医院检验中心血小板糖蛋白测定操作规程.doc

医院检验中心血小板糖蛋白测定操作规程 CD41 / CD61 （GPⅡb / Ⅲa复合物） CD42a / CD42b （GP Ⅰb / Ⅸ 复合物） CD36 / TSP （GPⅣ / 凝血酶敏感蛋白） CD31 （GPⅡa）（1）试剂1）CD41 P Cat NO 14162）CD61 F Cat NO 17583）CD42a F Cat NO 17574）CD42b P Cat NO 14175）CD31 F Cat NO 14316）CD36 F Cat NO 07657）TSP P Cat NO 14998）同型对照 F IgG1 / P IgG1 （CD42A为IgG 2a F对照）（2）方法1）血小板固定：EDTA K2 抗凝全血500转/分钟，离心3-5分钟。

取富 含血小板血浆200μl加入1ml TEN 中，吸取200μ2%多聚甲醛中，室温放置15分钟2）加单抗于下列试管底部<1> CD41 P / CD61 F 各加5μl<2> CD42b P / CD42a F 各加5μl<3> TSP P / CD36 F 各加5μl<4> cd31 F 各加5μl<5> 同型对照 10μl 必要时加IgG2a f/IgG P 10μl(用于CD42a/CD42b对照)3）各加固定血小板50μl于上述试管中，室温暗处放置15分钟4）加TEN缓冲液ml于上述各试管中混匀5）在FCM仪上计数10000个以上的血小板，记录各自的百分率及平均荧光强度、荧光峰值阴性对照 控制在0.5%左右）（3）参考范围 CD41 87.1 — 100% CD61 92.5 — 100 % CD42a 84.9 — 100% CD42b 92.0 — 100 % CD42a/CD42b 84.1— 100% CD36 73.3 — 91.3% CD41 /CD61 92.1 — 100% TSP 61.0 — 78 % CD31。