OperationalPrincipleofDiodeArrayDetector二极管阵列检测器课件.ppt

药学院药学院College of Pharmacy不积跬步，无以致千里；不积小流，无以成江海不积跬步，无以致千里；不积小流，无以成江海 仪器分析实验 王王 芳芳fwang@实验七实验七高效液相色谱法（高效液相色谱法（HPLCHPLC）分离巴比妥与苯巴比妥）分离巴比妥与苯巴比妥 实验目的实验目的基本原理基本原理数据处理数据处理 实验步骤实验步骤9/13/2024 2自强自强 弘毅弘毅 求是求是 拓新拓新药物分析药物分析血药浓血药浓度分析度分析鉴定鉴定手性手性分离分离杂质杂质检查检查 含量含量测定测定HPLC新药开发、药品检验、新药开发、药品检验、生物样品分析等生物样品分析等 生物医药、化生物医药、化妆品、食品等妆品、食品等9/13/2024 3自强自强 弘毅弘毅 求是求是 拓新拓新1. 1. 实验目的实验目的①①学习学习高效液相色谱仪高效液相色谱仪的结构以及操作流程的结构以及操作流程②②了解了解反相液相色谱法反相液相色谱法药物分离的药物分离的基本原理基本原理③③掌握用反相色谱法药物分离的掌握用反相色谱法药物分离的方法方法9/13/2024 4自强自强 弘毅弘毅 求是求是 拓新拓新2. 2. 基本原理基本原理①①分离原理：分离原理：分配系数分配系数②②定量依据：外标法定量依据：外标法③③ 峰面积峰面积③③反相液相色谱：反相液相色谱： 固定相固定相< < 流动相，流动相， 疏水性强的保留时间长！疏水性强的保留时间长！ 9/13/2024 5自强自强 弘毅弘毅 求是求是 拓新拓新HPLCHPLC结构结构: : 输液系统; 进样系统; 分离系统; 检测系统; 梯度洗脱装置; 数据处理系统9/13/2024 6自强自强 弘毅弘毅 求是求是 拓新拓新药学院药学院College of Pharmacy不积跬步，无以致千里；不积小流，无以成江海。

不积跬步，无以致千里；不积小流，无以成江海 六通阀六通阀检测器检测器色谱柱色谱柱准备（准备（loadload））工作（工作（injectinject））9/13/2024 8自强自强 弘毅弘毅 求是求是 拓新拓新ODS十八烷基硅烷键合硅胶十八烷基硅烷键合硅胶 C18 色色谱谱柱柱是是色色谱谱分分离离的的核核心心色色谱谱柱柱管管多多由由不不锈锈钢钢制制成成，，内内装装一一定定的的固固定定相相色色谱谱往往长长一一般般10～～30cm，，内内径径2～～5mm9/13/2024 9自强自强 弘毅弘毅 求是求是 拓新拓新 Variable Wavelength UV Detector 可变波长紫外检测器可变波长紫外检测器9/13/2024 10自强自强 弘毅弘毅 求是求是 拓新拓新 Operational Principle of Diode Array Detector 二极管阵列检测器二极管阵列检测器9/13/2024 11自强自强 弘毅弘毅 求是求是 拓新拓新3. 3. 实验步实验步骤骤①①开启仪器及电脑，设置参数。

开启仪器及电脑，设置参数②②待待仪仪器器稳稳定定后后，，分分别别用用注注射射器器进进混混样样各各2020微微升升，，记记录录保保留留时时间间，，峰峰面面积，半峰宽积，半峰宽③③进未知样进未知样2020微升，记录保留时间微升，记录保留时间④④冲洗色谱柱，关闭仪器冲洗色谱柱，关闭仪器准备准备9/13/2024 12自强自强 弘毅弘毅 求是求是 拓新拓新4. 4. 数据处理数据处理•以标准物的保留时间为基准，给未知样品各组分定性•根据标准物的峰面积，估算未知样品中相应组分的含量•计算分离度Rs9/13/2024 13自强自强 弘毅弘毅 求是求是 拓新拓新1.解释未知试样中各组分的洗脱顺序2.试述正相色谱基本原理及应用思考题思考题9/13/2024 14自强自强 弘毅弘毅 求是求是 拓新拓新Thank you!9/13/2024 15自强自强 弘毅弘毅 求是求是 拓新拓新。