 却，加水 10ml，蒸发至浓烟发生使除尽过氧化氢，加盐酸 5ml 与水适量，依法 检查，应符合规定（0.0003%） 计算公式： VFT 稀释倍数 %= 100% m 取样 式中：F——为摩尔浓度换算因子 V——为供试品所消耗滴定液体积 T——为滴定度 。