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尿液化学检验实用课件.ppt

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    • 尿液化学检验(实用课件) 2.pH试纸法法:1.试带法法:模模块有有甲基甲基红(pH4.6-6.2),溴麝香草酚溴麝香草酚蓝(pH6.0 - 7.6).变色范色范围:黄:黄5.0-绿7.0-蓝9.0,,仪器或肉眼判器或肉眼判读多种混合指示多种混合指示剂(棕棕红色色-深黑色深黑色),与与标准色板比准色板比较一)(一)测定原理定原理一、尿酸碱度一、尿酸碱度测定定((urine acidity))2 3.指示指示剂法法:5.pH计法法:4.滴定法滴定法:0.4g/L溴麝香草酚溴麝香草酚蓝→→滴于尿液滴于尿液→→黄黄-酸性酸性,绿-中性中性,蓝-碱性碱性.受黄疸尿及血尿的影响受黄疸尿及血尿的影响.pH电极极.精确度精确度较高高,需需仪器器,烦琐,少用少用.标准准NaOH滴定滴定,测总酸度酸度.复复杂,少用少用(一)(一)测定原理定原理一、尿酸碱度一、尿酸碱度测定定((urine acidity))3 (二)(二)￿ ￿尿酸度尿酸度测定的方法学定的方法学评价价方方 法法评评 价价试带法试带法√√配套应用于尿液分析仪,是目前满足临床对尿配套应用于尿液分析仪,是目前满足临床对尿pHpH检查需要最广泛应用检查需要最广泛应用的一种筛检方法的一种筛检方法pHpH试纸法试纸法操作简便,采用操作简便,采用pHpH精密试纸可提高检测的灵敏度,但试纸易吸潮而失精密试纸可提高检测的灵敏度,但试纸易吸潮而失效效指示剂法指示剂法溴麝香草酚蓝变色范围为溴麝香草酚蓝变色范围为pH 6.0pH 6.0~~7.67.6,当尿,当尿pHpH偏离此范围时,检测偏离此范围时,检测结果不准确;黄疸尿、血尿将直接影响结果判读结果不准确;黄疸尿、血尿将直接影响结果判读滴定法滴定法可测定尿酸度总量。

      临床上用于尿酸度动态监测,但操作复杂可测定尿酸度总量临床上用于尿酸度动态监测,但操作复杂pHpH计计 结果精确可靠结果精确可靠, ,需特殊仪器,操作繁琐可用于肾小管性酸中毒定位需特殊仪器,操作繁琐可用于肾小管性酸中毒定位诊断、分型、鉴别诊断时尿诊断、分型、鉴别诊断时尿pHpH精确测定精确测定4 标本新本新鲜;操作操作规范范;试带保存保存;试剂配制配制标准准;pH计校准校准.(三)(三)质量保量保证一、一、￿ ￿尿酸碱度尿酸碱度测定定((urine acidity))5 正常正常饮食食晨尿晨尿pH::5.5~~6.5,平均,平均6.0;随机尿随机尿pH::￿ ￿4.6~~8.0;;可滴定酸度:可滴定酸度:￿ ￿20~~40mmol/24h尿尿(四)参考(四)参考值一、一、￿ ￿尿酸碱度尿酸碱度测定定((urine acidity))6 (1)生理生理变化化:①①食物影响:蛋白食物影响:蛋白类→→酸性酸性; 果蔬果蔬类→→碱性碱性. 碱潮碱潮:餐后胃酸餐后胃酸↑↑,肾泌泌H+↓,Cl-重吸收重吸收↑→↑→￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿尿尿pH一一过性性↑↑.②②生理活生理活动:运:运动,饥饿,出汗出汗,应急急,夜夜间入睡呼吸入睡呼吸￿ ￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿变慢慢→→体内酸性代体内酸性代谢产物物↑→↑→pH↓.(五)(五)临床意床意义一、一、￿ ￿尿酸碱度尿酸碱度测定定((urine acidity))7 (2)病理病理变化化:①①酸性尿:酸中毒酸性尿:酸中毒,高高热,慢性慢性肾炎炎,白血病白血病, 糖尿病糖尿病酮症酸中毒症酸中毒,低低钾血症血症,痛痛风②②碱性尿:碱中毒碱性尿:碱中毒,呕吐呕吐,尿路感染尿路感染,ⅡⅡ型型肾￿ ￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿小管性酸中毒小管性酸中毒,原原发性性醛固固酮增多症增多症 一、一、￿ ￿尿酸碱度尿酸碱度测定定((urine acidity))(五)(五)临床意床意义8 ((3))药物影响:物影响:①①NaHCO3,K2CO3,枸枸橼酸酸钠→→碱化尿液碱化尿液→→防止酸性防止酸性结晶晶(尿酸及胱氨酸尿酸及胱氨酸)形成形成;促促进酸性酸性药物排泄物排泄. ②②氯化化钙(铵、、钾)、稀、稀盐酸酸→→酸化尿液酸化尿液→→防止碱性防止碱性结晶晶(磷磷/碳碳/草酸草酸钙)形成形成;促促进碱性碱性药物排泄物排泄;预防防细菌生菌生长.③③溶血溶血时口服口服NaHCONaHCO3碱化尿液碱化尿液→→促促进溶解及排泄溶解及排泄Hb.一、一、￿ ￿尿酸碱度尿酸碱度测定定((urine acidity))(五)(五)临床意床意义9 二、尿液蛋白二、尿液蛋白质检查 健康人尿液中蛋白含量很少,定性健康人尿液中蛋白含量很少,定性为阴性。

      阴性尿液中蛋白尿液中蛋白质含量>含量>150mg/24h或尿中蛋白或尿中蛋白质浓度>度>100mg/L蛋白定性蛋白定性为阳性,即阳性,即￿ ￿proteinuria. 1.蛋白尿蛋白尿￿ ￿(proteinuria, PRO) ※※(一一)概述概述12 二、尿液蛋白二、尿液蛋白质检查2.蛋白尿形成的原因蛋白尿形成的原因(1)肾小球小球滤过膜破坏或膜破坏或电荷屏障改荷屏障改变(2)肾小管重吸收障碍小管重吸收障碍(3)溢出性溢出性(4)肾组织性性(一一)概述概述13 【【原理原理】】 指示指示剂的蛋白的蛋白质误差原理差原理※※ 溴酚溴酚蓝─→─→阴离子阴离子(1)干化学干化学试带法法【【评价价】】 肉眼和肉眼和仪器器;;对清蛋白灵敏清蛋白灵敏(70-100mg/L),,与与Hb/Mb/BJP基本不反基本不反应;;简便快速,易便快速,易标准化,准化,应用普遍用普遍健康普健康普查、、肾病病筛查pH3.2++pro+→复合物复合物(淡黄淡黄→→绿色色→→兰色色)(二二) 尿蛋白定性尿蛋白定性检查1.测定原理与定原理与评价价14 表表5-7 试带法法检测的干的干扰因素及因素及评价价干扰因素干扰因素评评 价价标本因素标本因素尿尿pHpH>>9 9,可假阳性;尿,可假阳性;尿pHpH<<3 3,可假阴性。

      最适尿,可假阴性最适尿pH 5pH 5~~6 6,故必要,故必要时可先调标本时可先调标本pHpH值尿液新鲜尿液新鲜食物因素食物因素尿酸碱度与摄入食物有系,检查前尿酸碱度与摄入食物有系,检查前1 1天应避免单一摄入过多肉类或蔬天应避免单一摄入过多肉类或蔬菜、水果,进食应均衡菜、水果,进食应均衡药物因素药物因素假阳性:服奎宁、奎宁丁、嘧啶等或尿中含聚乙烯、假阳性:服奎宁、奎宁丁、嘧啶等或尿中含聚乙烯、 吡咯酮、洗必泰、磷酸盐、季胺盐消毒剂吡咯酮、洗必泰、磷酸盐、季胺盐消毒剂 等,尿呈强碱(等,尿呈强碱(pH≥9.0pH≥9.0)假阴性:大剂量滴注青霉素或用庆大霉素、磺胺、假阴性:大剂量滴注青霉素或用庆大霉素、磺胺、 含碘造影剂含碘造影剂操作过程操作过程假阳性:试带浸渍时间过长,反应颜色变深假阳性:试带浸渍时间过长,反应颜色变深假阴性:试带浸渍时间过短反应不完全或浸渍时间过假阴性:试带浸渍时间过短反应不完全或浸渍时间过 长膜块中试剂流失长膜块中试剂流失(二二) 尿蛋白定性尿蛋白定性检查15 【【评价价】】 (2)磺基水磺基水杨酸法酸法【【原理原理】】 pro+ + 磺基水磺基水杨酸根酸根- →不溶性蛋白沉淀不溶性蛋白沉淀•简便快速,便快速,灵敏度高灵敏度高0.05-0.1g/L;;￿ ￿与清与清/球球/本周蛋白反本周蛋白反应;;假阳性。

      假阳性•干化学法的参考方法,干化学法的参考方法,NCCLS推荐的推荐的￿￿￿￿￿ ￿确确证实验H+(二二) 尿蛋白定性尿蛋白定性检查1.测定原理与定原理与评价价1尿尿2-3ml+试剂0.1ml,立即混匀,,立即混匀,1min内内观察察结果果.16 (2)磺基水磺基水杨酸法酸法【【干干扰因素因素】】 (二二) 尿蛋白定性尿蛋白定性检查1.测定原理与定原理与评价价 干干 扰扰 因因 素素假阳性假阳性①①高浓度尿酸、尿酸盐、草酸盐高浓度尿酸、尿酸盐、草酸盐②②碘造影剂、大剂量青霉素碘造影剂、大剂量青霉素③③混入生殖系统分泌物混入生殖系统分泌物假阴性假阴性pH pH > 9 9或或 < 3 317 阴性阴性( (--) ):不:不浑浊微量微量(±)(±)::轻微微浑浊,,PROPRO约0.1-0.15g/L0.1-0.15g/L弱阳性弱阳性( (++) ):明:明显白白雾状,状,PROPRO约0.2-0.5g/L0.2-0.5g/L阳性阳性(2(2++) )::浑浊,明,明显颗粒,粒,PROPRO约0.6-2.0g/L0.6-2.0g/L强阳性阳性(3(3++) ):大量絮片沉淀,:大量絮片沉淀,浑浊,,PROPRO约2-5g/L2-5g/L最最强阳性阳性(4(4++) ):凝:凝块,大量絮片沉淀,,大量絮片沉淀,PROPRO>>5g/L5g/L(3)加加热乙酸法乙酸法【【原理原理】】加加热→→PRO变性凝固,性凝固,￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿加酸加酸→→pH接近接近PRO等等电点点; 溶解碱性溶解碱性盐类结晶晶.【【评价价】】(二二) 尿蛋白定性尿蛋白定性检查特异性高,干特异性高,干扰少,灵敏度少,灵敏度0.15g/L;;与所有蛋白与所有蛋白发生沉淀反生沉淀反应。

      经典准确的、定性的典准确的、定性的确确证实验.※※1.测定原理与定原理与评价价18 (3)加加热乙酸法乙酸法【【干干扰因素因素】】(二二) 尿蛋白定性尿蛋白定性检查※※1.测定原理与定原理与评价价 干干 扰扰 因因 素素假阳性假阳性①①混入生殖系统分泌物混入生殖系统分泌物假阴性假阴性① pH ① pH > 9 9或或 < 3 3②②无盐或低盐饮食者,测定前加入少许盐溶液无盐或低盐饮食者,测定前加入少许盐溶液定性:阴性定性:阴性2.参考参考值19 (1)检测前:患者正常前:患者正常饮食食; (2)检测中:中:※※ ①①室内室内质控;阳性及阴性控;阳性及阴性对照￿ ￿￿￿￿￿￿￿②②试带法:按法:按规程操作,浸程操作,浸渍时间适宜;阴凉适宜;阴凉￿ ￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿干燥;有效期干燥;有效期￿￿￿③￿￿￿③加加热乙酸法:乙酸法:盐类→→浑浊→→假阳性;假阳性;￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿遵循加遵循加热- -加酸加酸- -再加再加热;;￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿5%￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿5%乙酸乙酸为尿液的尿液的1/10.1/10.￿￿￿④￿￿￿④加加热乙酸法和磺基水乙酸法和磺基水杨酸法:酸法:调尿液尿液pHpH为5-65-6 3.质量保量保证(二二) 尿蛋白定性尿蛋白定性检查(3)检测后:后:报告告审核核;结果与果与临床不符,分析原因床不符,分析原因￿￿￿￿21 (1)生理性生理性￿￿￿￿￿￿蛋白尿蛋白尿   功能性功能性(2)病理性病理性￿￿￿￿￿￿蛋白尿蛋白尿肾后性后性肾 性性肾小球性小球性:肾小管性小管性:混合性混合性:溢出性溢出性:肾前性前性体位性体位性偶然性偶然性:血、血、脓、粘液、粘液Albβ2、、α1-MAlb、、β2-MHb,Mb,BJPHb,Mb,BJPTH糖蛋白糖蛋白<<+;;≤ ≤0.5g/24h;青少年;青少年++~~+++,卧床后,卧床后(-);青少年;青少年(三三) 尿蛋白定量尿蛋白定量检查※※4.临床意床意义组织性性:29 蛋白尿的蛋白尿的蛋白尿的蛋白尿的选择选择性性性性肾小球小球滤过膜膜损伤程度及尿中蛋白程度及尿中蛋白组分不同分不同:选择性蛋白尿:性蛋白尿:非非选择性蛋白尿:性蛋白尿:MW4~~9万万,Alb,Tf;AT,前前Alb.3+~~4+;>3.5g/24h;肾病病综合症合症.MW>>9万万,Ig(G,A,M),C3;;Alb,T-H.1+~~4+;0.5~~3.0g/24h.持持续→→肾衰;原衰;原/继发肾小球疾病小球疾病.(三三) 尿蛋白定量尿蛋白定量检查30 肾小球性小球性::肾小球小球肾炎炎+~~++,很少>,很少>+++;;肾小管性小管性::±~~+,很少>,很少>++.混合性性混合性性::肾病病综合征合征≥ ≥+++.组织性性::￿￿￿￿±~~+,很少>,很少>++.(三三) 尿蛋白定量尿蛋白定量检查31 三、尿液葡萄糖三、尿液葡萄糖检查正常人尿内含糖量极少,正常人尿内含糖量极少,0.56~~5.0mmol/24h,定性,定性试验阴性阴性。

      ※※糖尿糖尿(glucosuria, GLU)血糖>血糖>8.88mmol/L,>,>肾糖糖阈值,或近端,或近端肾小管重吸收功能障碍小管重吸收功能障碍时尿糖尿糖↑↑,定性,定性试验阳性的尿液阳性的尿液.32 (1)试带法法【【原理原理】】※※葡萄糖葡萄糖+H H2 2O O 葡萄糖氧化葡萄糖氧化酶￿ ￿葡萄糖酸内葡萄糖酸内酯+H H2 2O O2 2 H H2 2O O2 2+色素原色素原￿ ￿过氧化物氧化物酶￿￿￿￿有色物有色物质+ H H2 2O O((glucose oxidase-peroxidase method))【【评价价】】特异性特异性强,灵敏度高灵敏度高(1.67~~2.78mmol/L →弱阳性弱阳性),简便便快快速速,自自动分析分析.1.测定方法与定方法与评价价(一一) 尿糖尿糖定性定性检查33 (1)干化学干化学试带法法【【干干扰因素因素】】葡萄糖氧化葡萄糖氧化酶试带法法1.测定方法与定方法与评价价(一一) 尿糖尿糖定性定性检查标本因素标本因素假阳性:容器残留强氧化剂假阳性:容器残留强氧化剂. .假阴性:标本放置过久假阴性:标本放置过久, ,高高SGSG尿尿, ,尿酮体尿酮体>0.4g/L.>0.4g/L.药物因素药物因素假阴性:假阴性:VitCVitC、左旋多巴、左旋多巴. .34 (2)(2)班氏法班氏法班氏法班氏法(Benedict(Benedict法法法法) )【【原理原理】】 Cu2+-----------→Cu+ 兰色色￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿黄色黄色至至砖红色色.【【评价价】】缺乏特异性缺乏特异性,灵敏度低灵敏度低(8.33mmol/L→弱阳性弱阳性)-CHO△ △,OH--1.测定方法与定方法与评价价班氏班氏试剂1ml,1ml,煮煮沸不沸不变色色+ +尿尿2 2滴滴→→煮沸煮沸1-2min →1-2min →冷却后冷却后观察察. .(一一) 尿糖定性尿糖定性检查35 (2)(2)班氏法班氏法班氏法班氏法(Benedict(Benedict法法法法) )【【干干扰因素因素】】1.测定方法与定方法与评价价(一一) 尿糖定性尿糖定性检查标本因素标本因素假阳性:还原性糖假阳性:还原性糖假阴性:假阴性:①①大量铵盐,预先加碱煮沸去氨后再检验;大量铵盐,预先加碱煮沸去氨后再检验; ② ② PROPRO>>0.5g/L,0.5g/L,加热乙酸法去蛋白取滤液检验加热乙酸法去蛋白取滤液检验; ;药物因素药物因素假阳性:假阳性:VitC,VitC,青青/ /链霉素链霉素, ,头孢菌素头孢菌素, ,异烟肼异烟肼, ,水杨酸水杨酸 盐盐, ,氨苄西林氨苄西林36 (3)薄薄层层析法析法(thin-layer chromatography, TLC)【【评价价】】鉴别、、确确证尿糖种尿糖种类的特异、灵敏的方法;操作的特异、灵敏的方法;操作烦琐,很少,很少应用。

      用一一) 尿糖定性尿糖定性检查1.测定方法与定方法与评价价【【原理原理】】吸附吸附剂作固定相;有机溶作固定相;有机溶剂作流作流动相;两相相;两相间作相作相对移移动各各组分分→→流流动相相→→固定相固定相→→反复吸附反复吸附- -解析解析- -亲和作用和作用→→展展开开→→分离比移比移值((RfRf))= =斑点距离斑点距离/ /溶溶剂距离距离37 (1)检验前:前:(2)检测中:中:①①容器清容器清洁,不含氧化性物,不含氧化性物质;一次性尿杯;一次性尿杯.②②消除消除VitC干干扰:尿液煮沸几分:尿液煮沸几分钟.(3)检测后:后:①①报告告审核核,结果不符果不符查找原因找原因;②②与与临床沟通床沟通.2.质量控制量控制(一一) 尿糖定性尿糖定性检查①①室内室内质控控. ②②试带法注意反法注意反应时间和温度和温度;阴凉干燥阴凉干燥,保保质期期. 班式法遵守操作班式法遵守操作规程程,注意判注意判读时间.定性:阴性定性:阴性3.参考参考值39 【【测定方法定方法】】葡萄糖氧化葡萄糖氧化酶法法,己糖激己糖激酶法法(二二) 尿糖尿糖定量定量检查【【评价价】】测血糖方法血糖方法药物和尿液中的自然物物和尿液中的自然物质对己糖激己糖激酶法几乎法几乎无干无干扰;;对葡萄糖氧化葡萄糖氧化酶法有不同程度的干法有不同程度的干扰。

      2.参考参考值::0.56~~5.0 mmol/L1.测定方法与定方法与评价价41 非葡萄糖尿非葡萄糖尿葡萄糖尿葡萄糖尿血糖增高性糖尿血糖增高性糖尿血糖正常性糖尿血糖正常性糖尿-肾性性糖尿病糖尿病-代代谢性性内分泌性糖尿内分泌性糖尿饮食性糖尿食性糖尿应激性糖尿激性糖尿饥饿-糖耐量糖尿糖耐量糖尿糖尿糖尿乳糖尿:乳糖尿:半乳糖尿半乳糖尿果糖尿果糖尿肝功障碍肝功障碍哺乳期哺乳期※※ (三三)临床意床意义暂时性性42 ( (胰胰岛素分泌不足素分泌不足) )饥饿-糖耐量糖尿:糖耐量糖尿:见于晚期食道于晚期食道肿瘤、低瘤、低营养状养状态和妊娠和妊娠剧吐者吐者￿ ￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿做糖耐量做糖耐量试验43 表表5-10 内分泌性糖尿常内分泌性糖尿常见原因及原因及检查结果果疾疾 病病原原 因因检查结果检查结果甲状腺功能亢甲状腺功能亢进进甲状腺素甲状腺素分泌过多,食欲亢进、肠壁分泌过多,食欲亢进、肠壁血流加速,葡萄糖吸收率增加血流加速,葡萄糖吸收率增加餐后血糖增高,餐后尿糖餐后血糖增高,餐后尿糖阳性阳性空腹血糖、餐后空腹血糖、餐后2h2h血糖正血糖正常常垂体前叶功能垂体前叶功能亢进亢进生长激素生长激素分泌过多分泌过多, ,对抗胰岛素作用对抗胰岛素作用血糖增高血糖增高, ,尿糖阳性尿糖阳性嗜铬细胞瘤嗜铬细胞瘤肾上腺素、去甲肾上腺素肾上腺素、去甲肾上腺素大量分泌,大量分泌,肝糖原降解为葡萄糖加速肝糖原降解为葡萄糖加速血糖增高血糖增高, ,尿糖阳性尿糖阳性CushingCushing综合征综合征糖皮质激素糖皮质激素大量分泌大量分泌, ,糖原异生作用糖原异生作用旺盛旺盛, ,葡萄糖磷酸激酶和对抗胰岛素葡萄糖磷酸激酶和对抗胰岛素作用受抑制作用受抑制血糖增高血糖增高, ,尿糖阳性尿糖阳性44 表表5-11 血糖正常性糖尿常血糖正常性糖尿常见原因及原因及检查结果果疾疾 病病原原 因因检查结果检查结果家族性糖家族性糖尿尿先天性先天性近曲小管对糖重吸收功能缺损近曲小管对糖重吸收功能缺损((<5.51mmol/L<5.51mmol/L或或1g/L1g/L)见于)见于FanconiFanconi综合症综合症. .空腹血糖、糖耐量试验正常;空腹血糖、糖耐量试验正常;空腹尿糖阳性空腹尿糖阳性新生儿糖新生儿糖尿尿肾小管对葡萄糖肾小管对葡萄糖重吸收功能不完善重吸收功能不完善空腹血糖、糖耐量试验正常;空腹血糖、糖耐量试验正常;尿糖阳性尿糖阳性妊娠或哺妊娠或哺乳期乳期细胞外液容量增高,肾滤过率增高细胞外液容量增高,肾滤过率增高而而近曲小管重吸收能力受抑制,近曲小管重吸收能力受抑制,肾糖阈肾糖阈减低减低空腹血糖、糖耐量试验正常;空腹血糖、糖耐量试验正常;尿糖阳性尿糖阳性后天后天获得性得性肾性糖尿:慢性性糖尿:慢性肾盂盂肾炎、炎、药物中毒、物中毒、肾病病综合症合症45 四、四、￿ ￿尿液尿液酮体定性体定性检查β-羟丁酸丁酸78%乙乙酰乙酸乙酸20%丙丙酮2%脑心心脏肌肉肌肉1.酮体体(ketone bodies,KET)尿尿酮体定性体定性为阳性,即阳性,即ketonuria.正常血正常血浆含量含量￿￿￿￿￿￿￿￿2~~4mg/L正常正常24h尿含量尿含量:乙乙酰乙酸<乙酸<25mg,25mg, β-羟丁酸丁酸<<<<9 9mg, 丙丙酮<<3mg47 (2)乙乙酰乙酸乙酸测定法定法(Gerhardt法法) ※※ 2.检测原理原理四、尿液四、尿液酮体定性体定性检查+亚硝基硝基铁氰化化钠→→紫色化合物紫色化合物丙丙酮乙乙酰乙酸乙酸OH --(1)亚硝基硝基铁氰化化钠法法乙乙酰乙酸乙酸+氯化高化高铁→→乙乙酰乙酸乙酸铁￿ ￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿(赭赭/酒酒红色色) 48 表表5-12 基于基于亚硝基硝基铁氰化化钠的尿的尿酮体体检测方法方法方法类别检测过程试带法含甘氨酸、碱缓冲剂、亚硝基铁氰化钠。

      在碱性条件下,后者与尿乙酰乙酸、丙酮起紫色反应朗格法尿中先加固体亚硝基铁氰化钠后,后加少量冰乙酸,反复振荡使其溶解、混匀,再沿管壁徐徐加入氢氧化铵液,尿中丙酮或乙酰乙酸与亚硝基铁氰化钠反应,在与氨接触面上形成紫色环Rothera法尿中加50%乙酸溶液,再加200g/L亚硝基铁氰化钠溶液,混匀,沿管壁徐徐加入浓氢氧化铵溶液,尿中丙酮或乙酰乙酸与亚硝基铁氰化钠反应,尿液表面出现紫色环改良Rothera法又称酮体粉法,将亚硝基铁氰化钠、硫酸铵、无水碳酸钠混合研磨成粉在碱性条件下,丙酮或乙酰乙酸与亚硝基铁氰化钠和硫酸铵作用,生成紫色化合物片剂法含甘氨酸(与丙酮反应)和其他物质,可检测尿液、血清、血浆或全血酮体于片剂上加尿1滴,片剂呈色在规定时间内与标准色板进行比色49 表表5-13 尿尿酮体不同体不同检测方法方法灵敏度灵敏度比比较化学成分化学成分朗格法朗格法RotheraRothera法法改良改良Roth -Roth -eraera法法片剂法片剂法试带法试带法GerhardtGerhardt法法乙酰乙酸乙酰乙酸((mg/Lmg/L))50501010~~505080805050~~l00l005050~~l00l00250250~~700700丙酮丙酮((mg/Lmg/L))200200100100~~25025010001000200200~~250250400400~~700700不反应不反应β-β-羟丁酸羟丁酸((mg/Lmg/L))不反应不反应不反应不反应不反应不反应不反应不反应不反应不反应不反应不反应3.方法学方法学评价价【【灵敏度灵敏度】】四、尿液四、尿液酮体定性体定性检查51 【【干干扰因素因素】】假阳性假阳性较多肌酐、肌酸,高色素尿,较多肌酐、肌酸,高色素尿,酞、苯丙酮、左旋多巴代谢物酞、苯丙酮、左旋多巴代谢物假阴性假阴性标本收集和保存不当;标本收集和保存不当;亚硝基铁氰化钠对温度、热度或光线很灵敏;亚硝基铁氰化钠对温度、热度或光线很灵敏;试带受潮失活。

      试带受潮失活3.方法学方法学评价价四、尿液四、尿液酮体定性体定性检查52 (1)检测前:前:标本新本新鲜,及及时检测;密;密闭冷藏冷藏/冷冷冻(2)检测中:中:①①阴阳阴阳对照;照;￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿②￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿②加入少量冰乙酸防止肌加入少量冰乙酸防止肌酐、肌酸、肌酸￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿过多引起的假阳性多引起的假阳性￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿③￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿③试带阴凉干燥,保阴凉干燥,保质期4.质量保量保证四、尿液四、尿液酮体定性体定性检查(3)检测后:后:①①注意方法灵敏度注意方法灵敏度. ②②不同病程的不同病程的酮体成分的影响体成分的影响.53 (1)早期早期诊断断::糖尿病糖尿病酮症酸中毒昏迷症酸中毒昏迷四、尿液四、尿液酮体定性体定性检查※※ 5.临床意床意义酮体阳性体阳性见于于:鉴别:①①低血糖、心低血糖、心脑血管病酸中毒、高血糖渗血管病酸中毒、高血糖渗￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿透性糖尿病昏迷透性糖尿病昏迷→→酮体不增高体不增高. ②②糖尿病糖尿病酮症者症者肾功能功能严重障碍而重障碍而肾阈值↑↑￿￿￿￿￿￿￿→￿￿￿￿￿￿￿→尿尿酮体体↓↓-消失消失.②②糖尿病糖尿病酮症酸中毒症酸中毒缓解解时,β-羟丁酸丁酸→→乙乙酰乙酸乙酸,分析分析结果果时必必须密切密切结合合临床床.(2)治治疗监测: ①①糖尿病糖尿病酮症酸中毒症酸中毒早期早期主要主要为β-羟丁丁￿ ￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿酸酸; 测定血定血β-羟丁酸有利于早期丁酸有利于早期诊断断.※※ 5.临床意床意义酮体阳性体阳性见于于:四、尿液四、尿液酮体定性体定性检查※※ 5.临床意床意义酮体阳性体阳性见于于:54 四、尿液四、尿液酮体定性体定性检查※※ 5.临床意床意义酮体阳性体阳性见于于:(5)药物影响:降糖物影响:降糖药抑制抑制细胞呼吸作用胞呼吸作用(3)非糖尿病性非糖尿病性酮症:感染、症:感染、严重呕吐重呕吐￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿腹泻、腹泻、长期期饥饿、禁食、子、禁食、子痫(4)中毒中毒:氯仿、乙仿、乙醚、磷中毒、磷中毒55 五、尿液胆五、尿液胆红素素(BIL)定性定性检查1.胆红素代谢Y蛋白蛋白胆胆红素素-Y蛋蛋白白胆胆红素素胆胆红素葡萄糖酸素葡萄糖酸酯(结合胆合胆红素素)UDP-GuUDP20%56 57 (2) 氧化法氧化法(1)试带法(重氮法)法(重氮法)胆胆红素素+二二氯苯胺重氮苯胺重氮盐-→紫紫红色色偶氮化合物偶氮化合物强酸酸胆胆红素素+氯化化钡→→沉淀沉淀+三三氯化化铁→→胆青胆青/绿/黄素黄素￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿(蓝/黄黄绿色色)H+2.检测原理原理￿ ￿※※五、尿液胆五、尿液胆红素定性素定性检查①①Harrison法法②②Smith碘碘环环法法胆胆红素素+碘碘→→胆胆绿素素(绿色色)(接触面)(接触面)58 (1)试带法:法:简单,分析,分析仪,定性,定性筛检￿￿￿￿￿￿￿￿2,4-二二氯苯胺苯胺试带灵敏度灵敏度5-10mg/L 二二氯重氮氟化硼酸重氮氟化硼酸盐试带灵敏度灵敏度2-5mg/L3.方法学方法学评价价五、尿液胆五、尿液胆红素定性素定性检查【【干干扰因素因素】】假阳性假阳性大量大量氯丙嗪氯丙嗪治疗,治疗,尿含有尿含有盐酸苯偶氮吡啶代谢产物盐酸苯偶氮吡啶代谢产物假阴性假阴性标本标本保存不当保存不当,,BILBIL遇光分解;遇光分解;高高VitCVitC和和亚硝酸盐亚硝酸盐抑制偶氮反应抑制偶氮反应59 ②②Harrison法法:烦琐,灵敏度高灵敏度高(0.9umol/L)/0.5mg/L3.方法学方法学评价价五、尿液胆五、尿液胆红素定性素定性检查(2) 氧化法氧化法:①①Smith碘碘环法法:简便便,灵敏度低灵敏度低(17.1umol/L),少用,少用【【干干扰因素因素】】假阳性假阳性水杨酸、阿司匹林、牛黄水杨酸、阿司匹林、牛黄→→紫红色紫红色→→干扰干扰HarrisonHarrison法法. .假阴性假阴性标本标本保存不当(未避光)保存不当(未避光)60 (1)检测前:前:标本新本新鲜,棕色瓶避光保存棕色瓶避光保存.(2)检测中:中:￿￿①￿￿①试带避光干燥;避光干燥;规范,高低范,高低质控,定控,定检。

      ￿￿￿￿②②Harrison法法:加入加入FeCl3后未后未见足足够的的钡盐沉淀沉淀, 可加适量硫酸可加适量硫酸铵￿￿￿￿￿￿￿￿五、尿液胆五、尿液胆红素定性素定性检查4.质量控制量控制￿ ￿※※ 5.参考参考值(3)检测后:后:试带法定性,可疑用法定性,可疑用Harrison法法验证阴性阴性61 (1)肝肝细胞性黄疸胞性黄疸(2)梗阻性黄疸梗阻性黄疸hepatocellular jaundiceobstruct jaundice(3)溶血性黄疸溶血性黄疸hemolytic jaundice(+)(++)(-)五、尿液胆五、尿液胆红素定性素定性检查6.临床意床意义黄疸的黄疸的诊断与断与鉴别诊断断62 六、尿胆原和尿胆素定性六、尿胆原和尿胆素定性检查※※(1)改良改良Ehrlich法法(湿化学法湿化学法) (2)干化学干化学试带法法尿胆原尿胆原+对二甲氨基苯甲二甲氨基苯甲醛→→樱红色色化合物化合物 ①①Ehrlich醛反反应※※②②尿胆原尿胆原+重氮化合物重氮化合物→→红色色化合物化合物1.1.尿胆原尿胆原(URO)(URO)测定方法定方法H+Urobilinogen, URO/UBG++++++ ￿ ￿立即呈立即呈深深红色色++++   ￿   ￿放置放置10min呈呈樱红色色++    ￿￿    ￿￿放置放置10min呈呈微微红色色--  ￿ ￿  ￿ ￿放置放置10分分钟后后不不显色色63 2.尿胆素尿胆素(urobilin)测定方法定方法无胆无胆红素尿液素尿液+碘液碘液尿胆原尿胆原尿胆素尿胆素Zn2+ + 复合物复合物(绿色色荧光光)六、尿胆原和尿胆素定性六、尿胆原和尿胆素定性检查※※ Schleisinger法法:氧氧化化64 (1)(1)试带法:法:改良改良Ehrlich法:法:简单快速,分析快速,分析仪,定性或定量;,定性或定量;￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿不同不同试带灵敏度不同(灵敏度不同(1-4mg/L)。

      偶氮反偶氮反应试带不受胆不受胆红素影响,素影响,对尿胆原特异尿胆原特异2)尿胆素最低尿胆素最低检出量出量为0.05mg/L3.方法学方法学评价价六、尿胆原和尿胆素定性六、尿胆原和尿胆素定性检查65 干扰因素干扰因素评评 价价标本因素标本因素标本久置,尿胆原氧化为尿胆素标本久置,尿胆原氧化为尿胆素药物因素药物因素假阳性:吩噻嗪类、氯丙嗪类、磺胺类、普鲁卡因假阳性:吩噻嗪类、氯丙嗪类、磺胺类、普鲁卡因假阴性:大量假阴性:大量VitCVitC、长期服用广谱抗生素长期服用广谱抗生素内源性物质内源性物质假阳性:卟胆原、吲哚、胆红素假阳性:卟胆原、吲哚、胆红素→→红色 【【干干扰因素因素】】 EhrlichEhrlich醛反反应偶氮法:尿甲偶氮法:尿甲醛>2g/L,亚硝酸硝酸盐>0.05g/L→灵敏度灵敏度↓↓66 (1)检测前:前:标本新本新鲜,避光保存;避光保存;￿￿￿￿￿￿口服口服NaHCO3碱化尿液碱化尿液,午餐后午餐后2-4h尿尿标本2)检测中中:口服口服NaHCO3碱化尿液碱化尿液,先用乙酸先用乙酸调节￿ ￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿为弱酸性弱酸性. 试带法法:规范范,高低室内高低室内质控控,定定检. 阴凉干燥阴凉干燥,密密闭避光避光,有效期有效期.※※ 4.质量控制量控制六、尿胆原和尿胆素定性六、尿胆原和尿胆素定性检查(3)检测后:正确后:正确评价尿三胆价尿三胆; 尿胆原阴性可疑尿胆原阴性可疑→→尿胆素定性尿胆素定性验证.67 尿胆原:阴性或弱阳性;尿胆原:阴性或弱阳性;￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿1:20稀稀释阴性阴性.尿胆素:阴性尿胆素:阴性(1)鉴别黄疸种黄疸种类.尿二胆尿二胆正常正常溶血性黄疸溶血性黄疸肝细胞性黄疸肝细胞性黄疸阻塞性黄疸阻塞性黄疸尿胆红素尿胆红素––––+ ++ ++ +尿胆原尿胆原少量少量↑ ↑(+ +)↑ ↑(+ +)↑(+)↑(+)↓(-)↓(-)(2)反映肝反映肝细胞胞损伤敏感指敏感指标.(3)长期便秘易使尿胆原阳性程度增加期便秘易使尿胆原阳性程度增加.六、尿胆原和尿胆素定性六、尿胆原和尿胆素定性检查5.参考参考值6.临床意床意义68 表表5-15 不同不同类型黄疸的型黄疸的鉴别诊断断标本标本指指 标标正常人正常人溶血性黄疸溶血性黄疸肝细胞性黄肝细胞性黄疸疸梗阻性黄疸梗阻性黄疸血清血清总胆红素总胆红素正常正常增高增高增高增高增高增高  未结合胆红素未结合胆红素正常正常增高增高增高增高正常正常/ /增高增高  结合胆红素结合胆红素正常正常增高增高/ /正常正常增高增高增高增高尿液尿液颜色颜色浅黄浅黄深黄深黄深黄深黄深黄深黄  尿胆原尿胆原1:201:20阴性阴性强阳性强阳性阳性阳性阴性阴性  尿胆素尿胆素阴性阴性阳性阳性阳性阳性阴性阴性  胆红素胆红素阴性阴性阴性阴性阳性阳性阳性阳性粪便粪便颜色颜色黄褐黄褐深色深色黄褐黄褐/ /变浅变浅变浅变浅/ /白陶土色白陶土色  粪胆素粪胆素正常正常增高增高减低减低/ /正常正常减低减低/ /消失消失69 •尿液中尿液中Hb来源:来源:￿￿￿￿￿①￿￿￿￿￿①血管内溶血血管内溶血￿￿￿￿￿②￿￿￿￿￿②尿路出血尿路出血七、尿血七、尿血红蛋白定性蛋白定性检查•正常人血正常人血浆中游离中游离Hb微量微量(50mg/L),与与结合珠蛋白形成合珠蛋白形成Hb-Hp复合物,在复合物,在单核核-巨噬巨噬细胞系胞系统代代谢,故尿中,故尿中Hb极微。

      定性:阴性极微定性:阴性•验证尿液潜在出血的尿液潜在出血的试验: 隐血血试验(occult blood test)1.概述概述70 (1)试带法法(2)湿化学法湿化学法(3)免疫法:免疫法:单克隆抗体法克隆抗体法利用胶体金利用胶体金标记的抗人的抗人Hb单克隆抗体克隆抗体检测2.测定方法定方法原理相同原理相同※※七、尿血七、尿血红蛋白定性蛋白定性检查H2O2 ───→亚铁血血红素素O邻邻甲苯胺甲苯胺甲苯胺甲苯胺─→邻邻甲偶氮苯甲偶氮苯甲偶氮苯甲偶氮苯( (蓝蓝色色色色) )71 (1)试带法:法:(2)湿化学法:湿化学法:(3)免疫法:免疫法:试剂稳定性差定性差,特异性特异性较低低,假阳性多假阳性多.0.3-0.6mg/L简便快速便快速,灵敏度高灵敏度高(0.15-0.3mg/L),影响多影响多,筛检.简便便,灵敏度高灵敏度高(0.2mg/L),特异性特异性强,,验证3.方法学方法学评价价七、尿血七、尿血红蛋白定性蛋白定性检查73 3.方法学方法学评价价七、尿血七、尿血红蛋白定性蛋白定性检查方法方法干扰因素干扰因素试带法试带法假阳性:热不稳定酶、氧化剂污染、尿路感染假阳性:热不稳定酶、氧化剂污染、尿路感染假阴性假阴性::大量大量VitCVitC、甲醛、亚硝酸盐,还原剂、甲醛、亚硝酸盐,还原剂化学法化学法假阳性:热不稳定酶及过氧化物酶,铁剂、硝酸、铜锌、假阳性:热不稳定酶及过氧化物酶,铁剂、硝酸、铜锌、 碘化物碘化物免疫法免疫法不受鸡牛猪羊兔不受鸡牛猪羊兔Hb(500ug/ml)Hb(500ug/ml)、辣根过氧化物酶、辣根过氧化物酶(200ug/ml)(200ug/ml)干扰干扰. .【【干干扰因素因素】】74 阴性阴性(1)检测前:前:标本新本新鲜,煮沸煮沸2分分→→破坏破坏WBC过氧化物氧化物酶￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿和其他和其他对热不不稳定定酶.(2)检测中:高低室内中:高低室内质控,阳性控,阳性对照;照;3%H2O2或或试￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿带验证所用所用试剂的有效期和可靠性。

      的有效期和可靠性※※4.质量控制量控制5.参考参考值七、尿血七、尿血红蛋白定性蛋白定性检查(3)检测后:后:审核,沟通,核,沟通,验证75 (2)辅助助诊断泌尿系断泌尿系统疾病疾病.(1)辅助助诊断断肾前性溶血性疾病前性溶血性疾病.各种血管内溶血性疾病各种血管内溶血性疾病:PNH, 血型不合血型不合输血血, AIHA,行行军性性Hb尿尿;各种各种病毒感染、病毒感染、疟疾疾;大面大面积烧伤、体外循、体外循环、、术后所致的后所致的RBC大量破坏大量破坏.隐匿性匿性肾炎炎尿中少量尿中少量RBC破坏破坏→→隐血血试验(++);镜检时RBC少少.6.临床意床意义七、尿血七、尿血红蛋白定性蛋白定性检查76 八、八、亚硝酸硝酸盐(NIT)硝酸硝酸盐亚硝酸硝酸盐(nitrate)(nitrite)硝酸硝酸盐还原原酶G—杆菌杆菌对氨基苯磺氨基苯磺(砷砷)酸酸重氮重氮盐++a-萘胺胺偶氮化合物偶氮化合物￿￿￿￿(红色色)1.检测原理:原理:亚硝酸硝酸盐还原法原法77 (1)亚硝酸硝酸盐检出率的出率的3个影响因素:个影响因素:￿￿①￿￿①尿中尿中G-杆菌要有硝酸杆菌要有硝酸盐还原原酶; ②②尿尿潴留潴留时间>>4h; ③③尿中有尿中有硝酸硝酸盐.八、八、亚硝酸硝酸盐(NIT)2.方法学方法学评价价(2)灵敏度:灵敏度:0.3-0.6mg/L(3)干干扰因素因素78 表表5-16 亚硝酸硝酸盐检测的干的干扰因素及因素及评价价因因 素素评评 价价标标 本本高比重尿使试验灵敏度降低;高比重尿使试验灵敏度降低;假阳性:陈旧尿、偶氮剂污染尿假阳性:陈旧尿、偶氮剂污染尿食食 物物尿中硝酸盐主要来源于尿中硝酸盐主要来源于正常饮食、体内蛋白质代谢、或由氨内源性合成正常饮食、体内蛋白质代谢、或由氨内源性合成。

      不能正常饮食的患者,体内缺乏硝酸盐,即使有细菌感染,也可出现阴不能正常饮食的患者,体内缺乏硝酸盐,即使有细菌感染,也可出现阴性性致病菌致病菌常见致病菌:大肠杆菌属(致病率最高)、常见致病菌:大肠杆菌属(致病率最高)、KlebsKlebs杆菌属、变形杆菌属、杆菌属、变形杆菌属、葡萄球菌属、假单胞菌属等葡萄球菌属、假单胞菌属等阳性阳性::大肠埃希菌感染大肠埃希菌感染符合率约为符合率约为80%80%阴性:肠球菌属、粪链球菌属感染阴性:肠球菌属、粪链球菌属感染药药 物物假阳性:非那吡啶假阳性:非那吡啶假阴性:利尿剂、假阴性:利尿剂、硝基呋喃硝基呋喃、大量维生素、大量维生素C C;;尿停留膀尿停留膀胱内时间胱内时间晨尿晨尿标本较好,尿在膀胱内停留时间长,细菌有充分作用时间,否则,标本较好,尿在膀胱内停留时间长,细菌有充分作用时间,否则,试验呈假阴性试验呈假阴性79 (1)检测前:晨尿,尽快前:晨尿,尽快检测八、八、亚硝酸硝酸盐(NIT)※※3.质量控制量控制(2)检测中:高低室内中:高低室内质控控,定定时阳性阳性标本本验证; 试带干燥避光,有效期干燥避光,有效期3)检测后:后:审核核,结合合LEU、、镜检分析。

      分析阴性阴性4.参考参考值80 快速快速筛检尿路感染尿路感染NIT阳性阳性:泌尿系泌尿系统有有细菌感染菌感染.(排除假阳性排除假阳性) NIT阴性阴性:不能排除泌尿系不能排除泌尿系统有有细菌感染菌感染.八、八、亚硝酸硝酸盐(NIT)※※5.临床意床意义NIT++试带LEU++镜检→→准确准确诊断断.确确证试验:尿:尿细菌培养阳性菌培养阳性81 九、白九、白细胞胞(WBC,LEU)(leukocyte)1.检测原理:原理:酯酶(esterase)法法吲哚酚酚酯￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿吲哚酚酚+有机酸有机酸粒粒细胞胞酯酶                     + 重氮重氮盐￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿↓￿￿￿￿￿￿↓￿￿￿￿￿￿重氮色素重氮色素((紫紫红色色缩合物)合物)82 九、白九、白细胞胞(WBC,LEU)2.方法学方法学评价价(1)灵敏度灵敏度10~~25个个/ul或或5~~15个个/HPF.特异性特异性强::中性粒中性粒细胞胞.(2)【【干干扰因素因素】】假阳性假阳性污染阴道分泌物、甲醛;污染阴道分泌物、甲醛;高浓度高浓度BILBIL、非那吡啶、呋喃坦啶、非那吡啶、呋喃坦啶. .假阴性假阴性WBC<10WBC<10~~25/μl,PRO25/μl,PRO>>5g/L,GLU≥30g/L;5g/L,GLU≥30g/L;大量青霉素、先锋霉素大量青霉素、先锋霉素ⅣⅣ、庆大霉素;、庆大霉素;VitC? VitC? 尿尿pH<4.4pH<4.4时草酸过多时草酸过多83 九、白九、白细胞胞(WBC,LEU)※※3.质量控制量控制(1)检测前:前:标本新本新鲜,久置后久置后WBC破坏破坏→→试带法法￿ ￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿与与镜检结果差异果差异过大。

      大2)检测中:中:规范范操作和操作和质控控3)检测后:后:审核核,结合合NIT、、LEU、、镜检分析分析,,￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿提高尿路感染提高尿路感染诊断的可靠性断的可靠性阴性阴性4.参考参考值84 LEU阳性阳性:泌尿系泌尿系统感染感染.(排除假阳性排除假阳性) ※※5.临床意床意义LEU阳性+阳性+镜检阴性阴性→→??￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿九、白九、白细胞胞(WBC,LEU)诊断泌尿系断泌尿系统感染LUE阴性阴性:镜检为淋巴淋巴细胞或胞或单核核细胞胞￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿见于于肾移植排斥反移植排斥反应、泌尿系、泌尿系结核中性粒中性粒细胞溶解,胞溶解,见于于肾脏病人85 2.方法学方法学评价价(1)灵敏度:灵敏度:50-100mg/L.特异性:特异性:只只检测还原性抗坏血酸原性抗坏血酸.(2)【【干干扰因素因素】】假阳性假阳性龙胆酸、龙胆酸、L-L-多巴;多巴;尿尿pH>4.0pH>4.0时内源性酚、巯基化合物、半胱时内源性酚、巯基化合物、半胱氨酸、硫代硫酸钠氨酸、硫代硫酸钠. .假阴性假阴性碱性尿(碱性尿(VitCVitC易氧化分解破坏)易氧化分解破坏)87 ※※3.质量控制量控制(1)检测前:前:随机尿随机尿。

      2)检测中:中:规范范操作和操作和试带质控控3)检测后:后:审核核,分析分析对OB/Hb、、BIL、、GLU、、￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿NIT、、LEU是否是否产生影响阴性阴性4.参考参考值5.临床意床意义判断判断试带法法OB/Hb、、BIL、、GLU、、NIT、、LEU等等结果是否可靠果是否可靠88 十一、尿液分析十一、尿液分析十一、尿液分析十一、尿液分析仪仪原理原理原理原理•尿液分析仪的测试原理主要有以下三个方面•尿液分析仪的试剂带原理•尿液分析仪测量原理•尿液分析仪计算原理89 1 11 1、、、、试剂带试剂带原理原理原理原理•多联试剂带是将多种项目的试剂块集成在一个试剂带,使用多使用多联试剂带,,浸入一次尿液可同浸入一次尿液可同时测定多个定多个项目目图为德国宝灵曼公司的COMBUR TEST试剂带•它采用了多多层模模结构构•尼尼龙膜膜:防止大分子物质对反应的污染;90 •绒制制层:包括碘酸盐层和试剂层:•碘酸碘酸盐层:可以破坏维生素C等干扰物质,•试剂层:含有试剂成分,主要与尿液中测定物质发生化学反应,产生颜色变化;•吸水吸水层:可使尿液均匀快速的浸入,并能抑制尿液流到相邻的反应区;•塑料底塑料底层:作支持体。

      1 11 1、、、、试剂带试剂带原理原理原理原理91 多多多多联试剂带结联试剂带结构构构构图图92 u试剂带中还有另一个垫-“补偿区”,作为尿液本底颜色,以对有色尿及仪器变化等产生的误差进行补偿•试剂带按一定的顺序排列,各个厂家不一样,尿液中的各种成分被各测定块吸收,引起化学反应及酶反应,使试剂块颜色根据尿液中各成分的比例而变化1 11 1、、、、试剂带试剂带原理原理原理原理93 •此类仪器一般用微电脑控制,将浸有尿液的试剂带放在仪器比色槽内,试带上已产生化学反应的各种试剂垫被光源照射,其反射光被球面球面积分分仪接收,将试剂块反射光量值与空白块反射光量值进行比较,通过计算机求出反射率,换算成浓度值,便可由分析仪打印出半定量的数值2 22 2、、、、测测￿ ￿￿ ￿量量量量￿ ￿￿ ￿原原原原￿ ￿￿ ￿理理理理94 尿液分析尿液分析仪原理原理图95 1 11 1、、、、8 88 8项项尿液分析尿液分析尿液分析尿液分析仪仪•代表代表仪器器有日本或国产的MA-4210型•检测项目目:尿蛋白、尿糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿隐血、尿亚硝酸盐 96 2 22 2、、、、9 99 9项项尿液分析尿液分析尿液分析尿液分析仪仪•代表代表仪器器有德国产的RL-9型•检测项目目:尿蛋白、尿糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿隐血、尿白尿白细胞胞。

      97 3 33 3、、、、10101010项项尿液分析尿液分析尿液分析尿液分析仪仪•代表代表仪器器有德国的MIDITRON型或美国的CLINITEK200型•检测项目目:蛋白、糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿红细胞、白白细胞、尿比密胞、尿比密 98 4 44 4、、、、11111111项项尿分析尿分析尿分析尿分析仪仪•代表代表仪器器有美国的CLINITEK500型、长春迪瑞、韩国盈东、unitest•检测项目目:蛋白、糖、PH、酮体、尿胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿隐血、白白细胞、比密、胞、比密、维生素生素C C; 99 100 尿干化学尿干化学试带检测原理原理项目 英文缩写 反应原理 参考结果 pH pH 酸碱指示剂法 随机尿:pH 4.5~8.0 比重 SG 多聚电解质离子解离法 1.015~1.025 蛋白质 PRO pH指示剂蛋白质误差法 阴性 葡萄糖 GLU 葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法 阴性 胆红素 BIL 偶氮反应法 阴性 尿胆原 URO 醛反应、重氮反应法 阴性或弱阳性 酮体 KET 亚硝基铁氰化钠法 阴性 亚硝酸盐 NIT 亚硝酸盐还原法 阴性 隐血或红细胞 BLD 血红蛋白类过氧化酶法 阴性 白细胞 LEU 酯酶法 阴性 101 感感谢您的您的阅览【此课件下载后可自行编辑修改关注我￿￿每天分享干货】 。

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