植物组织培养的原理及特点.ppt

第二章第二章 植物组织培养的原理及特点植物组织培养的原理及特点 主要内容主要内容:1.植物细胞的全能性及全能性的实现（重点）植物细胞的全能性及全能性的实现（重点） 2.植物离体分化过程的类型植物离体分化过程的类型3.植物组织培养的特点植物组织培养的特点4.植物组织培养所需营养与环境条件植物组织培养所需营养与环境条件  1. 植物细胞的全能性（植物细胞的全能性（totipotency)　　及全能性的实现　　及全能性的实现 　 根据细胞理论，细胞是生物有机体的根据细胞理论，细胞是生物有机体的基本结构单位，特别是基本结构单位，特别是植物细胞又是在生植物细胞又是在生理上，发育上具有潜在全能性的单位理上，发育上具有潜在全能性的单位 所谓所谓细胞全能性细胞全能性: :是指植物的每个细是指植物的每个细胞都具有该植物的胞都具有该植物的全部遗传信息全部遗传信息和和发育成发育成完整植株完整植株的能力 换句话说，细胞的全能性是一个植物换句话说，细胞的全能性是一个植物细胞产生一个完整植株的固有能力，不管细胞产生一个完整植株的固有能力，不管是性细胞还是体细胞，在特定环境下仍能是性细胞还是体细胞，在特定环境下仍能进行表达，而产生一个独立完整的个体。

进行表达，而产生一个独立完整的个体 植物细胞的全能性的具体含义植物细胞的全能性的具体含义 在植物的生长发育中，从一个在植物的生长发育中，从一个受精卵受精卵，以后可产生具有完整形态和结构，以后可产生具有完整形态和结构机能的植株，这是全能性，是该受精卵具有该物种全部遗传信息的表现机能的植株，这是全能性，是该受精卵具有该物种全部遗传信息的表现 植物的植物的体细胞体细胞是从合子的有丝分裂产生的，也具有全能性，具备着遗传是从合子的有丝分裂产生的，也具有全能性，具备着遗传信息的传递，转录和翻译的能力在一个完整的植株上，某部分的体细胞只信息的传递，转录和翻译的能力在一个完整的植株上，某部分的体细胞只表现一定的形态，承受一定的功能，这是由于它们受到具体器官和组织的束表现一定的形态，承受一定的功能，这是由于它们受到具体器官和组织的束缚，但其遗传潜力并没有丧失．缚，但其遗传潜力并没有丧失． 差差 异：异：①①受精卵的全能性最高受精卵的全能性最高 ② ②受精卵分化后的细胞中，体细胞的全能性比生殖细胞的低。

受精卵分化后的细胞中，体细胞的全能性比生殖细胞的低  植物细胞在什么条件下表现出全能性呢植物细胞在什么条件下表现出全能性呢? ? 一旦脱离原来所在的器官和组织，处于一旦脱离原来所在的器官和组织，处于离体状态时，离体状态时，在一定的营养在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株整的植株 人工条件下实现的这一过程，就是人工条件下实现的这一过程，就是植物组织培养植物组织培养 生物体内的细胞为什么没有表现出全能性生物体内的细胞为什么没有表现出全能性, ,而是分化成不同的组织、而是分化成不同的组织、器官器官? ? 基因在特定时间和空间条件下选择性表达的结果基因在特定时间和空间条件下选择性表达的结果n高等植物是由无数不同形态、不同生理生化特点及执行不同功能的高等植物是由无数不同形态、不同生理生化特点及执行不同功能的细胞构成：一部分细胞继续保持分生能力，如细胞构成：一部分细胞继续保持分生能力，如分生组织分生组织；另一部分；另一部分细胞逐渐分化失去分生能力而执行其他功能，处于不分裂状态，细胞逐渐分化失去分生能力而执行其他功能，处于不分裂状态，如如永久组织永久组织。

n植物组织培养不仅能使处于分生状态的细胞继续保持分裂能力，同植物组织培养不仅能使处于分生状态的细胞继续保持分裂能力，同时也可使永久组织恢复分裂能力，如同生殖细胞或合子胚一样时也可使永久组织恢复分裂能力，如同生殖细胞或合子胚一样n一个已分化的细胞若要表现其全能性：一个已分化的细胞若要表现其全能性：　　 首先要经历首先要经历脱分化脱分化过程，然后再经历过程，然后再经历分化分化过程植物细胞全能性的实现植物细胞全能性的实现 植物细胞的脱分化植物细胞的脱分化 一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态并形成未分化的愈伤组织的一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态并形成未分化的愈伤组织的现象叫现象叫脱分化即原已分化并具有一定功能的植物细胞脱离原有轨道，失去即原已分化并具有一定功能的植物细胞脱离原有轨道，失去原有状态和功能而回复到能分裂和增殖的愈伤组织状态，这就是植物组织培原有状态和功能而回复到能分裂和增殖的愈伤组织状态，这就是植物组织培养中的去分化或脱分化过程组织培养中，利用特定的条件，促进细胞脱分养中的去分化或脱分化过程组织培养中，利用特定的条件，促进细胞脱分化，化，脱分化（脱分化（dedifferentiation): 脱分化过程的难易与植物种类、组织和细胞状态有关脱分化过程的难易与植物种类、组织和细胞状态有关。

u一般单子叶植物和裸子植物比双子叶植物难；一般单子叶植物和裸子植物比双子叶植物难；u成年细胞和组织比幼年细胞和组织难；成年细胞和组织比幼年细胞和组织难；u单倍体细胞比二倍体细胞难单倍体细胞比二倍体细胞难植物细胞的脱分化的难易植物细胞的脱分化的难易植物细胞的再分化植物细胞的再分化 把原已分化的细胞，经脱分化培养后再次进行分化的现象叫把原已分化的细胞，经脱分化培养后再次进行分化的现象叫再分化 再分化有两种方式：一种是器官发生，一种是胚胎发生再分化有两种方式：一种是器官发生，一种是胚胎发生 在大多数情况下，在大多数情况下，再分化过程是在愈伤组织细胞中发生的再分化过程是在愈伤组织细胞中发生的, ,但在有但在有些情况下，再分化可以直接发生于脱分化的细胞中，无须经历愈伤组些情况下，再分化可以直接发生于脱分化的细胞中，无须经历愈伤组织阶段 再分化（再分化（redifferentiation): 植物细胞实现全能性的过程植物细胞实现全能性的过程 经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下具有转变为经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下具有转变为各种不同细胞类型的能力。

各种不同细胞类型的能力切取的植物组织、器官和细胞，切取的植物组织、器官和细胞，在人工培养条件下，可促进在人工培养条件下，可促进脱分化脱分化，产生愈伤组织，然后经，产生愈伤组织，然后经过继代培养，通过人为控制又可产生分化，即过继代培养，通过人为控制又可产生分化，即再分化再分化，产生，产生分生组织，继而进行形态建成，最终分化出各器官，产生完分生组织，继而进行形态建成，最终分化出各器官，产生完整植株 图示图示: :备注：备注：在有些情况下，再分化也在有些情况下，再分化也可不经愈伤组织阶段，而直接发可不经愈伤组织阶段，而直接发生于脱分化的细胞生于脱分化的细胞外植体外植体愈伤组织愈伤组织生长点生长点根、茎、叶根、茎、叶 或胚状体或胚状体小植株小植株脱分化脱分化再分化再分化生生 长长　小结小结n应当着重指出的是，对于植物细胞来说，应当着重指出的是，对于植物细胞来说，全能性是一个相当基本的属性，全能性是一个相当基本的属性，但全能性只是一种可能性．但全能性只是一种可能性．n要把这种可能性变为现实性必须满足两个条件：要把这种可能性变为现实性必须满足两个条件：一是要把这些细胞从植物一是要把这些细胞从植物体其余部分的抑制性的影响下解脱出来，即处于体其余部分的抑制性的影响下解脱出来，即处于离体状态离体状态；二是要给予它；二是要给予它们适当的刺激，即给予它们一定的们适当的刺激，即给予它们一定的营养物质营养物质，并使它们受到一定的，并使它们受到一定的激素激素的的作用作用. .n一个已分化的细胞若要表现其全能性一个已分化的细胞若要表现其全能性: :　首先要经历　首先要经历脱分化脱分化过程，然后再经历过程，然后再经历分化分化过程。

过程2. 植物离体分化过程的类型植物离体分化过程的类型 1978年，罗士韦根据植物组织培养再分化过程的不同年，罗士韦根据植物组织培养再分化过程的不同，，将其划分为以下五种类型：将其划分为以下五种类型： ①① 无菌短枝型无菌短枝型 ②② 丛生芽增殖型丛生芽增殖型 ③③ 器官发生型器官发生型 ④④ 胚状体发生型胚状体发生型 ⑤⑤ 原球茎原球茎发生型发生型具体做法是：具体做法是：将待将待繁殖的材料繁殖的材料剪成带剪成带一叶的单芽茎段一叶的单芽茎段，转入，转入成成苗培养基苗培养基，一定时间后可，一定时间后可成苗成苗，再剪成带一叶的单芽茎段，，再剪成带一叶的单芽茎段，继继代代又可成苗又可成苗特点：特点：该方法一次成苗，遗传性状稳定，培养过程简单，适用该方法一次成苗，遗传性状稳定，培养过程简单，适用范围大，移栽容易成活范围大，移栽容易成活实例：实例：这是葡萄试管苗繁殖最常用的，也是其它方法最后阶段这是葡萄试管苗繁殖最常用的，也是其它方法最后阶段的常用方法，但繁殖初期速度较慢的常用方法，但繁殖初期速度较慢 2.1 无菌短枝型无菌短枝型无菌短枝无菌短枝切切割割2.2 丛生芽增殖型丛生芽增殖型n方法：方法：茎尖或初代培养的芽，在适宜的培养基上诱导，不茎尖或初代培养的芽，在适宜的培养基上诱导，不断发生腋芽，而成丛生芽，然后转入生根培养基，诱导生根断发生腋芽，而成丛生芽，然后转入生根培养基，诱导生根成苗，扩大繁殖。

成苗，扩大繁殖n特点：特点：这种方法从芽到芽，遗传性状稳定，繁殖速度快，这种方法从芽到芽，遗传性状稳定，繁殖速度快，是茎尖培养和脱毒苗初期必由之路，但过程较复杂，品种之是茎尖培养和脱毒苗初期必由之路，但过程较复杂，品种之间的差异较大间的差异较大芽（单芽、丛芽）芽（单芽、丛芽） 丛生芽丛生芽分分离离顶芽顶芽腋芽腋芽丛生芽的发育丛生芽的发育I I微型扦插微型扦插顶　芽顶　芽CTKCTK刺激刺激 带芽的带芽的 茎切段茎切段 侧　芽侧　芽接种培养接种培养形成的茎梢节长，直形成的茎梢节长，直立向上呈小灌木丛状立向上呈小灌木丛状获得较多嫩茎梢获得较多嫩茎梢茎段培养茎段培养继代扩繁继代扩繁试管苗试管苗生根培养生根培养无愈伤组织产生无愈伤组织产生初初　　代代继继　　代代丛生芽的发育丛生芽的发育IIII 2.3 器官发生型器官发生型方法：从植物叶片、子房、花药、胚珠、叶柄等，诱导出方法：从植物叶片、子房、花药、胚珠、叶柄等，诱导出愈伤愈伤组织组织，从愈伤组织上诱导，从愈伤组织上诱导不定芽不定芽，进一步发育，形成，进一步发育，形成完整植株完整植株特点：特点：这种方法从原来成熟组织上重新诱导出分生组织，发生这种方法从原来成熟组织上重新诱导出分生组织，发生单芽或丛生芽，可扩大繁殖，也可创造有益突变体体，但可能单芽或丛生芽，可扩大繁殖，也可创造有益突变体体，但可能会发生变异，用于良种繁殖时应注意。

会发生变异，用于良种繁殖时应注意愈伤组织培养愈伤组织培养愈伤组织愈伤组织具分裂能力的细胞具分裂能力的细胞已分化细胞已分化细胞脱分化脱分化 继继 代代愈伤组织愈伤组织 分分 裂裂诱导期诱导期分裂期分裂期形成期形成期愈伤组织诱导期愈伤组织诱导期 诱导期诱导期是外植体细胞进行细胞分裂的准备时期，是愈伤组织形成的起是外植体细胞进行细胞分裂的准备时期，是愈伤组织形成的起点 特点：特点：处在静止状态的成熟细胞通过一些刺激因素和激素的诱导作处在静止状态的成熟细胞通过一些刺激因素和激素的诱导作用，使其细胞内合成代谢活动加强，迅速进行蛋白质和核酸物质的合成，用，使其细胞内合成代谢活动加强，迅速进行蛋白质和核酸物质的合成，RNA含量迅速增加，细胞核体积明显增大，细胞大小变化不大含量迅速增加，细胞核体积明显增大，细胞大小变化不大 诱导期的长短，因植物种类、外植体的生理状况和外部因素而异诱导期的长短，因植物种类、外植体的生理状况和外部因素而异 外源生长物质对诱导细胞开始分裂效果最好最常用的有外源生长物质对诱导细胞开始分裂效果最好最常用的有2,4-D、、NAA、、IAA和细胞分裂素等。

和细胞分裂素等愈伤组织分裂期愈伤组织分裂期 指细胞通过一分为二的分裂，指细胞通过一分为二的分裂，不断增生子细胞，即发生脱分化的不断增生子细胞，即发生脱分化的过程特征：特征：细胞分裂快，细胞体积迅速细胞分裂快，细胞体积迅速变小．当细胞体积最小，细胞核和变小．当细胞体积最小，细胞核和核仁最大，细胞内无大液泡，核仁最大，细胞内无大液泡，RNA含量最高时，标志细胞分裂含量最高时，标志细胞分裂进入了高峰期．进入了高峰期．愈伤组织愈伤组织形成期形成期形成期形成期是指外植体细胞经过诱导期和分裂是指外植体细胞经过诱导期和分裂期后形成无序结构的愈伤组织期后形成无序结构的愈伤组织特征：特征：细胞的平均大小相对稳定，不再减细胞的平均大小相对稳定，不再减小．细胞分裂由原来局限在组织外缘的平小．细胞分裂由原来局限在组织外缘的平周分裂转为组织内部的较深层局部细胞的周分裂转为组织内部的较深层局部细胞的分裂分裂, , 形成瘤状结构的外表和内部分化；形成瘤状结构的外表和内部分化；出现多种类型的细胞出现多种类型的细胞脱分化脱分化分分 化化愈伤组织愈伤组织芽、芽丛芽、芽丛切割芽丛切割芽丛 继代培养继代培养大量芽丛大量芽丛试管苗试管苗生根培养生根培养外外植植体体初初　　代代继继　　代代不定芽的发育不定芽的发育①② 2.4 胚状体发生型胚状体发生型 指由培养细胞诱导分化出具胚芽、胚根、胚轴的胚状结指由培养细胞诱导分化出具胚芽、胚根、胚轴的胚状结构，进而长成完整植株。

我们把由愈伤组织的类似薄壁组织构，进而长成完整植株我们把由愈伤组织的类似薄壁组织细胞不经有性过程而直接产生类似胚的这一结构，称为细胞不经有性过程而直接产生类似胚的这一结构，称为胚状胚状体胚状体胚状体 (somatic embryo):胚状体胚状体在外观上，这种方式和不定芽均有光滑、圆形突起的形状在外观上，这种方式和不定芽均有光滑、圆形突起的形状外外 植植 体体愈伤组织愈伤组织小孢子小孢子游离单细胞游离单细胞器　官器　官　　胚胚 状状 体体　试试 管管 苗苗体细胞胚状体的发育体细胞胚状体的发育n特点：特点：这种胚状体具有数量多，结构完整，易成苗和繁殖这种胚状体具有数量多，结构完整，易成苗和繁殖速度快的特点，是植物离体无性繁殖最快的方法，也是人速度快的特点，是植物离体无性繁殖最快的方法，也是人工种子和细胞工程的前提，受到国内外的普遍重视工种子和细胞工程的前提，受到国内外的普遍重视n注意：注意：能诱导胚状体的植物种类及品种还不多，其发生机能诱导胚状体的植物种类及品种还不多，其发生机理尚不清楚，有的还存在一定变异，应先经试验后才能在理尚不清楚，有的还存在一定变异，应先经试验后才能在生产上大量应用。

生产上大量应用胚状体发生型特点胚状体发生型特点原球茎特点原球茎特点: : 缩短的、呈珠粒状的、由胚性缩短的、呈珠粒状的、由胚性细胞组成的、类似嫩茎的器官细胞组成的、类似嫩茎的器官2.5 原球茎原球茎发生型发生型  原球茎发生型原球茎发生型 大部分兰花的培养属于这一类型大部分兰花的培养属于这一类型原球茎是一种类胚原球茎是一种类胚组织，组织，培养兰花类的茎尖或腋芽可直接产生原球茎，继而培养兰花类的茎尖或腋芽可直接产生原球茎，继而分化成植株，也可以继代增殖产生新的原球茎，这取决于分化成植株，也可以继代增殖产生新的原球茎，这取决于培养条件和培养基培养条件和培养基3.植物组织培养的特点植物组织培养的特点3.1 培养材料经济培养材料经济3.2 培养条件可人为控制培养条件可人为控制3.3 生长周期短，繁殖率高生长周期短，繁殖率高3.4 管理方便，利于自动化控制管理方便，利于自动化控制植物组织培养的特点植物组织培养的特点3.1 培养材料经济培养材料经济 由于植物细胞具有全能性，故单个或小块组织细胞培养由于植物细胞具有全能性，故单个或小块组织细胞培养即可再生植株，这在研究上有重大价值。

即可再生植株，这在研究上有重大价值 在生产实践中，由于取材少，培养效果好，对于新品在生产实践中，由于取材少，培养效果好，对于新品种的推广和良种复壮更新，都有重大的实践意义种的推广和良种复壮更新，都有重大的实践意义3.2 培养条件可以人为控制培养条件可以人为控制 组织培养采用的植物材料完全是在人为提供的培养基质和组织培养采用的植物材料完全是在人为提供的培养基质和小气候环境条件下进行生长，摆脱了大自然中四季、昼夜的变小气候环境条件下进行生长，摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响，且条件均一，对植物生长极为化以及灾害性气候的不利影响，且条件均一，对植物生长极为有利，便于稳定地进行周年培养生产有利，便于稳定地进行周年培养生产 培养条件可以人为加以控制培养条件可以人为加以控制3.3 生长周期短，繁殖率高生长周期短，繁殖率高 植物组织培养是由于人为控制培养条件，根据不同植物不植物组织培养是由于人为控制培养条件，根据不同植物不同部位的不同要求而提供不同的培养条件，因此生长较快另同部位的不同要求而提供不同的培养条件，因此生长较快另外，植株也比较小，往往外，植株也比较小，往往20—30d为一个周期。

为一个周期 　　 所以，虽然植物组织培养需要一定设备及能源消耗，但由所以，虽然植物组织培养需要一定设备及能源消耗，但由于植物材料能按几何级数繁殖生产，故总体来说成本低廉，且于植物材料能按几何级数繁殖生产，故总体来说成本低廉，且能及时提供规格一致的优质种苗或脱病毒种苗能及时提供规格一致的优质种苗或脱病毒种苗 繁殖系数大，培养周期短繁殖系数大，培养周期短3.4 管理方便，利于工厂化生产和自动化控制管理方便，利于工厂化生产和自动化控制 植物组织培养是在一定的场所和环境下，人为提供一定的植物组织培养是在一定的场所和环境下，人为提供一定的温度、光照、湿度、营养、激素等条件，既利于高度集约化和温度、光照、湿度、营养、激素等条件，既利于高度集约化和高密度工厂化生产，也利于自动化控制生产它是未来农业工高密度工厂化生产，也利于自动化控制生产它是未来农业工厂化育苗的发展方向厂化育苗的发展方向管理方便，有利于实现工管理方便，有利于实现工厂化生产厂化生产和自动化控制和自动化控制4.1 植物所需必需元素的生理作用植物所需必需元素的生理作用 植物需要若干矿质元素、气体元素及某些生理活性物质等来维持自己的植物需要若干矿质元素、气体元素及某些生理活性物质等来维持自己的生存，这些必需元素有四个方面的生理作用：生存，这些必需元素有四个方面的生理作用：①① 作为结构物质参与机体的建造、如作为结构物质参与机体的建造、如C、、H、、O、、N等。

等 ②② 构成特殊的生理活性物质，在代谢中起调节作用，构成特殊的生理活性物质，在代谢中起调节作用， 如如VB族等③③ 维持离子浓度的平衡，电荷平衡，胶体平衡等维持离子浓度的平衡，电荷平衡，胶体平衡等④④ 影响器官的形态发生和建成，如影响器官的形态发生和建成，如K、、Fe等 4. 植物组织培养所需营养与环境条件植物组织培养所需营养与环境条件4.2 植物组织培养所需营养与环境条件植物组织培养所需营养与环境条件 植物组织培养需要一定的营养及环境条件，主要包括以下植物组织培养需要一定的营养及环境条件，主要包括以下八方面内容：八方面内容： 4.2.1 无机营养无机营养 4.2.5 能源和渗透压能源和渗透压 4.2.2 有机营养有机营养 4.2.6 其它成分其它成分 4.2.3 植物生长调节物质植物生长调节物质 4.2.7 温温 度度 4.2.4 琼琼 脂脂 4.2.8 光光 照照4.2.1 无机营养无机营养 无机营养无机营养在植物发育中非常重要，镁在植物发育中非常重要，镁Mg是叶绿素分子的一部分，钙是叶绿素分子的一部分，钙Ca是细胞壁的组分之一，氮是细胞壁的组分之一，氮N是各种氨基酸、维生素、蛋白质和核酸的重要是各种氨基酸、维生素、蛋白质和核酸的重要组成部分。

此外，铁组成部分此外，铁Fe、钼、钼Mo、锌、锌Zn等是某些酶的组成部分，植物除了等是某些酶的组成部分，植物除了C、、H、、O外，已知还有外，已知还有12种元素对于植物的生长是必需的，它们是种元素对于植物的生长是必需的，它们是N、、P、、K、、Ca、、Mg、、S、、Fe、、Mn、、Cu、、Zn、、B、、AI 其中前其中前6种元素需要的数量大，因此称为种元素需要的数量大，因此称为大量元素大量元素或主要元素（一般或主要元素（一般指浓度大于）；后指浓度大于）；后6种元素需要的数量较小，因此称为种元素需要的数量较小，因此称为微量元素微量元素或次要元素（一般指浓度小于）或次要元素（一般指浓度小于） 4.2.2 有机营养有机营养n植物组织培养中，经常使用的维生素及其作用：植物组织培养中，经常使用的维生素及其作用：VC：： 防止组织褐化；防止组织褐化；VB1：与愈伤组织的产生和生活力有关；：与愈伤组织的产生和生活力有关；VB6：促进根的生长；：促进根的生长；烟酸：促进胚的发育；烟酸：促进胚的发育；肌醇：利于胚和芽的形成肌醇：利于胚和芽的形成维生素类维生素类 氨基酸：是重要的有机氮源。

氨基酸：是重要的有机氮源　　(1)甘氨酸甘氨酸 (2)丝氨酸丝氨酸 (3)酪氨酸酪氨酸氨基酸类氨基酸类(4)谷氨酰胺谷氨酰胺(5)水解酪蛋白水解酪蛋白(CH) (6)水解乳蛋白水解乳蛋白(LH)有机添加物有机添加物　　椰乳椰乳 香蕉香蕉　马铃薯　马铃薯 酵母提取液酵母提取液 麦芽提取液麦芽提取液 苹果汁苹果汁 番茄汁番茄汁 柑桔汁柑桔汁4.2.3 植物生长调节物质植物生长调节物质 植物生长调节物质包括植物生长调节物质包括: :u 生长素生长素; ;u 细胞分裂素细胞分裂素; ;u 赤霉素等赤霉素等　　4.2.3.1 生长素生长素 生长素常用的有：生长素常用的有：n2,4—二氯苯氧乙酸二氯苯氧乙酸(2,4—D)；；n萘乙酸萘乙酸(NAA)；；n吲哚乙酸吲哚乙酸(IAA)；；n吲哚丁酸吲哚丁酸(IBA)等。

等生长素的作用生长素的作用n生长素的主要作用是：生长素的主要作用是：诱导愈伤组织形成；诱导根的分化诱导愈伤组织形成；诱导根的分化;促进根、促进根、茎、芽的生长茎、芽的生长n它们的作用大小它们的作用大小为为2,4-D> NAA>IBA>IAAnIAA为天然植物生长素，也可用化学方法合成，它见光易分解，高温为天然植物生长素，也可用化学方法合成，它见光易分解，高温高压时也易破坏，故应置于棕色瓶中，放在高压时也易破坏，故应置于棕色瓶中，放在4℃～～5℃下保存；下保存；IBA、、NAA、、2,4—D都是人工合成的物质，它在都是人工合成的物质，它在120℃下仍然稳定下仍然稳定NAAnA：：NAA 0mg/L，芽（少），根（无），芽（少），根（无）nB：，芽（少），根（无），愈伤组织（少量）：，芽（少），根（无），愈伤组织（少量）nC：，芽（少），根（多），愈伤组织（一定量）：，芽（少），根（多），愈伤组织（一定量）A B C 4.2.3.2 细胞分裂素细胞分裂素 　细胞分裂素的主要作用：细胞分裂素的主要作用：　　(1)(1)有促进细胞分裂和分化；有促进细胞分裂和分化；　　(2)(2)延迟组织衰老；延迟组织衰老；　　(3)(3)增强蛋白质合成；　增强蛋白质合成；　　　(4)(4)抑制顶端优势；抑制顶端优势；　　(5)(5)促进侧芽生长；促进侧芽生长；　　(6)(6)显著地改变其它激素作用的特点。

显著地改变其它激素作用的特点 细胞分裂素的种类细胞分裂素的种类细胞分裂素常用的有细胞分裂素常用的有:激动素激动素(KT);6-苄基氨基嘌呤苄基氨基嘌呤(6-BA);玉米素玉米素(ZT);2-异戊烯腺嘌呤异戊烯腺嘌呤(2ip)等它们作用的强弱顺序为：它们作用的强弱顺序为：ZT=2ip>6-BA>KT它们经高温高压灭菌后性能很稳定，只是它们经高温高压灭菌后性能很稳定，只是KT见光易分解，见光易分解，故应在故应在4℃～～5℃低温黑暗下保存低温黑暗下保存 BAnA：：BA(0mg/L) ，芽（减少），根（增多）愈伤组织（一定量），芽（减少），根（增多）愈伤组织（一定量）nB：：BA(0.1mg/L)，芽（适量），根（适量）愈伤组织（一定量），芽（适量），根（适量）愈伤组织（一定量）A B 4.2.3.3 赤霉素赤霉素n赤霉素赤霉素—-在组织培养中使用的只有在组织培养中使用的只有GA3一种，它是一一种，它是一种天然产物，能促进已分化的芽的伸长生长种天然产物，能促进已分化的芽的伸长生长 小　结小　结n2,4-D多用于诱导脱分化，而诱导再分化一般用多用于诱导脱分化，而诱导再分化一般用NAA、、IBA 及及IAA、、NAA有利于单子叶植物的分化，有利于单子叶植物的分化，IBA诱导生根效果最好。

诱导生根效果最好n低浓度的低浓度的2,4-D有利于胚状体的分化，但妨碍胚状体进一步发育有利于胚状体的分化，但妨碍胚状体进一步发育n通常认为通常认为: 生长素和细胞分裂素的生长素和细胞分裂素的比值大比值大时有利于时有利于根根的形成的形成,这时生长这时生长素起主导作用；素起主导作用；比值小比值小时，则促进时，则促进芽芽的形成，这时细胞分裂素起主要的形成，这时细胞分裂素起主要作用n故应根据植物的种类和培养部位，选择适宜的生长调节物质的种类和故应根据植物的种类和培养部位，选择适宜的生长调节物质的种类和浓度，才能有效地控制器官的分化浓度，才能有效地控制器官的分化 4.2.4 琼脂琼脂n琼脂琼脂是一种高分子碳水化合物，从海藻中提取是一种高分子碳水化合物，从海藻中提取n它的主要作用它的主要作用是使培养基在常温下凝固，以作固体培养用是使培养基在常温下凝固，以作固体培养用. .另外，琼脂还可以吸附某些代谢有害物质另外，琼脂还可以吸附某些代谢有害物质 4.2.5 能源和渗透压能源和渗透压 在培养基中添加糖，作为碳素来源和能量物质，同时糖对在培养基中添加糖，作为碳素来源和能量物质，同时糖对保持培养基的渗透压也有重要作用。

保持培养基的渗透压也有重要作用　　 使用最普遍的是使用最普遍的是蔗糖蔗糖，此外还有，此外还有葡萄糖和果糖葡萄糖和果糖 近年来发现使用近年来发现使用麦芽糖麦芽糖，对植物的诱导率的提高有一定的，对植物的诱导率的提高有一定的作用 4.2.6 其它成分其它成分活性炭活性炭: : 　　　　活性炭加入培养基中主要是利用其吸附能力，减少一些有活性炭加入培养基中主要是利用其吸附能力，减少一些有害物质的影响害物质的影响另外，活性炭对形态发生和器官形成有良好效另外，活性炭对形态发生和器官形成有良好效应　　活性炭使培养基变黑，对某些植物诱导生根有利，但是活　　活性炭使培养基变黑，对某些植物诱导生根有利，但是活性炭对物质的吸附基本无选择性，既对有害物质进行吸附，也性炭对物质的吸附基本无选择性，既对有害物质进行吸附，也对有利物质进行吸附，因此选择使用时要进行周全考虑对有利物质进行吸附，因此选择使用时要进行周全考虑 4.2.7 温度温度温度是植物组织培养成功的重要条件温度是植物组织培养成功的重要条件 在植物组织培养中大多采用在植物组织培养中大多采用最适温度最适温度，并保持恒温培养，以加速生长，并保持恒温培养，以加速生长. 温度不仅对增殖，而且对器官的形成也有影响。

温度不仅对增殖，而且对器官的形成也有影响 通常采用通常采用25℃±2℃的温度，对大多数植物来讲是合适的，但也因种类的温度，对大多数植物来讲是合适的，但也因种类而异 在植物组织培养以前先对培养材料进行在植物组织培养以前先对培养材料进行低温或高温处理低温或高温处理，往往有促进，往往有促进诱导和生长的作用，为此，常在培养和实践中采用诱导和生长的作用，为此，常在培养和实践中采用 4.2.8 光照光照n组织培养中光照也是重要条件，组织培养中光照也是重要条件，它对生长和分化有很大影响它对生长和分化有很大影响当然这也与材料的性质，培养基情况以及由于光照引起的温当然这也与材料的性质，培养基情况以及由于光照引起的温度上升等方面因素有关度上升等方面因素有关n光照强度：光照强度： 有的材料适合光培养，有的则适合暗培养有的材料适合光培养，有的则适合暗培养 光质：光质： 不同波长的光对细胞的分裂和器官的分化也有影响不同波长的光对细胞的分裂和器官的分化也有影响课后作业题课后作业题填空题：填空题：1.细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的_______和和_______的能力。

的能力2.一个已停止分裂的成熟细胞转变为一个已停止分裂的成熟细胞转变为__________状态，状态，并形成并形成__________的现象称为的现象称为“脱分化脱分化”3.从单个细胞或外植体形成的愈伤组织从单个细胞或外植体形成的愈伤组织 ，大致要经历，大致要经历 ______、、____和＿＿＿期和＿＿＿期4.组织培养的特点是：组织培养的特点是：_______、、_______、、_______、、 _______ OK!。