第一组 何首乌设计性试验.docx

何首乌不同炮制品的总恵醌含量研究【实验目的】1. 掌握何首乌的不同炮制方法2. 通过对何首乌炮制前后所含总蒽酉昆含量的变化研究，了解何首乌炮 制以后功效改变以及泻下作用减弱的原理实验原理】何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum mul tiflorum Thunb. 的 干燥块根生首乌能解毒，散结，滑肠致泻炮制后味变甘苦，性温， 功效长于补肝肾，强筋骨，益精血，所以其制品为常用滋补药之一现代研究表明，何首乌含蒽醌类、二苯乙烯苷类、磷脂类、 糖类等化合物，其中蒽醌类化合物为其主要有效活性成分，具有降 血脂、抗衰老、增强免疫功能等药理作用制首乌为生首乌经蒸法 炮制晒干后所得的炮制品其中生品中结合蒽醌具有泻下作用，经炮 制之后结合蒽醌水解生成游离蒽醌，从而使其泻下作用降低目前生 首乌和制首乌在临床上的用量均较大，两者性味相似但功效主治却有 很大差别，炮制常会使药材的有效成分及其含量发生变化为考察何首乌炮制前后主要有效成分总蒽醌的变化，本文采用紫 外分光光度法测定其炮制前后总蒽醌的含量，为首乌药材的质量控制 及临床应用提供实验依据实验材料】1. 仪器 紫外可见分光光度计、电子分析天平、超声波清洗仪、高 速离心机、烧杯、电炉、25ml容量瓶、量筒、烧杯、不锈钢容器、 移液管（0.5ml、1ml、5ml）、洗耳球2. 药品 1, 8 —二羟基蒽醌对照品、生首乌、黑豆、95%乙醇【实验内容】一、 何首乌的炮制1. 生首乌：去原药材，除去泥沙，杂质，洗净，切厚片或者块状, 干燥。

2. 黑豆制首乌：取何首乌片10克，用黑豆汁拌匀，置非铁质的适 宜容器内，炖至汁液吸尽并呈棕褐色时，取出干燥3. 蒸首乌：取何首乌10克，置非铁质的容器中，隔水清蒸至内外 均呈棕褐色，取出干燥黑豆汁的制备：取黑豆10kg，加水适量，约煮4个小时，熬 汁约15kg；黑豆渣再加水煮3个小时，熬汁约10kg，合并约25kg）二、 炮制前后何首乌中总蔥酿类成分的测定1、对照品溶液的制备和标准曲线的绘制精密称取干燥至恒重的1，8—二羟基蒽醌对照品2.5mg,置25mL容量瓶中，加95%乙醇溶解，并定容至刻度，得含1,8 — 二 羟基蒽醌浓度为0.1mg /mL的对照品溶液，备用精密量取上述对照 品溶液 0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.20mL，分别置于 25mL 量 瓶中，加95%乙醇定容至刻度，摇匀，以95%乙醇溶液为空白对照， 于224nm （查文献知1，8—二羟基蒽醌的最大吸收波长是244nm）波 长处测定吸光度得知吸光度Y与浓度X的直线回归方程2、供试品溶液的制备和总恵酿含量的测定精密称取干燥至恒重的生、制首乌各1.0g,置具塞锥形瓶中，分 别加入15mL 95%乙醇，在200W功率下超声10min后，滤过，残 渣再加同浓度乙醇10mL超声15min，滤过，合并两次滤液，摇匀 3000r /min离心5min，精密吸取上清液O.lmL于25mL量瓶中，用 95%乙醇定容至刻度，摇匀，即得。

何首乌总恵酿含量测定取生首乌和制首乌供试品溶液各5份，按上述方法测定吸光度, 以95%的乙醇作为空白对照，在相同的实验仪器和检测波长下测定其 吸光度，从标准曲线上求得各炮制品中总恵醌含量，从而求出百分含 量百分含量=(CxT)/(Wx 1000) x 100%式中：C:由标准曲线求得的量(mg/ml) T:稀释度W:样品的重量【实验结果】以何首乌及其炮制品中1，8—二羟基恵醌为指标测定 吸光度，由回归方程计算总恵醌的含量样品 总恵醌含量(mg/g) 平均含量(mg/g) RSD (%)生首乌黑豆制首乌蒸首乌【实验可行性】直接紫外分光光度法即不加任何显色剂直接测定植物中有效成 分含量的紫外分光光度法，其原理是基于样品中被提取出的蒽醌类化 合物在（222 土 3） nm波长范围处产生最大吸收，而此吸收峰正是 蒽醌类化合物的特征强吸收峰紫外分光光度法可适用于测定天然植 物药中的总蒽酿含量蒽酿类化合物的含量测定常采用比色法、差示 分光光度法、薄层扫描法、毛细管电泳法、高效液相色谱法等方法其 中比色法更为常用但这些方法存在样品前处理复杂实验影响因素多 实际操作繁琐及成本较高等缺点本实验建立了何首乌中总蒽醌含量 的直接紫外分光光度法。

实验证明该方法前处理简便，定量分析结果 良好且经济实惠，可作为何首乌中总蒽醌含量的测定方法预期结果】生品中何首乌的总蒽醌含量明显高于炮制品猜测在炮制过程中，结 合型蒽醌转变成游离型蒽醌，导致总蒽醌的含量下降。