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    毕业论文范文(定稿)16700字    本 科 生 毕 业 论 文（设计）一株好氧脱氮菌的筛选鉴定及其题目： 特性研究作 者 姓 名：专 业 班 级：刘辉塔 生物工程2005级02班郑永良 讲师指 导 教 师：黄冈师范学院生命科学与工程学院二00九年五月郑 重 声 明本人的毕业论文（设计）是在指导老师 郑永良（讲师）的指导下独立撰写并完成的毕业论文（设计）没有剽窃、抄袭、造假等违反学术道德、学术规范和侵权行为，本人愿意承担由此产生的各种后果；直至法律责任，并可以通过网络接受公众的查询特此声明毕业论文作者（签名）：年 月 日目 录中文摘要 …………………………………………………………………………………..1 英文摘要（Abstract） …………………………………………………………………….21选题背景 ………………………………………………………………………………...31.1 生物脱氮研究意义…………………………………………………………………….31.2 生物脱氮研究新进展………………………………………………………………….31.3与脱氮有关的微生物…………………………………………………………………..41.4 我国一些学者对于脱氮菌的研究...…………………………………………….…….5 2 方案论证…………………………………………………………………………………62.1生物脱氮作用机制……………………………………………………………………..62.2好氧反硝化细菌的筛选方法…………………………………………………………..62.2.1选择性培养基………………………………………………………………………...62.2.2 间歇曝气驯化法……………………………………………………………………..72.2.3 间歇曝气驯化与选择性培养基联合法……………………………………………..72.2.4 梯度富集培养法……………………………………………………………………..72.3 生物脱氮能力测定方法……………………………………………………………….82.3.1 酚二磺酸法………………………………………………………………………......82.3.2浓硫酸-水杨酸比色法测定…………………………………………………………..82.3.3 Brucine法……………………………………………………………………………..8 3过程论述………………………………………………………………………………….83.1 好氧反硝化细菌的筛选与分离……………………………………………………….83.1.1实验材料….…………………………………………………………………………..83.1.2实验仪器……………………………………………………………………………...93.2 实验过程……………………………………………………………………………….93.2.1主体结构的设计……………………………………………………………………...93.2.2生物量的测定………………………………………………………………………...93.2.3 脱氮菌反硝化能力测定方法……….……………………………………………...103.2.4 FA1好氧反硝化能力测定过程…………………………………………………….103.2.5 好氧条件下FA1反硝化作用能力的研究………………………………………….104结果与讨论………………………………………………………………………………114.1 脱氮菌的分离筛选…………………………………………………………………...114.2 FA1革兰氏染色观察……….……………………………………………………….114.3 用Brucine法制得的NO3―标准曲线……………………………………………….114.4温度对菌FA1株的反硝化效能影响…………………………………………………124.5 pH值对FA1反硝化作用的影响…………………………………………………….124.6 不同溶解氧对反硝化能力的影响………….………………………………………..134.7 碳源对FA1反硝化速率的影响 …..………………………………………………..145总结……………………………………………………………………………………...15 参考文献 …………………………………………………………………………………16 致谢 ………………………………………………………………………………………17一株好氧脱氮菌的筛选鉴定及其特性研究一株好氧脱氮菌的筛选鉴定及其特性研究刘辉塔（生命科学与工程学院 生物工程专业 200502班）摘 要：本文主要进行了脱氮相关细菌的分离培养、脱氮性能研究，为进一步进行脱氮菌群的构效研究打下了基础。

首先，从赤壁生活小区污水沟取污泥样品，进行硝化细菌的富集，采用硝化细菌分离培养基分离筛选用涂平板法获得了8株具硝化能力的细菌，对它们测OD值选出最佳菌株，通过单因素多水平实验考察了培养基组分(包括碳源)以及培养条件(包括溶氧、pH、温度)对该菌的生长和硝化能力的影响，结果表明：32 ℃为菌株反硝化作用较优的温度；pH在7.0-8.0之间，该菌株在此pH条件的除氮效率是较高的；在淀粉与酒石酸钾钠中反硝化速率最好；当摇床转速为150 rpm时，其反硝化能力最强关键词：脱氮菌；反硝化；污水处理第1页 共17页一株好氧脱氮菌的筛选鉴定及其特性研究An Aerobic Denitrification Bacteria Identificationand Characteristic StudyLiu Hui-ta(Class 200502 Biological Engineering College of Life science and Engineering HNU) Abstract: This thesis relates to isolation and incubation of bacteria and performance studies about denification.It lays the foundation for further structure-activity studies of denitrification bacteria. First of all, get sludge samples from the limber in the Red Cliff biotope and enrich the nitrobacteria by odopting nitrobacteria isolation media to sperate and filter nitrobacteria .Throughof single-eiement and multi-level experiments, acquire 8 bacteria with nitrifying capacity,measure their OD value measured for the best strainsAnd abserve the influence that medium components (including carbon sources), as well as culture conditions (including dissolved oxygen, pH, temperature) have on the growth and nitrifying capacity of those bacteria.The above result shows that 32℃ is a better temperature for denitrification; 7.0-8.0 is a better pH, the strains in those pH conditions are much more efficient in denitrogenating ;the rate of denitrification is the best in starch and sodium;the denitrification is the most powerful when the shaker is at the speed of 150 rpm. Key words：Denitrification bacteria; Denitrification; Sewage treatment第2页 共17页一株好氧脱氮菌的筛选鉴定及其特性研究1 选题背景1.1 生物脱氮研究意义随着工农业的飞速发展，工业排放的含氮废水，农业施用氮肥的冲淋流失以及城市生活污水的排放，氮污染对生存环境的影响逐渐引起人们的高度重视。

据国家环保总局20xx年中国环境状况公报，我国湖库型水源主要污染指标为总氮，由总氮引起的富营养化问题非常突出水体富营养化是当今我国水环境面临的重大问题，严重地阻碍着我国国民经济的发展[1]同时化合态氮对人体及动物的毒害作用尤其是致癌作用早为人们所认识，而亚硝酸盐早己是美国规定的优先监测污染物（当饮用水中硝态氮NO3 含量高于l0 mg/L,时就可能导致6个月以下的婴幼儿死亡）当血中高铁血红蛋－白的含量达70%，即发生窒息现象亚硝酸盐与胺作用生成的亚硝胺有致癌、致畸作用各种水溶解态氮对生态系统的污染及危害目前相当严峻，防治较为困难，如无公害蔬菜基地中硝态氮的控制就比较困难水体中氮的超标引起的水体富营养化，无论是内陆湖或是沿海都极为严重，对水生生态系统的干扰和危害尤其令人关注在彻底消除地下水中硝酸盐污染和降低脱硝成本的两个方面，生物反硝化方法是目前己投入实用的最好方法[2]脱氮处理在废水处理过程中越来越显示其重要地位目前生物脱氮己经成为废水中去除氮素污染的最有效的方法之一但是传统的生物脱氮是通过硝化和反硝化两个过程来完成的，首先氨氮由自养的硝化细菌在好氧条件下转化为硝态氮，然后再通过异养的反硝化细菌在缺氧条件下将硝态氮还原为氮气，排出水体。

因此，脱氮过程工艺环节较多，处理成本高，操作控制条件复杂等不足本研究从土壤中分离好氧反硝化微生物群，并对好氧反硝化菌在不同条件下的脱氮能力进行探究，充分发挥这一新型生物脱氮技术的优势，因而具有很大的研究意义[3]1.2 生物脱氮研究新进展传统的生物脱氮是通过硝化和反硝化两个过程实现的硝化作用通常被定义为由氨到硝酸的生物氧化过程，硝化是化能自养过程，一般分为两步进行，第一步由亚硝酸细菌将氨氮转化为亚硝酸盐( NO2— )，这一过程称为氨化作用第二步由硝酸细菌进一步将亚硝酸盐氧化成硝酸盐( NO3— ) 反硝化菌是异养型兼性厌氧菌在缺氧的条件下，以硝酸盐氮为电子受体，以有机物为电子供体进行厌氧呼吸将硝酸盐氮还第3页 共17页一株好氧脱氮菌的筛选鉴定及其特性研究原为N2或N20,同时降解有机物污水处理中生物脱氮过程的实现，根据微生物在处理工艺中的存在状态，一般可分为悬浮生长型和附着生长型[4]相应的反应器为活性淤泥反应器和生物膜反应器虽然传统的硝化一反硝化工艺在废水脱氮方面起到了一定的作用，仍存在硝化菌群增殖速度慢，水处理过程是N2O的重要排放源之一等问题最近的研究表明：生物脱氮工艺技术随生物工程、代谢工程、酶工程及相关技术的迅猛发展，得到了较大的发展生物脱氮过程出现了一些超出人们传统认识的新发现。

某些微生物在好氧条件下也可以进行反硝化作用氨氧化也可以在厌氧条件下。