分子生物学考点答案.doc

.1移动基因：又叫转位因子〔transposable elements〕,由于它可以在染色体基因组上移动,甚至可在不同染色体间跃迁,故又称跳跃基因〔jumping gene〕2断裂基因：真核细胞的结构基因,其核苷酸序列中含有与氨基酸编码无关的DNA间隔区段,从而被分割成不连续的若干区域将这种编码序列不连续,有间隔区段的DNA片断称为断裂基因3重叠基因：不同基因的核苷酸序列有时为相邻两个基因共用,将核苷酸彼此重叠的两个基因称为重叠基因〔overlapping genes〕4假基因：在珠蛋白基因簇〔gene cluster〕各片断核苷酸序列分析时发现,除了有正常的功能基因之外,还有功能失活的特殊序列片断,它不能行使表达功能该类无表达功能的畸变核苷酸基因序列片断,称为假基5同尾酶：有一些限制性核酸切酶识别的碱基顺序不完全恒定,即识别顺序不同,但酶切后产生同样黏性末端的两种酶称为同尾酶,如BamHⅠ和Bgl Ⅱ6质粒：细菌存在于细胞质中的一种独立于染色体以外的遗传成分,是由环状的DNA分子组成的复制子。

质粒有我复制和调控系统,可以在胞浆自主复制,把携带的遗传信息通过自我复制的子代质粒,可随细菌分裂而进入子代菌体中7COS质粒,粘性质粒〔Cosmid〕带有λ噬菌体的Cos位点和整个pBR322的DNA顺序经感染进入细菌细胞以后,它就好象质粒那样在细胞中进行复制易环化和扩增分子量小,可包装30-45kb外源基因,可由Ampr抗性筛选,常用于构建基因文库8Cos位点〔Cohesive-end site〕：λDNA为线状双链分子,两端各有几个碱基的单链互补粘性末端,通过粘性末端的互补作用形成双链环形DNA这种由粘末端结合形成的双链区段即Cos位点9.COS细胞：用一个复制起始部位缺失的SV40突变种感染猴细胞,由于病毒DNA不能自主复制,便整合到宿主染色体DNA中,病毒DAN?,早期基因表达产生功能性的T抗原,这样的细胞就叫COS细胞10基因组文库：分离真核生物中某种DNA成分, 通常是分离供体细胞中的染色体DNA,酶切后,将这些染色体DNA片段与某种载体相接,而后转入大肠杆菌,建立包含有真核细胞染色体DNA片断的克隆株, 这种克隆株群体称基因组文库11cDNA文库：以mRNA为模板在反转录酶的作用下将形成的互补DNA〔cDNA 〕建立基因文库〔gene library〕12转染：病毒〔含噬菌体〕DNA及其重组子DNA导入宿主细胞〔或细菌〕的过程称转染。

13转导：以噬菌体为媒介,将外源DNA导入细菌的过程称转导14 转化：以质粒作为克隆载体将目的基因导入宿主细胞使原来细胞的遗传基因和遗传性发生15启动子：是位于结构基因上游,转录起始调控所必需的一段DNA序列,含-35区〔与σ因子结合〕和-10区〔和核心酶结合〕的保守序列当启动子与全酶结合后可在+1转录起始点开始转录16 终止子：位于一个基因编码区下游提供终止信号的DNA序列,可以被RNA聚合酶识别并发出停止mRNA合成的信号17起始密码子：编码多肽链的第一位氨基酸的密码子AUG〔或ATG〕,编码甲硫氨酸〔蛋氨酸〕在细菌中也有罕见的其实密码子GUG,编码缬氨酸其起始表达作用AUG＞GUG18终止密码子：有三个密码子〔UAA, UAG,UGA〕,为终止密码子,只表示链的终止,不表达氨基酸19 锌指结构：由两个半胱氨酸残基和两个组氨酸残基通过位于中心的锌离子结合成一个稳定的指状结构,表面暴露的碱基及其极性氨基酸与DNA结合有关20粘性末端：是指DNA分子在限制酶切割后产生一条链多出几个碱基的互补对称的突出末端,若5’突出称5’粘性末端,他们能够通过碱基间的配对而重新环化起来,若平末端的DNA片段则不易重新环化。

21PCR：聚合酶链反应,以DNA变性复制的某些特性为原理,以目的DNA片段为模板, 利用酶促反应〔Taq酶〕,在特定引物的引导下,将加入的4种dNTP由引物沿模板从5’→3’按碱基配对原则, 形成与模板DNA互补的半保留复制链, 新合成的链又可作为下一轮循环的模板经25-30个循环产物呈 2n指数扩增,由pg—μg〔紫外可见〕,可获得基因片段22Genomic DNA：基因组DNA,组成生物基因组的所有DNA,包含是一个生物体的全部遗传信息,即DNA的全部核苷酸序列 23Intron：即间隔子〔含子〕,与原核的蛋白质编码基因相比,真核蛋白质编码基因最主要的特点是其转录区的编码序列是间断的不连续的,其中非编码序列叫间隔子它是转录物被剪除掉的相应DNA分子24Exon：即表达子〔编码序列〕,与原核的蛋白质编码基因相比,真核蛋白质编码基因最主要的特点是其转录区的编码序列是间断的不联系的,其中编码氨基酸的序列叫表达子它是转录物经加工后被保留的相应的DNA分子25转录〔transcription〕:遗生物体以DNA为合成RNA的过程称为转录RNA聚合酶通过与一系列组分构成动态复合体,并以DNA序列为遗传信息模板,催化合成序列互补的RNA,包括转录起始、延伸、终止等过程。

26翻译:在多种因子辅助下,细胞以mRNA模板,通过tRNA识别该mRNA的三联体密码子和转移相应氨基酸,进而按照模板mRNA信息依次连续合成蛋白质肽链的过程 27顺式作用元件：顺式作用元件为一些能与DBP结合的特定序列DNA片段,位于真核基因上游,含有特有的相似或一致序列,决定转录起始位点和RNA聚合酶的转录效应按功能可分为启动子、增强子、沉默子、衰减子、终止子等DNA序列片段28反式作用因子 ：反式作用因子是一组能直接或间接地与DNA的顺式作用元件特定序列结合,发挥调节作用的核非组蛋白,即DNA结合蛋白〔DBP〕,DBP又称转录因子〔transcription factor,TF〕分通用转录因子及转录调节因子两大类基因表达的组织特异性及细胞周期特异性受上述元件和因子的相互作用所决定 29转录因子,能够结合在某基因上游特异核苷酸序列上的蛋白质,活化后从胞质转位至胞核,通过识别和结合基因启动子区的顺式作用元件,启动和调控基因表达30瞬时表达 ：外源基因进入宿主细胞后,不整合到受体细胞染色体而立即转录,出现基因产物,它只在细胞进行暂时性表达,不能随细胞传代,随后逐渐降低或消失。

31稳定表达 ：外源基因进入真核细胞后,可将基因整合到细胞染色体上,可随细胞转录表达和传代32tk基因：胸苷激酶基因？胸腺嘧啶核苷激酶简称胸苷激酶〔thymidine Kinase,TK〕在所有真核细胞中都有表达, 是嘧啶生物合成补救代途径中的一个关键酶, 它可催化胸苷磷酸化转变成为dTMP, 继续磷酸化生成dTTP, 参与DNA的生物合成33亮氨酸拉链：存在与蛋白C末端,为两组走向平行.带亮氨酸的α—螺旋形成的对称二聚体,约为30个氨基酸,每两个亮氨酸之间隔有六个氨基酸,于是每两圈螺旋就有一个亮氨酸,排成一排,从而在2个α-螺旋的蛋白分子之间形成一条拉链34基因突变：是基因组DNA分子在结构上发生碱基对组成或排列顺序的改变〔通常它只涉及基因中部分序列的变化〕,并引起个体表型的改变, 而使生物体发生遗传性变异35同义突变：是指碱基被替代后, 没有改变产物氨基酸序列,这是与密码子的简并性相关, 如CTT、CTC、CTA、CTG的第3位碱基互相替代后其编码表达的产物均为亮氨酸,因此这种突变不产生突变效应36错义突变：是指碱基序列的改变引起了产物氨基酸的序列改变有些错义突变严重影响到蛋白质活性甚至完全失去活性,从而影响了表型。

如果该基因是必需基因,则该突变为致死突变37.无义突变：某个碱基的改变可使某种氨基酸的密码子突变为终止密码子如赖氨酸的密码子AAG突变为终止密码子TAG,使肽链合成过早终止, 因而蛋白质产物一般没有活性若是发生在基因DNA的3’末端处, 它所表达产生的多肽常有一定活性或有部分活性, 这种突变又称为渗漏变型〔leaky mutation〕38限制性核酸切酶：是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链结构的核酸切酶39基因拼接：将有共同限制性切酶切点的基因连接起来形成多种基因杂合体,这个过程称为基因拼接此外,也可根据需要将具有协同效应的不同基因进行接拼40基因缺失：将原基因中的非功能区域的编码子人为地使之缺失的过程称为基因缺失,所表达的产物相对分子质量虽然小了,但有时可提高表达效率,有时还可降低一些毒性作用　41重组病毒载体：以SV40病毒为基础,经设计改造后的克隆载体主要由两种类型：取代型的重组病毒载体和重组的病毒-质粒载体　42重组质粒型载体：即重组病毒-质粒载体,这类载体只取病毒基因组中维持在哺乳动物中进行复制的有关序列,使它与一个细菌质粒融合,这样的重组体也能够在大肠杆菌中进行复制和增殖,不过这种载体〔重组体〕不能够被包装成病毒颗粒,不能出现裂解感染的情况,它实际上是一种类似于质粒的DNA分子载体。

　43基因工程多肽疫苗：使微生物对人体具保护作用的抗原基因经体外重组表达后所制备的生物活性多肽类疫苗称基因工程多肽或亚单位疫苗其表达系统可以是酵母,也可以是哺乳动物细胞,若无需糖基化的多肽疫苗甚至可在大肠杆菌等原核细胞中表达44基因置换：是指将致病基因整个地被有功能的正常基因所置换,使致病基因永久地得到更正但操作难度大,有伦理学问题45基因修正是指将致病基因的突变碱基序列得以纠正,而正常序列部分予以保留,使突变的致病基因恢复正常功能即使致病基因的突变序列纠正为正常序列〔用碱基点突变技术〕46基因修饰则是指将目的基因导入缺陷细胞或其它细胞,目的基因的表达产物可修饰和改变缺陷细胞的功能或使原有的功能得到加强47基因失活就是应用反义技术特异封闭某些基因的表达,以达到抑制或阻止某些有害基因的表达SiRNA的基因干扰可造成靶基因〔异常基因〕的失活〔或沉默〕48转基因动物：就是把外源性目的基因导入动物的受精卵或其囊胚细胞中,后改用注入受精卵的任何一个前核,并在细胞基因组中稳定整合,再将合格的重组受精卵或囊胚细胞筛选出来,采用借腹怀孕法寄养在雌性动物〔foster mother〕的子宫, 使之发育成具表达目的基因的胚胎动物, 并能传给下一代。

这样,生育的动物为转基因动物这类动物由于外源性目的基因的稳定存在而赋于子代动物个体49动物克隆：动物克隆是一种通过核移植过程进行无性繁殖的技术发育早期的动物胚胎细胞,或成年动物的体细胞,经显微手术移植到去掉细胞核的卵母细胞中之后,在适当的条件下,可以重新发育成正常胚胎这种胚胎被移植到生殖周期相近的母体之中,可以发育成为正常动物个体经过核移植而产生的动物,其遗传结构与细胞核供体完全相同这种不经过有性生殖过程,而是通过核移植生产遗传结构与细胞核供体相同动物个体的技术,就叫做动物克隆50基因敲除：是向正常生物个体引入某个突变基因位点而选择性地使某特定基因功能失活的技术,可培养出靶向性剔除某基因的小鼠,而导致行为特性改变51 ES细胞：胚胎肝细胞,不仅具有全能分化能力,而且可以在体外培养建立细胞株52基因组：表示某物种单倍体的总DNA对于二倍体高等生物其配子的DNA总和即为一组基因组不同生物基因组数目不同53基因表达：是目的基因DNA在导入的细胞转录成mRNA, 再以mRNA指导翻译成蛋白质54RT。