仪器分析作业：荧光、紫外、红外.doc

傅立叶变换红外光谱仪曹文芳 1014061420一、仪器结构傅立叶变换红外光谱仪的工作原理图固定平面镜、分光器和可调凹面镜组成傅立叶变换红外光谱仪的核心部件－迈克尔干涉仪由光源发出的红外光经过固定平面镜反射镜后，由分光器分为两束：50％的光透射到可调凹面镜，另外 50％的光反射到固定平面镜可调凹面镜移动至两束光光程差为半波长的偶数倍时，这两束光发生相长干涉，干涉图由红外检测器获得，经过计算机傅立叶变换处理后得到红外光谱图IRPresting-21 型傅立叶变换红外光谱仪具 300 入射迈克尔逊密闭型干涉仪，单光束光学系统，空冷陶瓷光源，镀锗 KBr 基片分束器，温度可调的 DLATGS检测器，波数范围 7,800～350cm-1，S/N 大于 40,000∶1（4 cm -1，1 分钟，2,100 cm-1 附近， P—P） ，具有自诊断功能和状态监控器可收集中红外、近红外、远红外范围光谱二、实验原理原理概述：红外吸收光谱分析方法主要是依据分子内部原子间的相对振动和分子转动等信息进行测定一束具有连续波长的红外光通过物质，物质分子中某个基团的振动频率或转动频率和红外光的频率一样时，分子就吸收能量由原来的基态振(转)动能级跃迁到能量较高的振(转) 动 能级，分子吸收红外辐射后发生振动和转动能级的跃迁，该处波长的光就被物质吸收。

所以，红外光谱法实质上是一种根据分子内部原子间的相对振动和分子转动等信息来确定物质分子结构和鉴别化合物的分析方法将分子吸收红外光的情况用仪器记录下来，就得到红外光谱图红外光谱图通常用波长(λ)或 波数(σ)为横坐标，表示吸收峰的位置，用透光率(T%)或者吸光度(A) 为纵坐标，表示 吸收强度三、操作步骤1 、开机前准备开机前检查实验室电源、温度和湿度等环境条件，当电压稳定，室温为21±5℃ 左右，湿度≤65%时才能开机2、开机始终保持红外光谱仪右下侧黄色灯亮（除湿器指示灯） ；开机时，首先打开右下侧仪器电源开关，此时绿灯亮，稳定半小时，使得仪器能量达到最佳状态开启电脑，点击用户名 Administrator，输入密码，并运行仪器操作平台IRsolution 软件，status 栏显示仪器自检，约十几秒后窗口右方出现 4 个绿色方块，自检完成，表示仪器正常，可以开始使用3 、制样固体样品（溴化钾压片法）：取预先烘干的固体样品 1~1.5 mg 与 KBr 200~300 mg（样品与 KBr 的比约为 1:200）于玛瑙研钵中，研磨成混合均匀的粉末（粒度小于 2 微米） 如果 KBr 和固体样品不够干燥，研磨时要用红外灯烘干。

用小药匙转入制片模具中，于油压机 6~8 吨压力下保持约 5 分钟，撤去压力后取出制成的半透明薄片，装入样品架液体样品（液膜法）：取两片氯化钠盐片，用洁净的棉球沾少许溶剂将表面擦干净，待溶剂挥发后，滴一小滴试样在盐片上，将另一盐片压在上面，使试样均匀铺散在盐片中间形成液膜，中间不能有气泡然后将其装入可拆式夜池架中，轻轻用螺丝固定好，插入仪器试样池中测绘谱图4．扫描和输出红外光谱图测试红外光谱图时，先在 measure 模式下按 BKG 键扫描背景（用 KBr 片做背景） ，一般背景信号强度在 80%以上，否则能量太低，样品信号噪音大；在Comment 栏中输入备注，在 Data file 中选择样品谱图存储路径（E 盘个人文件夹） ，按 sample 键扫描样品信号，得到样品红外光谱图;根据需要保存红外光谱图，或者导出 ASC 码文本文档，或打印5．关机（1）关机时，先关闭 IRsolution 软件，关闭电脑主机，再关闭光谱仪电源，盖上仪器防尘罩 （2）在记录本记录使用情况6.注意事项（1）保持实验室整洁和干燥，不得在实验室内进行样品化学处理，实验完毕即取出样品2）样品室窗门应轻开轻关，避免仪器振动受损。

3）眼睛不要注视激光光源，以免受伤害4）实验操作中，避免用手直接接触锭剂成型器表面，以防样品受潮，无法制样；要用镊子从锭剂成型器中取出压好的薄片，而不能用手拿，以免玷污薄片5）固体样品压片法时，试样量必须合适试样量过多，试样晶片太“厚” ，透光率差，导致收集到的谱图中强峰超出检测范围；试样量太少，晶片太“薄”，收集到的谱图信号信噪比差6）液体样品测定时，可拆式液体池的盐片应保持透明干燥，切不可用手接触盐片表面；盐片不能用水冲洗以试样溶于有机溶剂，制成 1~10%浓度的溶液，注入适宜厚度的液体池中测定；常用溶剂有二氯甲烷、四氯化碳、三氯甲烷、二硫化碳、己烷及环己烷等，不可用水做试样溶剂；使用完后，用相应溶剂立即将液体池清洗干净7）压片机下未放压片模具时，不能进行压杆操作，避免超出可操作范围8）压片完成后将试样配件，特别是压片模具擦拭干净，必要时用乙醇或水清洗干净并擦干，置干燥器中保存，以免锈蚀9）不得随意改变软件参数10）本仪器由专人保管，使用人员在上机前必须经过培训，待考核通过后，方可上机使用四、发展与应用傅立叶变换红外光谱仪是 20 世纪 70 年代发展起来的新一代红外光谱仪，红外光谱仪的发展经历了 3 个阶段：第一阶段是棱镜式红外分光光度计，它是基于棱镜对红外辐射的色散而实现分光的，其缺点是光学材料制造麻烦 ，分辨本领较低 ，而且仪器要求严格的恒温降湿；第二阶段是光栅式红外分光光度计，它是基于光栅的衍射而实现分光的，与第一代相比．分辨能力大大提高，且能量较高，价格便宜，对恒温、恒湿要求不高，是红外分光光度计发展的方向；第三阶段是基于干涉调频分光的傅立叶变换红外光谱仪，它的出现为红外光谱的应用开辟了新的领域。

红外光谱仪具有以下特点：一是扫描速度快，可以在 1s 内测得多张红外谱图；二是光通量大，可以检测透射较低的样品，可以检测气体、固体、液体、薄膜和金属镀层等不同样品；三是分辨率高，便于观察气态分子的精细结构；四是测定光谱范围宽，只要改变光源、分束器和检测器的配置，就可以得到整个红外区的光谱红外及拉曼光谱都是分子振动光谱通过谱图解析可以获取分子结构的信息任何气态、液态、固态样品均可进行红外光谱测定，这是其它仪器分析方法难以做到的由于每种化合物均有红外吸收，尤其是有机化合物的红外光谱能提供丰富的结构信息，因此红外光谱法是有机化合物结构解析的重要手段之一因此红外光谱仪广泛应用于有机化学、高分子化学、无机化学、化工、催化、石油、材料、生物、医药、环境等领域紫外-可见分光光度计一、仪器的类型和基本组成部分 1．仪器的分类 紫外-可见分光光度计按使用波长范围可分为：可见分光光度计和紫外-可见分光光 度计两类（统称为分光光度计） 前者的使用波长范围是 400～780 nm；后者的使用波长范围为 200～1000 nm可见分光光度计只能用于测量有色溶液的吸光度，而紫外-可见分光光度计可测量在紫外、可见及近红外光区有吸收的物质的吸光度。

紫外-可见分光度计按光路可分为单光束式及双光束式两类；按测量时提供的波长数又可分为单波长分光光度计和双波长分光光度计两类 2．仪器的基本组成部分 目前，紫外-可见分光光度计的型号较多，但它们的基本构造都相似，都由光源、单色器、样品吸收池、检测器和信号显示系统等五大部件组成，其组成框图见图 2-1 由光源发出的光，经单色器获得一定波长单色光照射到样品溶液，被吸收后，经检测器将光强度变化转变为电信号变化，并经信号指示系统调制放大后，显示或打印出吸光度 A（或透射比 τ） ，完成测定 （1）光源 光源是提供入射光的装置可见光区常用的光源为钨灯，可用的波长范围为 350~1000 nm；紫外光区常用的光源为氢灯或氘灯（其中氘灯的辐射强度大，稳定性好，寿命长，因此近年生产的仪器多使用氘灯） ，它们发射的连续波长范围为 180~360 nm2）单色器 单色器是将光源辐射的复合光分成单色光的光学装置单色器一般由狭缝、色散元件及透镜系统组成，其中色散元件是单色器的关键部件最常用的色散元件是棱镜和光栅（现在的商品仪器几乎都使用光栅） （3）吸收池 吸收池是用于盛装被测量溶液的装置一般可见光区使用玻璃吸收池，紫外光区使用石英吸收池。

紫外-可见分光光度计常用的吸收池规格有：0.5 cm、1.0 cm、2.0 cm 、 3.0 cm、5.0 cm 等，使用时，根据实际需要选择 （4）检测器 检测器是将光信号转变为电信号的装置常用的检测器有硒光电池、光电管、光电倍增管和光电二极管阵列检测器硒光电池结构简单，价格便宜，但长时间曝光易“ 疲劳 ”，灵敏度也不高光电管的灵敏度比硒光电池高光电倍增管不仅灵敏度比普通光电管灵敏，而且响应速度快，是目前高、中档分光光度计中最常用的一种检测器光电二极管阵列检测器是紫外-可见光度检测器的一个重要进展，它具有极快的扫描速度，可得到三维光谱图5）信号显示器 信号显示器是将检测器输出的信号放大并显示出来的装置常用的装置有电表指示、图表指示及数字显示等现在很多紫外-可见分光光度计都装有微处理机，一方面将信号记录和处理，另一方面可对分光光度计进行操作控制二、仪器工作原理 物质的紫外-可见光谱直接地反映了物质分子的电子跃迁，与物质的结构直接相关，不同的物质其紫外-可见吸收光谱不同而吸收强弱又与吸光物质的量有关因此可以由物质光谱的特异性对物质进行定性分析，并根据吸收强度对物质作定量测试在一定的条件下，吸光物质对单色光的吸收符合朗伯-比尔定律，即 A=εbc上式中 A 为吸光度；b 为光程长度（即吸收池厚度） ，单位为 cm；c 为吸光物质的物质的量浓度，单位为 mol/L；ε 为摩尔吸光系数，单位为 L/(mol∙cm)；由上式可知，当 b、ε 一定时，吸光物质的吸光度为其浓度 c 的单值（线性）函数。

因此对吸光物质的浓度的测试可直接归结为对吸光度 A 的测试 三、UV-3600 紫外分光光度计基本操作步骤1． 首先打开紫外分光光度计的电源，然后再打开计算机的电源2． 双击桌面上的“UVProbe”快捷键，进入主菜单3． 单击菜单中下部“Connect”图标，紫外分光光度计开始自检4． 待所有自检项目结束（各项自检条目均亮绿灯）后，单击“OK” 图标5． 于仪器检测室内放入盛有相同检测媒介（不含样品）的对比池（靠内）和样品池（靠外）， 单击“Baseline”图标进行背景扫描6． 待背景扫描结束后，取出样品池，加入待检测样品，然后放回检测室，单击“Auto Zero”图标进行调零7． 待调零结束后，单击“Start” 图标开始扫描8． 扫描结束后，屏幕会跳出“New Data Set”对话框，请在“File”栏自己建立路径和文档名，然后单击“OK”图标接着单击菜单左上角的 “Save”图标，最终完成文件的存储如要转换成ASCII码文件，请单击菜单左上角的“File”图标，然后在其下拉菜单中单击“Save as...” 图标，跳出“Save Spectrum File”对话框，单击 “保存类型(T)”栏，并在其下拉菜单中选择“Data Print Table(*.txt)”这一栏，自己给此文件建立路径和名字后，单击“保存(s)”键即完成ASCII码文件的转换工作。

9． 取出样品池，经处理后进行下一次实验10． 多次测样时，若检测媒介未变，请重复6-9操作步骤；若检测媒介已变，请重复5-9操作步骤11． 测样结束后，先关掉此软件，然后关掉计算机电源，最后关掉紫外分光光度计电源若该计算机另有它用，可同时按住[Alt]+[F4]键，然后按[Enter]键结束程序后再关掉紫外分光光度计电源12． 实验结束后，用重铬酸钾洗液浸泡样品池两分钟，接着用去离子水洗涤干净，然后用分析纯丙酮洗涤，在室温下吹干后放入池盒中，以方便下一次实验的进行PL 荧光分光光度计一、仪器结构由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中。