第二章天然药物化学成分提取分离和鉴定的方法与技术课件.ppt

天然药物化学天然药物化学主讲人：主讲人：赵雪梅赵雪梅提取分离的方法与技术提取分离的方法与技术提取分离的两种情况：提取分离的两种情况：1、目的物为、目的物为已知已知成分或化学结构类型成分或化学结构类型2、从天然药物中寻找、从天然药物中寻找未知未知有效成分或有效部位有效成分或有效部位研究有效成分的程序研究有效成分的程序提取提取 分离分离 鉴定鉴定第一节第一节 提取方法及技术提取方法及技术一、溶剂提取法一、溶剂提取法1、概念、概念 根根据据天天然然药药物物中中各各种种化化学学成成分分的的溶溶解解性性能能，，选选择择对对有有效效成成分分溶溶解解度度大大而而对对其其他他成成分分溶溶解解度度小小的的溶溶剂剂，，用用适适当当的的方方法法将将所所需需化化学学成成分分尽尽可可能能完完全全的的从从药材组织中溶解提出的方法药材组织中溶解提出的方法2、基本原理、基本原理 （（1）粉碎）粉碎 （（2）苷类）苷类 防止酶的水解防止酶的水解 3、提取前的预处理、提取前的预处理 是是在在渗渗透透扩扩散散作作用用下下，，溶溶剂剂渗渗入入药药材材组组织织细细胞胞内内部部，，溶溶解解可可溶溶性性物物质质，，造造成成细细胞胞内内外外溶溶质质的的浓浓度度差差，，从从而而带带动动溶溶质质做做不不断断往往返返的的运运动动，，直直至至细细胞胞内内外外溶溶液液中中被被溶溶解解的的化化学学成成分分的的浓浓度度达达到到平平衡衡，，提提出出所需的化学成分。

所需的化学成分4、影响提取的因素、影响提取的因素 溶溶溶溶剂剂剂剂的的的的选选选选择择择择、、、、提提提提取取取取的的的的方方方方法法法法、、、、药药药药材材材材的的的的粉粉粉粉碎碎碎碎度度度度、、、、温温温温度、时间、浓度差等度、时间、浓度差等度、时间、浓度差等度、时间、浓度差等 溶剂提取法的关键：选择合适溶剂的溶剂溶剂提取法的关键：选择合适溶剂的溶剂 溶溶溶溶剂剂剂剂的的的的选选选选择择择择：：：：遵遵遵遵循循循循“相相似似相相溶溶”的的的的规规规规律律律律，，，，根根根根据据据据溶溶溶溶剂剂剂剂的的的的极极极极性性性性，，，，被被被被提提提提取取取取成成成成分分分分及及及及共共共共存存存存的的的的其其其其他他他他成成成成分分分分的的的的性性性性质质质质来来来来决决决决定定定定，，，，同同同同时时时时兼兼兼兼顾顾顾顾考考考考虑虑虑虑溶溶溶溶剂剂剂剂是是是是否否否否使使使使用用用用安安安安全全全全、、、、易易易易得得得得、、、、廉价、浓缩方便等问题廉价、浓缩方便等问题廉价、浓缩方便等问题廉价、浓缩方便等问题5、溶剂的极性、溶剂的极性常用溶剂的极性大小的顺序排列如下：常用溶剂的极性大小的顺序排列如下：常用溶剂的极性大小的顺序排列如下：常用溶剂的极性大小的顺序排列如下：石油醚石油醚石油醚石油醚 < < 苯苯苯苯 < < 无水乙醚无水乙醚无水乙醚无水乙醚 < < 三氯甲烷三氯甲烷三氯甲烷三氯甲烷 < < 乙酸乙酸乙酸乙酸乙酯乙酯乙酯乙酯 < < 丙酮丙酮丙酮丙酮 < < 乙醇乙醇乙醇乙醇 < < 甲醇甲醇甲醇甲醇 < < 水水水水 溶剂名称溶剂名称介电常数介电常数溶剂名称溶剂名称介电常数介电常数石油醚石油醚1.8正丁醇正丁醇(n-BuOH)17.5苯（苯（C6H6））2.3丙酮丙酮(Me2CO)21.5乙醚乙醚（无水，（无水，Et2O））4.3乙醇乙醇(EtOH)26.0三氯甲烷三氯甲烷CHCl35.2甲醇甲醇(MeOH)31.2乙酸乙酯乙酸乙酯EOAc6.1水水(H2O)80.0表表表表2-1 2-1 常用溶剂的介电常数常用溶剂的介电常数常用溶剂的介电常数常用溶剂的介电常数按极性大小顺序将溶剂的分类：按极性大小顺序将溶剂的分类：（（1）水）水（（2）亲水性有机溶剂）亲水性有机溶剂（（3）亲脂性有机溶剂）亲脂性有机溶剂 极性较大且能与水相互混溶的有机溶剂。

极性较大且能与水相互混溶的有机溶剂极性较大且能与水相互混溶的有机溶剂极性较大且能与水相互混溶的有机溶剂 甲醇、乙醇、丙酮等甲醇、乙醇、丙酮等甲醇、乙醇、丙酮等甲醇、乙醇、丙酮等 极性较小，与水不能混溶的有机溶剂极性较小，与水不能混溶的有机溶剂极性较小，与水不能混溶的有机溶剂极性较小，与水不能混溶的有机溶剂 石油醚、苯、乙醚、三氯甲烷、乙酸乙酯等石油醚、苯、乙醚、三氯甲烷、乙酸乙酯等石油醚、苯、乙醚、三氯甲烷、乙酸乙酯等石油醚、苯、乙醚、三氯甲烷、乙酸乙酯等提取溶剂提取溶剂 性能特点性能特点 适宜提取成分适宜提取成分 提取方法提取方法强极性溶剂　　　 溶解范围广（酸水、碱水） 生物碱盐 穿透能力强 苷类 浸渍法 　　　 价廉易得、安全 鞣质 煎煮法　　　　　　　　　　　　　　　　 糖类 渗漉法 水 有些脂溶性成分溶解不完全 氨基酸 （酸水） 有些苷类成分的酶解 蛋白质 水提液易发霉、变质 水溶性杂质多，过滤困难 沸点高，浓缩困难 常用提取溶剂性能特点 提取溶剂提取溶剂 性能特点性能特点 适宜提取成分适宜提取成分 提取方法提取方法 除去多糖、 溶解范围广（不同浓度乙醇）蛋白质外 渗漉法（稀醇） 水溶性杂质溶出少 的大多数 浸渍法 乙醇 可抑制酶的活性 化学成分 回流法 提取液不易发霉、变质 均可 连续回流法 大部分可回收利用 但有挥发性、易燃烧 甲醇 溶解特点与乙醇相似，但有毒 丙酮 溶解性能同乙醇，但沸点低、易挥发，作为提取溶剂不常用； 但对色素溶解性能好，在分离、精制时常用。

亲水性有机溶剂（和水可任意混溶） 提取溶剂提取溶剂 性能特点性能特点 适宜提取成分适宜提取成分 提取方法提取方法　　　 对化合物溶解选择性较强;　　　　　水溶性杂质少、易纯化 ; 游离生物碱 回流法　　　　　挥发性大、易燃烧、有毒 ; 苷元 　 连续回流法　　　　　价格昂贵，对提取设备要求高; 某些苷类　　　　　穿透力较弱，提取时间长;　　　　　作为提取溶剂不常用　 如:乙醚 极易燃　　 氯仿 不易燃，毒性大,对生物碱溶解性好　　 苯 毒性大　　 石油醚 沸程 30~60℃、60~90℃、90~120℃ 脱脂、脱色常用 　　　 与甲醇、乙醇不能任意混溶亲脂亲脂性有性有机溶剂机溶剂【【提取方法与技术提取方法与技术】】（一）（一）浸渍法浸渍法[ [含含含含义义义义] ] 将将将将药药药药材材材材用用用用适适适适当当当当的的的的溶溶溶溶剂剂剂剂在在在在常常常常温温温温或或或或温温温温热热热热的的的的条条条条件下浸泡一定时间，浸出有效成分的一种方法。

件下浸泡一定时间，浸出有效成分的一种方法件下浸泡一定时间，浸出有效成分的一种方法件下浸泡一定时间，浸出有效成分的一种方法[操作技术操作技术] 冷浸法冷浸法 室温室温 温浸法温浸法 40~60℃[适适用用范范围围] 适适用用于于有有效效成成分分遇遇热热易易破破坏坏及及含含淀淀粉粉、、果胶、黏液质、树胶等多糖物质较多的天然药物果胶、黏液质、树胶等多糖物质较多的天然药物[特点特点] 方便、简单，时间长，效率低，易霉变方便、简单，时间长，效率低，易霉变[提示提示] 加防腐剂：甲苯、甲醛、三氯甲烷加防腐剂：甲苯、甲醛、三氯甲烷（二）渗漉法（二）渗漉法[ [含义含义含义含义] ][操作技术操作技术] 粉碎粉碎—浸润浸润—装筒装筒—排气排气—浸渍浸渍—渗漉渗漉—收集渗漉液收集渗漉液 将将将将药药药药材材材材粗粗粗粗粉粉粉粉置置置置渗渗渗渗漉漉漉漉装装装装置置置置中中中中，，，，连连连连续续续续添添添添加加加加溶溶溶溶剂剂剂剂使使使使渗渗渗渗过过过过药药药药粉粉粉粉，，，，自自自自上上上上而而而而下下下下流流流流动动动动，，，，浸浸浸浸出出出出有有有有效效效效成成成成分分分分的的的的一一一一种种种种动动动动态态态态浸提方法。

浸提方法浸提方法浸提方法[适用范围适用范围] 适用于提取遇热易破坏适用于提取遇热易破坏的的成成分[特点特点] 因能保持良好的浓度差，效率高因能保持良好的浓度差，效率高 溶剂消耗多，时间长溶剂消耗多，时间长 [提提示示] 常常温温进进行行，，溶溶剂剂为为水水、、酸酸液液、、碱碱液液及及不不同同浓浓度的乙醇度的乙醇（（三三））煎煮法煎煮法[ [含义含义含义含义] ] 将将将将药药药药材材材材加加加加水水水水加加加加热热热热煮煮煮煮沸沸沸沸，，，，滤滤滤滤过过过过去去去去渣渣渣渣后后后后取取取取煎煎煎煎煮煮煮煮液液液液的的的的一种传统提取方法一种传统提取方法一种传统提取方法一种传统提取方法[操作技术操作技术][适用范围适用范围] 适适适适应应应应于于于于有有有有效效效效成成成成分分分分能能能能溶溶溶溶于于于于水水水水且且且且不不不不易易易易被被被被水水水水、、、、热热热热破破破破坏坏坏坏的天然药物的提取的天然药物的提取的天然药物的提取的天然药物的提取。

l[特点特点] 操作简单、效率高操作简单、效率高l[提示提示] 不宜用于提取含挥发油成分、遇热易不宜用于提取含挥发油成分、遇热易 破坏、含糖类丰富的天然药物破坏、含糖类丰富的天然药物 使使使使用用用用低低低低沸沸沸沸点点点点的的的的溶溶溶溶剂剂剂剂如如如如乙乙乙乙醇醇醇醇、、、、氯氯氯氯仿仿仿仿等等等等加加加加热热热热提提提提取取取取天天天天然然然然药药药药物物物物中中中中有有有有效效效效成成成成分分分分时时时时，，，，为为为为减减减减少少少少溶溶溶溶剂剂剂剂的的的的挥挥挥挥发发发发损损损损失失失失，，，，保保保保持持持持药药药药材材材材与与与与溶溶溶溶剂剂剂剂持持持持久久久久地地地地接接接接触触触触，，，，通通通通过过过过加加加加热热热热浸浸浸浸出出出出液液液液，，，，使使使使溶溶溶溶剂剂剂剂受受受受热热热热蒸蒸蒸蒸发发发发，，，，经经经经冷冷冷冷凝凝凝凝后后后后变变变变为为为为液液液液体体体体流流流流回回回回浸浸浸浸出出出出器器器器，，，，如如如如此此此此反反反反复复复复至至至至浸浸浸浸出出出出完完完完全全全全的的的的一一一一种种种种热热热热提提提提取方法。

取方法四）（四） 回流提取法回流提取法[ [含义含义] ][适用范围适用范围] [操作技术操作技术] 适适适适用用用用于于于于脂脂脂脂溶溶溶溶性性性性较较较较强强强强成的分提取成的分提取成的分提取成的分提取l[特点特点] 效率高、溶剂消耗效率高、溶剂消耗大，操作较麻烦大，操作较麻烦l[提示提示] 不宜用于对热不稳不宜用于对热不稳定的成分的提取定的成分的提取（五）连续回流提取法（五）连续回流提取法 [含含义义] 能能能能用用用用少少少少量量量量溶溶溶溶剂剂剂剂进进进进行行行行连连连连续续续续循循循循环环环环回回回回流流流流提提提提取取取取，，，，充充充充分将有效成分浸出完全的方法分将有效成分浸出完全的方法分将有效成分浸出完全的方法分将有效成分浸出完全的方法[操作技术操作技术] 常用索氏提取器常用索氏提取器[适用范围适用范围] 适用于脂溶性成的分提取适用于脂溶性成的分提取适用于脂溶性成的分提取适用于脂溶性成的分提取 l[特点特点] 效率高、溶剂用量少，不适用于对热不效率高、溶剂用量少，不适用于对热不稳定的成分的提取。

稳定的成分的提取l[提示提示] 更换溶剂更换溶剂（六）超声提取法（六）超声提取法[ [含义含义含义含义] ] 是一种利用超声波浸提有效成分的方法是一种利用超声波浸提有效成分的方法是一种利用超声波浸提有效成分的方法是一种利用超声波浸提有效成分的方法[ [基本原理基本原理基本原理基本原理] ] 利利利利用用用用超超超超声声声声波波波波的的的的空空空空化化化化作作作作用用用用，，，，破破破破坏坏坏坏植植植植物物物物药药药药材材材材的的的的细细细细胞胞胞胞，，，，使使使使溶溶溶溶剂剂剂剂易易易易于于于于渗渗渗渗入入入入细细细细胞胞胞胞内内内内，，，，同同同同时时时时超超超超声声声声波波波波的的的的强强强强烈烈烈烈震震震震动动动动能能能能传传传传递递递递巨巨巨巨大大大大能能能能量量量量给给给给浸浸浸浸提提提提的的的的药药药药材材材材和和和和溶溶溶溶剂剂剂剂，，，，使使使使他他他他们们们们做做做做高高高高速速速速运运运运动动动动，，，，加加加加强强强强了了了了胞胞胞胞内内内内物物物物质质质质的的的的释释释释放放放放、、、、扩扩扩扩散散散散和和和和溶溶溶溶解解解解，，，，加加加加速速速速有有有有效效效效成成成成分分分分的的的的浸浸浸浸出出出出，，，，极极极极大大大大地提高提取效率。

地提高提取效率地提高提取效率地提高提取效率[操作技术操作技术][适用范围适用范围] 适适适适应应应应于于于于遇遇遇遇热热热热不不不不稳稳稳稳定定定定成成成成分分分分的的的的提提提提取取取取，，，，适适适适应应应应于于于于各各各各种溶剂的提取种溶剂的提取种溶剂的提取种溶剂的提取l[特点特点] 时间短、效率高、时间短、效率高、 无需加热无需加热 l[提示提示] 要求高l 【【知识链接知识链接】】l二、其他提取方法二、其他提取方法（一）水蒸气蒸馏法（一）水蒸气蒸馏法[ [ [ [含义含义含义含义] ] ] ] [ [ [ [基本原理基本原理基本原理基本原理] ] ] ] 水水水水蒸蒸蒸蒸气气气气蒸蒸蒸蒸馏馏馏馏法法法法是是是是利利利利用用用用某某某某些些些些挥挥挥挥发发发发成成成成分分分分与与与与水水水水或或或或水水水水蒸蒸蒸蒸气气气气共共共共同同同同加加加加热热热热，，，，能能能能随随随随水水水水蒸蒸蒸蒸气气气气一一一一并并并并蒸蒸蒸蒸馏馏馏馏出出出出，，，，经经经经冷冷冷冷凝凝凝凝后后后后分分分分取取取取获获获获得得得得的的的的性质，性质，性质，性质， 从天然药物中提出的方法。

从天然药物中提出的方法从天然药物中提出的方法从天然药物中提出的方法 是是是是当当当当水水水水和和和和与与与与水水水水不不不不相相相相溶溶溶溶的的的的液液液液体体体体成成成成分分分分共共共共存存存存时时时时，，，，根根根根据据据据道道道道尔尔尔尔顿顿顿顿分分分分压压压压定定定定律律律律，，，，整整整整个个个个体体体体系系系系的的的的总总总总蒸蒸蒸蒸气气气气压压压压等等等等于于于于两两两两个个个个组组组组分分分分蒸蒸蒸蒸气气气气压压压压之之之之和和和和当当当当总总总总蒸蒸蒸蒸气气气气压压压压等等等等于于于于外外外外界界界界大大大大气气气气压压压压时时时时，，，，混混混混合合合合物物物物开开开开始始始始沸沸沸沸腾腾腾腾并被蒸馏出来并被蒸馏出来并被蒸馏出来并被蒸馏出来 P P总总总总=P=PA A+P+PB B[操作技术操作技术][适适用用范范围围] 适适适适用用用用于于于于提提提提取取取取具具具具有有有有挥挥挥挥发发发发性性性性，，，，能能能能随随随随水水水水蒸蒸蒸蒸气气气气蒸蒸蒸蒸馏馏馏馏出出出出而而而而不不不不被被被被破破破破坏坏坏坏，，，，不不不不溶溶溶溶或或或或难难难难溶溶溶溶于于于于水水水水，，，，与与与与水水水水不不不不发发发发生生生生化化化化学学学学反反反反应的天然药物化学成分。

应的天然药物化学成分应的天然药物化学成分应的天然药物化学成分 l[特点特点] 简单、方便、实用，宜推广简单、方便、实用，宜推广l[提示提示] 保温、与大气压相通后，关热源保温、与大气压相通后，关热源l 可再蒸馏可再蒸馏（二）升华法（二）升华法[含含义义] 是是利利用用某某些些固固体体物物质质具具有有在在低低于于其其熔熔点点的的温温度度下下受受热热后后，，不不经经熔熔融融就就直直接接转转化化为为蒸蒸气气，，遇遇冷冷后后又又凝凝固固为为原原来来的的固固体体的的性性质质，，使使之之从从天天然药物中提出的方法然药物中提出的方法[操作操作技术技术][适用范围适用范围] 适用于具有升华性成分的提取适用于具有升华性成分的提取l[特点特点] 时间长、损失大，易炭化、分解时间长、损失大，易炭化、分解l[提示提示] 水浴、油浴加热水浴、油浴加热 （三）超临界流体萃取技术（三）超临界流体萃取技术 超临界流体萃取（超临界流体萃取（Supercritical Fluid Extraction, SFE）是一种利用某物质在超临界区域形成流体，对天然）是一种利用某物质在超临界区域形成流体，对天然药物中有效成分进行萃取分离的新型技术，集提取和分药物中有效成分进行萃取分离的新型技术，集提取和分离于一体。

离于一体超临界流体超临界流体：某物质处于临界温度（：某物质处于临界温度（Tc）和临界压力）和临界压力(Pc)以上时，形成一种既非液体又非气体的特殊相态以上时，形成一种既非液体又非气体的特殊相态常用的超临界流体物质常用的超临界流体物质：二氧化碳、氧化亚氮、乙烷、：二氧化碳、氧化亚氮、乙烷、乙烯和甲苯等乙烯和甲苯等1、概念、概念气体、超临界流体和液体的物理性质超临界流体和液体的物理性质性质性质气体气体超临界流体超临界流体液体液体密度（密度（g/ml））10-30.2~0.91.0黏度（黏度（g/ ㎝㎝. s））10-410-4~ 10-310-2扩散系数扩散系数（（cm2/s））10-110-4~ 10-3<10-5【【超临界流体特性超临界流体特性】】具有液体和气体的双重特性，具有液体和气体的双重特性，具有液体和气体的双重特性，具有液体和气体的双重特性，如：密度与液体近似如：密度与液体近似如：密度与液体近似如：密度与液体近似 ，黏度与气体近似，扩散力和渗，黏度与气体近似，扩散力和渗，黏度与气体近似，扩散力和渗，黏度与气体近似，扩散力和渗透能均大大强于液体（透能均大大强于液体（透能均大大强于液体（透能均大大强于液体（扩散速度比液体快约两个数量扩散速度比液体快约两个数量扩散速度比液体快约两个数量扩散速度比液体快约两个数量级），级），级），级），对很多物质有很强的溶解能力。

对很多物质有很强的溶解能力对很多物质有很强的溶解能力对很多物质有很强的溶解能力 2、基本原理、基本原理 SF的溶解度直接与其密度相的溶解度直接与其密度相关，通过改变萃取压力和温度很容易改变关，通过改变萃取压力和温度很容易改变SF的溶解能力的溶解能力3、操作技术、操作技术 4、适用范围、适用范围 适用于提取分离挥发油、脂溶适用于提取分离挥发油、脂溶性、高热敏性及易氧化分解成分性、高热敏性及易氧化分解成分[超临界流体超临界流体] 最常见的是二氧化碳，其临界温最常见的是二氧化碳，其临界温度为度为(Tc =31.4℃)，临界压力为，临界压力为(Pc= 7.37 MPa) 第二节第二节 分离精制和鉴定的方法与技术分离精制和鉴定的方法与技术[浓缩方法浓缩方法] 蒸发蒸发 水提取液水提取液薄膜蒸发薄膜蒸发 水、稀醇提取液水、稀醇提取液 蒸发器、冷凝管、真空泵蒸发器、冷凝管、真空泵蒸馏蒸馏 常压蒸馏：低沸点有机溶剂提取液的浓缩回收常压蒸馏：低沸点有机溶剂提取液的浓缩回收 减压蒸馏：高沸点有机溶剂及有效成分遇热不减压蒸馏：高沸点有机溶剂及有效成分遇热不 稳定的提取液的浓缩回收稳定的提取液的浓缩回收 旋转蒸发仪旋转蒸发仪反渗透法、超滤法反渗透法、超滤法 一、系统溶剂分离法一、系统溶剂分离法[含义含义] 按按极极性性由由小小到到大大的的顺顺序序选选用用不不同同极极性性的的溶溶剂剂组组成成溶溶剂剂系系统统，，依依次次提提取取分分离离提提取取液液中中各各种种不不同同的的成成分分，，使使各各溶解度有差异的成分得到分离。

溶解度有差异的成分得到分离[操作技术操作技术][适适用用范范围围] 适适用用于于有有效效成成分分尚尚未未明明确确的的天天然然药药物物提提取液的分离取液的分离l【特点】 操作繁琐l【提示】 研究不明成分的方法 溶剂系统溶剂系统提取分离成分提取分离成分石油醚、石油醚、己烷己烷强亲脂性成分如挥发油、脂肪油、蜡、脂溶性色素、甾强亲脂性成分如挥发油、脂肪油、蜡、脂溶性色素、甾醇类和某些苷元醇类和某些苷元乙醚、氯仿乙醚、氯仿 亲脂性成分如树脂、生物碱、苷元、醛、酮、醇、醌、亲脂性成分如树脂、生物碱、苷元、醛、酮、醇、醌、有机酸和某些苷类有机酸和某些苷类氯仿氯仿:乙醇乙醇（（2:1））中等极性成分中较小极性的某些苷类如强心苷等中等极性成分中较小极性的某些苷类如强心苷等乙酸乙酯乙酸乙酯正丁醇正丁醇中等极性成分中极性居中的某些苷类如黄酮苷类等中等极性成分中极性居中的某些苷类如黄酮苷类等中等极性成分中极性较大的某些苷类如皂苷、蒽醌苷类中等极性成分中极性较大的某些苷类如皂苷、蒽醌苷类丙酮、乙醇、丙酮、乙醇、甲醇甲醇亲水性成分如极性很大的苷类、糖类、氨基酸、某些生亲水性成分如极性很大的苷类、糖类、氨基酸、某些生物碱盐类等物碱盐类等水水强亲水性成分如蛋白质、粘液质、果胶、糖类、氨基酸强亲水性成分如蛋白质、粘液质、果胶、糖类、氨基酸和无机盐等和无机盐等【【知识链接知识链接】】 溶剂系统及其提取分离成分溶剂系统及其提取分离成分l1、概念、概念 l 是指往提取液中加入一种与其互不相溶的溶是指往提取液中加入一种与其互不相溶的溶剂配成两相溶剂系统，利用混合物中各种成分分剂配成两相溶剂系统，利用混合物中各种成分分配系数的差异而将所需成分萃取出来的分离方法。

配系数的差异而将所需成分萃取出来的分离方法l2、基本原理、基本原理l 利用混合物中各种成分在两相不相溶的溶剂利用混合物中各种成分在两相不相溶的溶剂分配系数的差异而达到分离的目的分配系数的差异而达到分离的目的二、两相溶剂萃取法二、两相溶剂萃取法[分配系数分配系数] K=Cu/CL[分离因子分离因子] 两种溶质在同一溶剂系统中分配系数的比值两种溶质在同一溶剂系统中分配系数的比值 β=KA/KB (注注KA>KB)3、萃取溶剂的选择、萃取溶剂的选择①①从水提液中萃取亲脂性成分：从水提液中萃取亲脂性成分： 一般选用苯、三氯甲烷或乙醚一般选用苯、三氯甲烷或乙醚②②萃取偏亲水性成分：需用乙酸乙酯、丁醇等萃取偏亲水性成分：需用乙酸乙酯、丁醇等③③对于碱性、酸性、两性成分的萃取分离：对于碱性、酸性、两性成分的萃取分离： 常用常用PHPH梯度萃取法梯度萃取法 即利用混合物中各成分的酸（或碱）性强弱不同，即利用混合物中各成分的酸（或碱）性强弱不同，相应改变溶剂相应改变溶剂PHPH值使之相继成盐或游离，改变成分在溶剂值使之相继成盐或游离，改变成分在溶剂系统中的分配系数而与其他成分分离的一种方法。

系统中的分配系数而与其他成分分离的一种方法（一）简单萃取法（一）简单萃取法[提示提示]1、水体液的浓度最好在相对密度、水体液的浓度最好在相对密度1.1-1.2之间2、选用的萃取溶剂第一次用量一般为水提液的、选用的萃取溶剂第一次用量一般为水提液的1/2-1/3，， 以后的用量可适当减少为水提液的以后的用量可适当减少为水提液的1/4-1/63、一般萃取、一般萃取3-4次即可4、若用氯仿萃取，易产生乳化现象若用氯仿萃取，易产生乳化现象5、形成乳化，破乳形成乳化，破乳适用范围适用范围】】分配系数差异较大的成分的分离分配系数差异较大的成分的分离（二）逆流连续萃取法（二）逆流连续萃取法[含义含义] 利用两相互不相溶的溶剂相对密度的不同，使相利用两相互不相溶的溶剂相对密度的不同，使相对密度小的相液作为移动相（或分散相），逆流连续对密度小的相液作为移动相（或分散相），逆流连续穿过相对密度大的作为固定相（或连续相）的相液，穿过相对密度大的作为固定相（或连续相）的相液，借以交换溶质而达到分离的一种连续萃取技术借以交换溶质而达到分离的一种连续萃取技术适用范围适用范围】】 适用于各种密度的萃取溶剂适用于各种密度的萃取溶剂（三）逆流分溶法（三）逆流分溶法（四）液滴逆流分配法（四）液滴逆流分配法【【适用范围适用范围】】 适适用用于于分分离离中中等等极极性性、、分分离离因因子子较较小小及及不不稳稳定定的物质。

的物质适用范围适用范围】】 适用于皂苷类化学成分的分离适用于皂苷类化学成分的分离[破坏乳化现象的方法破坏乳化现象的方法]①①放置较长时间放置较长时间⑧⑧其他破坏乳化的物质如乙醇、黄化蓖麻油等其他破坏乳化的物质如乙醇、黄化蓖麻油等②②搅动搅动③③乳化层抽滤乳化层抽滤④④将乳化层加热或冷冻将乳化层加热或冷冻⑤⑤分出乳化层，再用新溶剂萃取分出乳化层，再用新溶剂萃取⑥⑥加入少量电解质（如氯化钠）加入少量电解质（如氯化钠）⑦⑦滴加数滴醇类如戊醇改变表面张力，破坏乳状液滴加数滴醇类如戊醇改变表面张力，破坏乳状液三、沉淀法三、沉淀法[含义含义] 是指在天然药物的提取液中加入某些试剂，使产生沉是指在天然药物的提取液中加入某些试剂，使产生沉淀或降低溶解性而从溶液中析出，从而获得有效成分或去淀或降低溶解性而从溶液中析出，从而获得有效成分或去除杂质的方法除杂质的方法[分类分类]（一）酸碱沉淀法（一）酸碱沉淀法 是是利利用用某某些些成成分分能能在在酸酸（（或或碱碱））中中溶溶解解，，继继而而又又在在碱（或酸）中生成沉淀的性质达到分离的办法碱（或酸）中生成沉淀的性质达到分离的办法。

l1、操作技术、操作技术l2、适用范围、适用范围 l 酸性、碱性或两性化合物的分离酸性、碱性或两性化合物的分离l3、特点、特点 沉淀反应可逆沉淀反应可逆l4、提示、提示 分离生物碱、分离生物碱、l 内酯结构化合物内酯结构化合物 l 具酸性的化合物具酸性的化合物 （二）试剂沉淀法（二）试剂沉淀法[含义含义] 利用一些成分能与某些试剂产生沉淀的性质，或利用利用一些成分能与某些试剂产生沉淀的性质，或利用某些成分在不同溶剂中溶解度的差异，通过加入特定试剂某些成分在不同溶剂中溶解度的差异，通过加入特定试剂或溶液，使生成沉淀，与其他成分分离或溶液，使生成沉淀，与其他成分分离l1、操作技术、操作技术l2、适用范围、适用范围 l 适用于能与某些试剂产生沉淀或在不同溶适用于能与某些试剂产生沉淀或在不同溶剂中溶解度有差异的化学成分的分离剂中溶解度有差异的化学成分的分离l3、特点、特点 沉淀反应可逆或不可逆沉淀反应可逆或不可逆四、结晶与重结晶法四、结晶与重结晶法[含义含义] 利用混合物中各成分在溶剂中溶解度的差别，使所需利用混合物中各成分在溶剂中溶解度的差别，使所需成分以结晶状态析出，达到分离精制的目的分离方法。

成分以结晶状态析出，达到分离精制的目的分离方法[结晶结晶] 将物质由非结晶状通过处理得到结晶状物的过程将物质由非结晶状通过处理得到结晶状物的过程[重结晶重结晶] 将粗结晶用适当的溶剂处理纯化为较纯的结晶将粗结晶用适当的溶剂处理纯化为较纯的结晶状物质1、结晶溶剂的选择、结晶溶剂的选择选择合适的溶剂是结晶法的关键选择合适的溶剂是结晶法的关键[溶剂具备条件溶剂具备条件]1）不与结晶物质发生化学物质）不与结晶物质发生化学物质2）对结晶物质的溶解度随温度不同有显著差异）对结晶物质的溶解度随温度不同有显著差异 热时溶解度大，冷时溶解度小热时溶解度大，冷时溶解度小3）对杂质溶解度非常大或非常小）对杂质溶解度非常大或非常小4）沸点适中）沸点适中5）能给出较好的结晶）能给出较好的结晶 结结晶晶法法常常用用的的溶溶剂剂有有水水、、冰冰醋醋酸酸、、甲甲醇醇、、乙乙醇醇、、丙丙酮、醋酸乙酯、氯仿等酮、醋酸乙酯、氯仿等 当当不不能能选选择择一一种种合合适适的的试试剂剂时时，，通通常常选选用用两两种种以以上上溶剂组成的混合溶剂溶剂组成的混合溶剂 以以两两种种能能以以任任意意比比例例互互溶溶的的溶溶剂剂组组成成，，要要求求低低沸沸点点溶溶剂剂对对被被提提纯纯物物质质的的溶溶解解度度大大，，而而高高沸沸点点溶溶剂剂对对被被提提纯纯物的溶解度小。

物的溶解度小3、结晶的条件、结晶的条件Ø杂质的去除杂质的去除Ø有效成分的含量有效成分的含量Ø溶液的浓度溶液的浓度Ø合适的温度、时间合适的温度、时间3、结晶纯度的判断、结晶纯度的判断1）晶形和色泽）晶形和色泽2）熔点和熔距）熔点和熔距3）纸色谱或薄层色谱技术）纸色谱或薄层色谱技术4）高效薄层色谱、气相色谱、高效液相色谱）高效薄层色谱、气相色谱、高效液相色谱4、操作技术、操作技术1）制备结晶溶液制备结晶溶液2）趁热过滤，除去不溶性杂质趁热过滤，除去不溶性杂质3）将滤液放冷，使析出结晶将滤液放冷，使析出结晶4）抽气滤过，将结晶从母液中分出抽气滤过，将结晶从母液中分出5）重结晶）重结晶6）晶体的干燥）晶体的干燥 红外灯烘干红外灯烘干 真空恒温干燥器干燥真空恒温干燥器干燥l5、适用范围、适用范围 l 适用于分离纯化固体化学成分适用于分离纯化固体化学成分l6、特点、特点l 分离纯化固体成分的重要方法之一分离纯化固体成分的重要方法之一l7、提示、提示 选择合适的溶剂选择合适的溶剂l 注意结晶条件注意结晶条件 五、透析法五、透析法[含义含义] 利利用用提提取取液液中中小小分分子子物物质质可可通通过过透透析析膜膜，，而而大大分分子子物物质质不不能能通通过过透透析析膜膜的的性性质质使使分分子子量量差差异异较较大大的的物质达到分离的方法。

物质达到分离的方法l1、操作技术、操作技术l2、适用范围、适用范围 l 适用于分离纯化天然药物化学成分中的大分子物质适用于分离纯化天然药物化学成分中的大分子物质l3、特点、特点l 操作简单、分离较完全操作简单、分离较完全l4、提示、提示 关键是膜孔的选择关键是膜孔的选择六、分馏法六、分馏法[含义含义] 利利用用各各沸沸点点不不同同的的化化合合物物组组成成混混合合物物，，在在分分馏馏过过程程中中产产生生高高低低不不同同的的蒸蒸气气压压，，从从而而收收集集到到不不同沸点温度的馏分，达到分离的目的的方法同沸点温度的馏分，达到分离的目的的方法l1、操作技术、操作技术l2、适用范围、适用范围 l 适用于分离纯化天然药物中沸点相差较小的适用于分离纯化天然药物中沸点相差较小的液体混合物液体混合物l3、特点、特点l 操作简单、加热可破坏某些成分操作简单、加热可破坏某些成分l4、提示、提示 保持柱内适当的温度梯度，严保持柱内适当的温度梯度，严格控制热源的温度格控制热源的温度 七、色谱法七、色谱法[基本原理基本原理] 利利用用混混合合物物中中各各成成分分在在固固定定相相和和移移动动相相中中吸吸附附、、分分配配及及其其亲和力的差异而达到分离。

亲和力的差异而达到分离[分类分类]Ø按固定相和支持剂种类按固定相和支持剂种类:氧化铝色谱、硅胶色谱、氧化铝色谱、硅胶色谱、Ø 聚酰胺色谱、凝胶色谱等聚酰胺色谱、凝胶色谱等Ø按移动相种类：按移动相种类：气相色谱、液相色谱气相色谱、液相色谱Ø按操作方式：按操作方式：柱色谱、纸色谱和薄层色谱柱色谱、纸色谱和薄层色谱Ø按色谱原理：按色谱原理：吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、Ø 凝胶色谱等凝胶色谱等表表表表2-3 2-3 被分离化合物与相应选择的色谱方法被分离化合物与相应选择的色谱方法被分离化合物与相应选择的色谱方法被分离化合物与相应选择的色谱方法被分离化合物被分离化合物可选用色谱可选用色谱 一般生物碱一般生物碱硅胶、氧化铝色谱硅胶、氧化铝色谱生物碱类生物碱类 极性较大的生物碱极性较大的生物碱分配色谱分配色谱 季铵型水溶性生物碱季铵型水溶性生物碱分配色谱、离子交换色谱分配色谱、离子交换色谱皂苷类、强心苷类皂苷类、强心苷类分配色谱、硅胶吸附色谱分配色谱、硅胶吸附色谱挥发油、甾体、萜类挥发油、甾体、萜类硅胶、氧化铝色谱硅胶、氧化铝色谱黄酮类、鞣质黄酮类、鞣质聚酰胺吸附色谱聚酰胺吸附色谱有机酸、氨基酸有机酸、氨基酸离子交换色谱、分配色谱、活性炭离子交换色谱、分配色谱、活性炭吸附色谱吸附色谱蛋白质、多肽、多糖类蛋白质、多肽、多糖类凝胶滤过色谱凝胶滤过色谱1、吸附柱色谱法、吸附柱色谱法 利利用用作作为为固固定定相相的的吸吸附附剂剂对对混混合合物物中中各各成成分分吸吸附附能能力力的大小不同，使各成分得到相互分离的方法。

的大小不同，使各成分得到相互分离的方法1）基本原理：）基本原理： 相似者易于吸附相似者易于吸附（（2）吸附剂：）吸附剂： ①①硅胶：是一种微呈酸性的多孔性物质常用硅胶：是一种微呈酸性的多孔性物质常用SiOSiO2 2··xHxH2 2O O表示能与许多化合物形成氢键而产生吸附作用能与许多化合物形成氢键而产生吸附作用 适用于分离中性或酸性亲脂性成分的分离适用于分离中性或酸性亲脂性成分的分离一）柱色谱法（一）柱色谱法（一）柱色谱法（一）柱色谱法②②氧化铝：是一种吸附性很强的亲水性吸附剂，有酸性、氧化铝：是一种吸附性很强的亲水性吸附剂，有酸性、碱性、中性三种规格碱性、中性三种规格 适用于分离碱性或中性的亲脂性成分适用于分离碱性或中性的亲脂性成分③③聚酰胺：聚酰胺：是由酰胺聚合而成的一类高分子化合物是由酰胺聚合而成的一类高分子化合物[基本原理基本原理] 聚聚酰酰胺胺分分子子内内存存在在的的许许多多酰酰胺胺基基能能与与酚酚类类的的羟羟基基、、酸类的羧基及醌类的醌基形成氢键而产生吸附酸类的羧基及醌类的醌基形成氢键而产生吸附。

图图图图2-14 2-14 聚酰胺吸附聚酰胺吸附聚酰胺吸附聚酰胺吸附色谱的原理色谱的原理色谱的原理色谱的原理固定相固定相移动相移动相 聚酰胺聚酰胺对化合物吸附里的强弱取决于形成氢键的能对化合物吸附里的强弱取决于形成氢键的能力，影响形成氢键能力的因素：力，影响形成氢键能力的因素： Ⅰ Ⅰ 溶剂的种类：溶剂的种类：聚酰胺形成氢键的能力在水中最强，聚酰胺形成氢键的能力在水中最强，在有机溶剂中较弱，在碱性溶剂中最弱在有机溶剂中较弱，在碱性溶剂中最弱 常用溶剂的洗脱能力顺序：常用溶剂的洗脱能力顺序： 水水< <甲醇或乙醇甲醇或乙醇< <丙酮丙酮< <稀氢氧化钠或稀氨溶液稀氢氧化钠或稀氨溶液< <甲酰甲酰胺或二甲基甲酰胺胺或二甲基甲酰胺< <尿素水溶液尿素水溶液 Ⅱ Ⅱ 化合物分子结构：化合物分子结构： A A 化合物分子能形成氢键的基团数目越多，被聚酰化合物分子能形成氢键的基团数目越多，被聚酰胺吸附越强胺吸附越强 B B 成键基团所处的位置不同，被吸附的强弱也不同成键基团所处的位置不同，被吸附的强弱也不同。

C C 分子中芳香核、共轭双键多者被吸附强度大，少分子中芳香核、共轭双键多者被吸附强度大，少者则被吸附强度小者则被吸附强度小 D D 能形成分子内氢键者被吸附强度减小能形成分子内氢键者被吸附强度减小 适用于化合物的制备性分离、除鞣质适用于化合物的制备性分离、除鞣质 ④ ④ 活性炭：是一种非极性吸附剂活性炭：是一种非极性吸附剂 影响吸附能力的因素：影响吸附能力的因素： A A 在水溶液中吸附力最强，在有机溶剂中较弱在水溶液中吸附力最强，在有机溶剂中较弱 B B 对极性基团多的化合物的吸附力大于极性基团对极性基团多的化合物的吸附力大于极性基团少的化合物少的化合物 C C 对芳香族化合物的吸附力大于脂肪族化合物对芳香族化合物的吸附力大于脂肪族化合物 D D 对分子量大的化合物的吸附力大于分子量小的对分子量大的化合物的吸附力大于分子量小的化合物 适用于分离亲水性成分（大量制备性分离）适用于分离亲水性成分（大量制备性分离） 3 3、、移动相移动相 4 4、、被分离物质被分离物质 RHRH（烷烃（烷烃< <烯烃烯烃< <芳烃）芳烃）

活度较高的吸附剂，而移动相的极性较小 常见官能团极性大小顺序：常见官能团极性大小顺序：l1）选择色谱柱）选择色谱柱l内径与柱长之比内径与柱长之比 l 1︰︰15~1︰︰ 20l2）装柱）装柱 吸附剂粒度吸附剂粒度l 均匀均匀 100目目 用量用量 试样试样︰︰ 吸附剂吸附剂 1︰︰30 ~1︰︰60l 1︰︰100~1︰︰200（（（（5）操作技术）操作技术柱柱色色谱谱装装置置【装柱】l干法干法l湿法湿法3）上样l湿法上样湿法上样：易溶性的试样用洗脱剂溶解加样：易溶性的试样用洗脱剂溶解加样l干法上样干法上样：难溶性的试样加低沸点的极性有机：难溶性的试样加低沸点的极性有机溶剂再与吸附剂拌匀，挥干溶剂加样溶剂再与吸附剂拌匀，挥干溶剂加样4）洗脱l 梯度洗脱，等份收集梯度洗脱，等份收集l（（6）特点）特点l（（7）适用范围）适用范围l（（8）提示）提示l 聚酰胺吸附剂与试样用量聚酰胺吸附剂与试样用量l 1︰︰10 ~1︰︰20 l 洗脱剂为含水溶剂系统：以水装柱，用水、乙洗脱剂为含水溶剂系统：以水装柱，用水、乙醇（从低到高）依次洗脱醇（从低到高）依次洗脱l洗脱剂为非极性溶剂系统：以系统中极性较低洗脱剂为非极性溶剂系统：以系统中极性较低的溶剂装柱。

的溶剂装柱2、分配色谱法、分配色谱法 利利用用混混合合物物中中各各成成分分在在互互不不相相溶溶的的两两相相溶溶剂剂中中分分配配系系数的不同，来达到分离的色谱分离方法数的不同，来达到分离的色谱分离方法1）基本原理）基本原理 分配系数的不同，达到分离分配系数的不同，达到分离分类分类正相分配色谱正相分配色谱反相分配色谱反相分配色谱固定相固定相极性大的溶剂极性大的溶剂极性小的溶剂极性小的溶剂移动相移动相极性小的溶剂极性小的溶剂极性大的溶剂极性大的溶剂适用范围适用范围分离极性较大的成分分离极性较大的成分分离极性小的成分分离极性小的成分 （（2）支持剂）支持剂 硅胶、硅藻土、纤维素粉、滤纸硅胶、硅藻土、纤维素粉、滤纸 反相分配色谱：反相分配色谱：-C18H37 ，， -C8H17 ，， -C2H5键合硅胶键合硅胶正相分配色谱：硅胶表面键合氨基或腈基正相分配色谱：硅胶表面键合氨基或腈基（（3）） 溶剂系统溶剂系统 复合两相溶剂系统复合两相溶剂系统 ；； 纸色谱摸索；纸色谱摸索； （（4）） 被分离物质被分离物质 正相分配色谱正相分配色谱 极性较小的成分移动速度快；极性较小的成分移动速度快； 反反相分配色谱相分配色谱 极性较大的成分移动速度快；极性较大的成分移动速度快；l （（5）操作方式）操作方式l 装吸着固定相的支持剂装入柱内；装吸着固定相的支持剂装入柱内；l 用适量固定相溶解试样；用适量固定相溶解试样；l 固定相饱和后的移动相洗脱；固定相饱和后的移动相洗脱；l1））装柱装柱 固定相与支持剂用量固定相与支持剂用量0.5︰︰1~1︰︰1l2））加样加样 支持剂用量为试样量的支持剂用量为试样量的100~1000倍倍l3））洗脱洗脱l （（8）提示）提示 必须固定相与移动相预饱和必须固定相与移动相预饱和l 温度恒定温度恒定l 合理控制上样量合理控制上样量 3.离子交换柱色谱法离子交换柱色谱法 [含含义义] 是是利利用用离离子子交交换换树树脂脂上上的的功功能能基基在在水水溶溶液液中中与与溶溶液液的的其其他他离离子子进进行行可可逆逆性性交交换换的的性性质质，，以以离离子子交交换换树树脂脂作作为为固固定定相相，，使使混混合合成成分分中中离离子子型型与与非非离离子子型型物物质质或或具具有有不不同同解离度的离子化合物得到分离的一种色谱法。

解离度的离子化合物得到分离的一种色谱法1）基本原理）基本原理阳离子交换树脂阳离子交换树脂阴离子交换树脂阴离子交换树脂 （（2）离子交换树脂的选择）离子交换树脂的选择 电荷种类、解离能力、分子大小与数量电荷种类、解离能力、分子大小与数量 交换容量、颗粒大小交换容量、颗粒大小（（3）操作方式：）操作方式： 1）树脂的预处理）树脂的预处理阳离子交换树脂：阳离子交换树脂： 按酸按酸-碱碱-酸的步骤酸的步骤 阴离子交换树脂：阴离子交换树脂： 按碱按碱-酸酸-碱的步骤碱的步骤 （（4）特点）特点 （（5）适用范围）适用范围 具有解离能力的化合物具有解离能力的化合物 （（6）提示）提示 试样用量试样用量 交换容量决定交换容量决定 2）装柱）装柱 3）上样）上样 4）洗脱）洗脱 5）再生）再生4、凝胶滤过柱色谱法、凝胶滤过柱色谱法[含义含义] 是以凝胶为固定相，选择适当的溶剂进行洗脱，是以凝胶为固定相，选择适当的溶剂进行洗脱，使混合物中分子量大小不同的化合物得到分离的方法使混合物中分子量大小不同的化合物得到分离的方法。

（（ 1））基本原理基本原理代表凝胶颗粒 代表大分子物质 代表小分子物质 代表凝胶颗粒 代表大分子物质 代表小分子物质  （（ 2））凝胶的种类及性能凝胶的种类及性能 1）葡聚糖凝胶）葡聚糖凝胶 2）葡聚糖凝胶）葡聚糖凝胶LH-20 3）聚丙烯酰胺凝胶）聚丙烯酰胺凝胶4）琼脂糖凝胶）琼脂糖凝胶 （（ 3））操作方式操作方式 1）凝胶的选择）凝胶的选择 2）浸泡溶胀）浸泡溶胀 3）） 装柱装柱4）加样）加样 5）洗脱）洗脱 6）再生）再生（（4））特点特点（（5））适用范围适用范围 大小分子化合物的分离大小分子化合物的分离（（6））提示提示 大孔吸附色谱法大孔吸附色谱法 不含交换基团，具有大孔结构的有机高聚物吸附剂不含交换基团，具有大孔结构的有机高聚物吸附剂 1、、基本原理基本原理 吸附性能及分子筛作用吸附性能及分子筛作用 2、、影响分离的因素影响分离的因素 （（1）树脂本身的化学结构）树脂本身的化学结构 （（2）被分离成分的性质）被分离成分的性质 （（3）溶剂的影响）溶剂的影响 （二）薄层色谱法（二）薄层色谱法 具体操作：具体操作： 制板、活化：制板、活化： 点样：点样： 展开：展开：上行、下行、近水平、环形、单向二次、双向二次上行、下行、近水平、环形、单向二次、双向二次 显色：显色：紫外线照射法、喷雾显色法、碘蒸气紫外线照射法、喷雾显色法、碘蒸气显色法显色法 测定比移值。

测定比移值R Rf f值值= =原点至色谱斑点中心的原点至色谱斑点中心的距离距离/ /原点至溶剂前沿的距离原点至溶剂前沿的距离 （三）纸色谱法（三）纸色谱法 是是以以滤滤纸纸为为支支持持剂剂 ，，滤滤纸纸上上吸吸着着的的水水为为固固定定相相，，用用一一定定的的溶溶剂剂系系统统为为移移动动相相进进行行展展开开，，而而使使试试样样中中各各组分达到分离的一种分配色谱法组分达到分离的一种分配色谱法 具体操作：点样、展开、显色、计算比移值具体操作：点样、展开、显色、计算比移值 （四）高效液相色谱法（四）高效液相色谱法高效液相色谱法（高效液相色谱法（HPLC）又称高压液相色谱、高速液相色谱法）又称高压液相色谱、高速液相色谱法（（1）基本原理）基本原理 根据被分离物质中各组分在固定相及流动相中的吸附能力、根据被分离物质中各组分在固定相及流动相中的吸附能力、分配系数、离子交换作用或分子量大小的差异而获得分离分配系数、离子交换作用或分子量大小的差异而获得分离2）操作技术）操作技术（（3）特点：高压、高速、高分离效能、高灵敏度、操作自动化、）特点：高压、高速、高分离效能、高灵敏度、操作自动化、检测范围广。

检测范围广4）适用范围）适用范围 广泛广泛（（5）提示）提示 色谱纯度色谱纯度（五）气相色谱法（五）气相色谱法气相色谱法是一种以气体作为流动相的色谱分离方法气相色谱法是一种以气体作为流动相的色谱分离方法1）基本原理）基本原理 利用混合物中各组分在气体与固定相之间吸附能力的利用混合物中各组分在气体与固定相之间吸附能力的不同或分配系数的差异而获得分离不同或分配系数的差异而获得分离2）操作技术）操作技术（（3）特点：效率高、分析速度快、试样用量少、选择性好、）特点：效率高、分析速度快、试样用量少、选择性好、应用范围广应用范围广（（4）适用范围）适用范围 适用于具有沸点低、易挥发特性的挥发油成适用于具有沸点低、易挥发特性的挥发油成分的分离、鉴定和定量分析分的分离、鉴定和定量分析5）提示）提示 色谱纯度色谱纯度。