7500荧光定量PCR仪使用说明.doc

7500荧光定量PCR仪使用说明注意事项：l 实验过程必须戴干净的一次性乳胶手套进行操作l PCR反应所用的96孔板、8联管或单管必须为ABI7500专用，凸盖PCR管禁止使用l 使用8联管两侧需用空管支撑，使用单管四角需用空管支撑，以防止板槽受力不均l 实验数据用光盘刻录，禁止U盘拷取，数据可暂存于本机电脑硬盘中，各实验室D盘中有指定文件夹，中心外部人员数据存于FUWU文件夹下的子文件夹中操作步骤Ø 开机依次打开电脑显示屏、主机，输入开机密码“7500”当仪器只显示Power状态指示灯时，方可按压托盘以打开它待电脑启动稳定后，按压7500仪器电源按扭，等待仪器启动（约30 s） Ø 放入反应板按压此处注：关闭仪器托盘时，应按一个角度推压托盘的右侧 / （以下过程按字母顺序a→q进行操作）Ø 创建反应板文件双击电脑桌面上SDS软件图标 打开SDS软件；在对话框中选择Create New Document … ，或选择菜单栏File > New；c. 单击Nextb. 为反应板文件命名a. 从 Assay下拉列表中选择反应板类型反应板文件类型有以下几种：1. Relative Quantification (ddCt) Plate（相对定量）2. Absolute Quantification (Standard Curve)（绝对定量，标准曲线）3. Allelic Discrimination（等位基因鉴别）4. Plus/Minus（阳性/ 阴性实验）f. 单击Nextd. 选择要添加到反应板文件的探针（引物），单击Add添加选中探针e. 如果在列表中未列出所需探针，请单击New Detector创建新探针Ø 为每个反应孔指定探针和任务g. 选取探针相同的反应孔h. 点击反应孔对应的探针。

i. 单击 Task栏的下边指定探针任务j. 选择 Use （使用）k. 单击 Finish （完成）jkgihØ 为反应孔设置样品名l. 选取反应孔，直接输入相应样品名（也可右键，调出反Well Inspector对话框，在Sample Name中进行修改）设定PCR循环参数、运行程序m. 选择 Instrument选项卡，默认条件下显示标准PCR条件，可跟据实验具体情况修改；n. 单击Add Dissociation Stage添加溶解曲线循环；o. 修改PCR反应体积；p. 将反应板文件保存至指定路径q. 点击Start运行程序qmopnØ 结束实验1. 实验结束后关闭软件确认反应板文件数据已保存）2. 打开拖盘，将反应板取出，关闭拖盘3. 按下7500仪器电源开关关闭机器4. 关闭电脑及显示屏请严格按照仪器使用说明进行操作，如有不明之处或遇其他情况请及时联系仪器负责人.谢谢配合！！ 温馨提示：最好仔细阅读后才下载使用，万分感谢！5. 登记仪器使用情况。