阿司匹林实验报告上交版.docx

.阿司匹林肠溶片药物分析学号：2021515086**：王智存班级：药学三班一、实验目的①通过对阿司匹林肠溶片的药物分析，培养药品质量全面控制的观念，掌握药物分析研究的方法和技能②掌握药物的鉴别、检查、含量测定的规律和方法③掌握药物质量研究中的现代分析技术与进展二、实验原理鉴别:显色法杂质检查:比色法两步滴定:将一种准确浓度的试剂溶液，滴加到被测物质的溶液中，直到所加的试剂与被测物质按化学计量定量反响为止，根据试剂溶液的浓度和消耗的体积，计算被测物质的含量紫外分光光度法：物质分子对紫外光区〔波长为200-400nm〕和可见光区(波长为400-760nm)的单色光的辐射吸收有不同的特性HPLC法：混合物中各组分的色谱行为差异，将各组分从混合物中别离后再选择性对待测组分进展分析三、实验内容(阿司匹林肠溶片标示量：25mg)㈠阿司匹林肠溶片的鉴别1. 性状鉴别本品为肠溶包衣片，除去包衣后显白色。

2.化学鉴别I．取本品的细粉0.3090g(约相当于阿司匹林 0.1g)，加水10ml,煮沸，放冷，加三氯化铁试液(9g→100ml)1滴,应显紫堇色同时用阿司匹林对照品作对照，并做阴性干扰试验，对照品所产生的颜色与样品一样，阴性无干扰II．取本品的细粉1.5463g〔约相当于0.5g〕，加碳酸钠试液(5g→100ml)10ml，煮沸2 分钟后，放冷，加过量的稀硫酸(浓硫酸57ml→1000ml)，即析出白色沉淀，并发生醋酸的臭气.3.薄层色谱鉴别①供试品溶液的制备：取本品细粉0.1546g(约相当于阿司匹林50 mg)，加乙醇5 ml，振摇溶解，静置，取上清液，即得②参比物溶液的制备：取复方甲恶唑细粉0.2046g，研细，加乙醇19.45 ml 溶解，静置，取上清液即得③对照品溶液制备：取阿司匹林对照品50mg，加乙醇5ml,振摇溶解，静置，取上清液，即得④取参比物溶液，对照品溶液和供试品溶液各2 μl，点样于硅胶GF254板〔快检专用薄层板〕，将正己烷-乙酸乙酯-冰乙酸〔15∶5∶1〕混合液8～10 ml 倒入层析缸中，将点样完毕的薄层板放入，待展开前沿至距原点8 cm 处，将板取出，待展开剂挥尽，置于254 nm 紫外光灯下观察，计算比移值。

二） 阿司匹林肠溶片的杂质检查1、游离水杨酸 取本品细粉0.3880g,用乙醇30ml分次研磨，并移入100ml容量瓶中，充分振摇，用水稀释至刻度，摇匀，立即滤过，精细量取滤液6ml，置50ml纳氏比色管中，用水稀释至50ml，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液3ml，摇匀，30秒内如显色，与对照液〔精细量取0.01%水杨酸溶液4.5ml，加乙醇3ml，0.05％酒石酸溶液1ml，用水稀释至50ml，再加上述新制的稀硫酸铁铵溶液3ml，摇匀〕比拟，不得更深.（三） 阿司匹林肠溶片的含量测定 1.两步滴定法 取本品细粉0.6121g，研细，用中性乙醇70ml分数次研磨，并移入100ml容量瓶中，充分振摇，再用水适量洗涤研钵数次，洗液合并于100ml容量瓶中，超声处理2min，再用水稀释至刻度，摇匀，滤过，精细量取滤液10ml(约相当于阿司匹林0．3g)，置锥形瓶中，加中性乙醇20mL，振摇，使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液(0.1 mol/L)至溶液显粉红色，再精细加氢氧化钠滴定液(0.1 mol/L)40mL置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液(0.05 mol／L)滴定，并将滴定结果用空白实验校正。

每l ml氢氧化钠滴定液(0.1 mol／L)相当于18.02mg的C9H8042、紫外分光光度法1〕测定波长的选择精细称取阿司匹林对照品适量，加乙醇溶解成含阿司匹林 80µg/mL 的溶液，在 240~330 nm 波长范围内扫描，得紫外吸收图谱由图谱可见，阿司匹林对照品溶液在 276 nm 的波长处有最大吸收峰，且在此波长处辅料无干扰，应选定 276 nm 的波长处为测定阿司匹林的波长2〕线性关系考察精细称取阿司匹林对照品 250 mg 置于 250 mL 量瓶，加乙醇溶解，摇匀，使成 1000 µg/mL 的对照品溶液精细吸取溶液 2.0、3.0、4.0、5.0 和 6.0 mL，分置于 50 mL 量瓶中，加乙醇稀释至刻度，分别制成 40，60，80，100 和 120 µg/mL 的对照品溶液，以乙醇为空白在 276 nm 波长处测定吸收度，以浓度 C 与相应的吸光度 A 之间的关系绘制标准曲线，进展线性回归，3〕样品测定取阿司匹林肠溶片细粉0.6184g(约相当于阿司林 200 mg)，置 250 mL 量瓶中，加乙醇适量，振摇使溶解并定容，摇匀，滤过精细量取续滤液 5 mL 置 50 mL 量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀。

在 276 nm 的波长处测定吸光度.3、HPLC法1)仪器与试药仪器:HP1100 高效液相色谱仪；岛津 UV-2550 紫外分光光度仪；AG285 电子平试药:阿司匹林对照品；样品；甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯2)方法与结果2.1 色谱条件色谱柱：Agilent Eclipse XDB-C18〔4.6 mm×250 mm，5 μm〕；流动相：甲醇-1%冰醋酸溶〔43:57〕；检测波长：276 nm；流速：1 ml/min；柱温：30℃；进样量：20 μl；理论板数按阿司匹林峰计算不低于 5 0002.2 对照品溶液的制备取阿司匹林对照品 25 mg，精细称定，置 50 ml 量瓶中，加甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品贮备液；精细量取对照品贮备液 10 ml，置 100 ml 量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液2.3 供试品溶液的制备取本品适量，除去包衣，混合均匀，研细，精细称取适量〔约相当于阿司匹林 0.2 g〕，置100ml容量瓶中，加甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，再精细量取 5 ml，置200 ml容量瓶中，加流动相溶液(甲醇-1%冰醋酸溶〔43:57〕)稀释至刻度，摇匀，用 0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液即得。

2.5线性关系考察取阿司匹林对照品 16 mg，精细称定，置 50 ml 量瓶中，加甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，精细量取 0.5、2.5、5.0、7.0、9.0 ml 分别置 50 ml 量瓶中以流动相溶液稀释至刻度，精细量取各浓度对照品溶液 20 μl，注入液相色谱仪，测定色谱峰面积以对照品进样量〔μg〕为横坐标，峰面积为纵坐标，计算回归方程，结果说明阿司匹林进样量在 3.242～58.356 μg范围内，呈良好的线性关系2.7)样品的测定分别取对照品溶液和供试品溶液20uL，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积外标法计算标示量的百分含量.四、实验结果〔一〕阿司匹林肠溶片的鉴别1. 水杨酸反响：显紫堇色，与药典记载一致证明供试品确实为阿司匹林肠溶片2. 乙酰水杨酸的水解反响：析出白色沉淀，并放出醋酸的臭味，与药典记载一致证明供试品确实为阿司匹林肠溶片3. 薄层色谱鉴别：比移值第一组供试品0.53对照品0.52参比0.39第二组供试品0.54对照品0.54参比0.44供试品与对照品的比移值根本一样，证明供试品中确实为阿司匹林肠溶片二〕阿司匹林肠溶片的杂质检查游离水杨酸的检查：对照品溶液的颜色比供试品溶液的颜色深。

证明供试品中游离水杨酸的含量未超过杂质限量〔三〕阿司匹林肠溶片的含量测定1.两步滴定法计算公式：百分标示量=〔:V-V0 T:滴定度；F:校正因子；：平均片重；W：取样量；B：标示量〕：F==1.149;T=18.02mg;工程消耗硫酸体积(mL)百分标示量(%)平均百分标示量(%)供试品111.0073.276.00211.1260.7310.8094.1空白11.702、紫外分光光度法浓度(ug/mL)吸光度A1吸光度A2吸光度A3吸光度均值400.3780.3790.3800.379600.4550.4550.4520.454800.5720.5720.5830.5761000.6080.6080.6090.6081200.8230.8250.8250.824计算公式: 百分标示量=〔C：浓度；D:稀释倍数；：平均片重；W:取样量；B：标示量〕吸光度(A)浓度(ug/mL)百分标示量(%)平均百分标示量(%)供试品10.53874.593.12592.96供试品20.53774.392.875供试品30.53774.392.875供试品中阿司匹林的百分标示量为92.96%。

3、HPLC法浓度(ug/mL)峰面积3.22——16.125322432.247043345.084389457.96107313线性关系考察结果:阿司匹林在取样范围内没有良好的线性关系，所做数据不能使用五、 讨论与反思1) 薄层色谱鉴别过程中，第一组对照品与供试品的比移值并不完全一样，而第二组的却一样，后来查看薄层板的过程中发现其溶剂前沿并没有薄层板底部平行，因此出现操作错误理论上两者的比移值应该是完全一样的2) 含量测定三种方法的平行比拟I、两步滴定:此法所用仪器价廉易得，操作简单快速，且影响本法的试验条件与环境因素较少，但是人为误差比拟大本实验所需的中性醇、滴定液、酚酞试液均为实验组不同组员配置，并非为标准试剂，存在误差在所难免，且每个人对滴定终点颜色的判断不一，会导致误差出现因为本次试验的供试品为阿司匹林肠溶片，而两步滴定的专属性较差，对于构造相近的有关物质或其他干扰测定的杂质缺乏选择性，肠溶片的包衣、辅料等物质会对滴定产生干扰，因此出现误差较大综上所述，在阿司匹林肠溶片合格的前提下所测的百分表示量偏低原因可能为：①所用试剂配置未到达标准要求②片剂中相关辅料对滴定产生干扰③实验组不同人员操作误差II、紫外分光光度法：此法所用仪器价格适中，操作简单，易于普及。

而且此法的灵敏度较高，对较低浓度的分析比拟准确，相对误差较小实验组人员将测试所需供试品溶液配置完成后只用了半小时就完成了紫外的数据测量本法出现人为误差的可能性较小，方法简便易行使用此法测得的百分标示量为92.96%，在正常的范围内III、HPLC法：此法的灵敏度高，浓度再低也可以检测出，而且可以有效的别离出样品中的其他物质，具有较高的专属性，可实现对待测组分的选择性检验但是此法所需仪器昂贵，不易普及测量过程中对操作的专业性要求较高，操作步骤繁琐，稍许操作不当便容易前功尽弃，要求试验的连贯性，耗时较长实验组成员用了两天的时间才学会了仪器的操作，但所得的实验数据并没有良好的线性关系，不能。