延胡索产地醋煮工艺的研究.docx

延胡索产地醋煮工艺的研究田永亮，窦志英，曹柳，王萍，李迎春【摘要】目的优选出延胡索最正确产地醋煮工艺方式第一对温度、用醋量和拌润时刻进行了单因素考察，然后采纳正交实验，以用醋量、拌润时刻和粒度作为正交设计因素，再采纳HPLC法测定延胡索中延胡索乙素、原阿片碱和去氢紫堇碱3种有效成份的含量，最后取得延胡索最正确产地醋煮工艺结果延胡索最正确产地醋煮工艺即选小个子药材加40%的醋和适量水拌润4h后煮至醋液吸尽；大个药材应适当破碎后再炮制结论优选出的延胡索最正确产地醋煮工艺简单易操作，稳固可行关键词】产地加工；醋煮工艺；延胡索；延胡Abstract：ObjectiveTooptimizetheorigin-boilingwithvinegartechnology.MethodsSingle-factorexperimentwascarriedoutwithtemperature,vinegarvolumeandmixingtimeatfirst,orthogonalexperimentwascarriedoutwithvinegarvolume,mixingtimeandparticlesizeasfactorsoftheorthogonalexperimentdesign.HPLCwasusedtodeterminethecontentsoftetrahydropalmatine,protopineanddehydrocorydalinewhichwerethethreemainactiveingredientsinRhizomaCorydalis.Atlast,theoptimumorigin-boilingwithvinegartechnologyofRhizomaCoridaliswasobtained.ResultsTheoptimumoriginboilingwithvinegartechnologyofRhizomaCoridaliswasthatthesmallCorydaliswasadded40%vinegarandinfiltrated4handboiled,thebigoneswasprocessedafteroptimumoriginboilingwithvinegartechnologyofRhizomaCoridalisissimple,easyandstably.Keywords：Origin-processing;Boilingwithvinegartechnology;Corydalistuber;Tetrahydropalmatine;Protopine;Dehydrocorydaline延胡索为罂粟科(Papaveraceae)植物延胡索Corydalisyanhusuo的干燥块茎。

具有活血、利气、止痛之功效，临床用于医治胸胁、脱腹疼痛、经闭痛经、产后瘀阻、跌扑肿痛等症[l]o延胡索中要紧有效成份为生物碱，在药材中多数以结合态的生物碱盐存在，少数碱性极弱的以游离态形式存在[2]o由于市售的延胡索都是通过产地水煮加工并经炮制后作为临床药用的，如此工序较繁琐，质量难以操纵和保证在产地加工进程中，延胡索水煮后损失了很多有效成份，有学者调研时发觉(毛淑杰，游修琪，顾雪竹.产地不同采制方式对延胡索质量的阻碍.中华中医药学会炮制分会2020年学术研讨会论文集，2020：210.),本地农人有效其水煮液治病的，而且疗效专门好依照本实验室对不同炮制方式对延胡索中有效成份含量阻碍［3］的考察结果，延胡索鲜品经醋煮后的水提液中，其要紧有效成份延胡索乙素、原阿片碱和去氢紫堇碱的含量也较高因此本实验选择了鲜品醋煮作为产地加工炮制一体化的工艺，以延胡索乙素、原阿片碱和去氢紫堇碱作为指标，先进行了对烘制温度、用醋量和拌润时刻的单因素考察，再通过采纳正交实验法，以用醋量、拌润时刻和粒度为考察因素，优选出延胡索产地醋煮工艺的最正确条件，以期为产地加工与炮制一体化工艺的进一步研究奠定基础1仪器与试药DHG78-1烘箱（湖北省黄石市医疗器械厂）；BP121S电子天平（瑞士托利斯）；X205红外感应天平（十万分之一,METTLERTOLEDO）；AS20500AT超声波清洗器（天津奥特赛恩斯仪器）；日本岛津HPLC系统（SCL-10AVPHPLCPump；SPD-M10AVP二级管阵列检测器）；自动进样系统；色谱柱TC-C18（250mmXmm,5Um,Agilent）o延胡索乙素对照品（批号：0726-200409中国药品生物制品检定所）；去氢紫堇碱对照品（批号：043-27611日本和光纯药工业株式会社）；原阿片碱对照品（批号：0853-200201中国药品生物制品检定所）。

食用醋（天津市天立独流老醋股分）；水（蒸播水及色谱用水）；甲醇，乙月青（色谱纯，天津协和昊鹏色谱科技）；三乙胺，磷酸（分析纯，天津市北方天医化学试剂厂）延胡索鲜药材产地为陕西董家营，经本校中药鉴定教研室马琳教授鉴定为罂粟科植物延胡索Corydalisyanhusuo的干燥块茎本实验中，延胡索药材炮制时的含水量为38%2方式与结果2.1含量测定方式的成立[3]色谱条件色谱柱为AgilentTC-C18（250mmXmm,5Um）,美国安杰伦公司；流动相为乙月青%磷酸溶液（三乙胺调pH（28：72）,流速为1ml/min,柱温为35℃,检测波长为280nm,在此条件下，理论塔板数按延胡索乙素峰、原阿片碱峰和去氢紫堇碱峰计算均不低于3000o空白溶剂色谱图中在与延胡索乙素、去氢紫堇碱、原阿片碱色谱峰相应位置上无峰，说明此系统条件无干扰色谱图见图1对照品溶液的制备周密称取去氢紫堇碱对照品mg,延胡索乙素对照品mg,原阿片碱对照品mg,别离置10ml容量瓶中，加甲醇至刻度再别离吸取去氢紫堇碱、延胡索乙素、原阿片碱对照品溶液，，ml于10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，配制去氢紫堇碱为5mg/mL.延胡索乙素为9mg/ml＞原阿片碱为208mg/ml的混合对照品储蓄液。

供试品溶液的制备周密称取样品粉末g,周密加水25ml,超声提取2次,30min/次，滤过，归并滤液，定容到100ml容量瓶中，过Um微孔滤膜，取续滤液，即得线性关系的考察周密吸取混合对照品储蓄液，以甲醇配置浓度别离为：去氢紫堇碱5,725,625,175,3125,5875mg/ml,延胡索乙素9,45,225,935,6125,9675mg/ml,原阿片碱208,104,552,1312,776,0656mg/mlo吸取10U1注入高效液相色谱仪，测定峰面积以峰面积(X)为横坐标，浓度(Y)为纵坐标，绘制标准曲线,测定去氢紫堇碱的回归方程为Y=3X10-8X+5,r=9,线性范围为：875〜Ugo延胡索乙素的回归方程Y=lX10-7x+2,r=9,线性范围为：675〜Ugo原阿片碱的回归方程为Y=lX10-7x+3,r=6,线性范围为：656〜08 u go方式学考察周密度：周密吸取供试品溶液，重复进样6次，测得去氢紫堇碱峰面积RSD=%,延胡索乙素峰面积RSD=%,原阿片碱峰面积RSD=%,说明周密度良好稳固性：取同一供试品溶液，别离于0,2,4,6,8,10h进样测定，测得去氢紫堇碱峰面积RSD=%,延胡索乙素峰面积RSD=%,原阿片碱峰面积RSD=%,说明供试品溶液在10h内稳固。

重复性：取同一批号样品，依照供试品溶液的制备方式，别离制备6份供试品溶液，测定去氢紫堇碱、延胡索乙素、原阿片碱的平均含量别离为，3,mg/g,RSD别离为％,%,%结果说明本方式重复性良好加样回收率实验：周密称取6份已测知含量的样品各g,添加各对照品溶液适量，按样品含量测定项下方式操作，测得去氢紫堇碱、延胡索乙素、原阿片碱平均加样回收率别离为％,%,%,RSD别离为％,%,%0结果见表1表1延胡索水提液的加样回收率实验结果（略）单因素考察烘制温度考察称取延胡索药材9份，用40%的醋浸润12h,别离在50,60,80,100,120,140,160,180℃和200c烘干,粉碎过40目筛，备用用醋量的考察称取延胡索药材.7份，别离加入10%,20%,30%,40%,50%,60%和70%的醋，并加适量水浸润12ho煮至醋液吸尽，烘干，粉碎过40目筛备用拌润时刻的考察称取延胡索药材8份，加入40%的醋和适量的水,别离拌润2,4,6,8,10,12,18,24h,煮至醋液吸尽，烘干，粉碎过40目筛备用样品的含量测定取各炮制样品，按项“下的方式制备供试品溶液，周密吸取各供试品溶液20ul,别离注入高效液相色谱仪，测定含量。

以去氢紫堇碱X（权重40%）,延胡索乙素Y（权重40%）和原阿片碱Z（权重20%）的含量（mg/g）为指标进行评分，评分=100X（XX40%/Xmax+YX40%/Ymax+ZX20%/Zmax）o结果见表2〜4表2不同温度的延胡索样品中3种成份的含量（略）表3不同用醋量的延胡索样品中3种成份的含量（略）表4不同拌润时刻的延胡索样品中3种成份的含量（略）结果说明，温度对3种有效成份的含量阻碍不大；用醋量：10%〜30%的用醋量下测得的3种有效成份含量相差甚微，40%〜70%的用醋量下测得的有效成份含量也很接近，而且明显高于前3个水平的用醋量；拌润时刻以拌润8h时3种有效成份的含量是最高的依照各单因素的优选结果综合后选定延胡索炮制工艺中各技术参数为：温度100〜180℃,用醋量为40%,拌润时刻为8h正交实验优选延胡索的最正确醋煮工艺正交实验设计在参考文献和单因素考察的基础上，正交设计选择了以粒度、用醋量、拌润时刻为考察因素，每一个因素3个水平表5炮制因素水平（略）样品的炮制取延胡索药材大、中、小3份，将每份平均分成3份，按L9（34）正交实验安排如表6表6延胡索药材炮制实验设计表及结果（略）样品的含量测定取各样品，按“项下的方式制备供试品溶液，周密吸取各供试品溶液20m,别离注入高效液相色谱仪，测定含量。

以去氢紫堇碱X（权重40%）,延胡索乙素Y（权重40%）和原阿片碱Z（权重20%）的含量（mg/g）为指标进行评分结果见表6方差分析结果见表7评分=100X（XX40%/Xmax+YX40%/Ymax+ZX20%/Zmax）o表7延胡索药材正交实验方差分析结果（略）表6直观分析结果说明，延胡索醋煮鲜延胡索最正确工艺为A3B2C1,即小个延胡索加40%的醋和适量水拌润4h大个药材应当适当破碎后炮制方差分析结果说明阻碍因素依次为粒度＞用醋量＞拌润时刻，且3个因素均有显著性阻碍验证实验将鲜延胡索别离依照指定的最正确炮制工艺平行炮制3份，应用成立的含量测定方式进行含量测定结果见表8表8延胡索醋煮最正确工艺验证明验（略）结果说明，验证明验样品综合评判与优选结果相近，说明优选的工艺条件比较稳固可行3讨论由于醋煮工艺简单易行，不需要其他特殊的设备，只要在原先产地加工一一水煮延胡索进程中加入食醋适量，并煮至醋液吸尽即可，此工艺既简单易行，又能够幸免有效成份的损失，因此较适合于作为产地加工与炮制一体化的工艺一样在辅料炮制进程顶用文火，温度在100℃左右，旦往往高于100℃［4］有报导称［5］元胡拌醋后加热处置对其中的有效成份是有阻碍的。

而本实验考察了温度对延胡索中有效成份的阻碍，结果发觉温度对3种有效成份阻碍不大，对延胡索乙素和原阿片碱几乎没有阻碍，因此未将温度作为正交实验的因素，醋煮延胡索时加热至沸腾后维持微沸即可有研究说明（游修琪，李先端，顾雪竹.醋制增效理论实验研究1一大剂量醋重复炮制对延胡索成份的阻碍中华中医药学会炮制分会2020年学术研讨会论文集，2020）,延胡索的最大吸醋量为药材的70%,因此本。