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大肠杆菌基因工程菌常用类型.docx

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  • 卖家[上传人]:hs****ma
  • 文档编号:414609169
  • 上传时间:2023-02-12
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    • 1、 大肠杆菌DH5a菌株DH5a是世界上最常用的基因工程菌株之一由于DH5a是DNA酶缺陷型菌株,有利于 基因克隆,保存质粒,但该菌株的蛋白酶没有缺陷,表达的蛋白容易被降解,因此通常不作 为表达菌株E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的B-半乳糖苷酶 氨基端实现a-互补可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株基因型:F-, ©80dlacZAM15, A (lacZYA-argF)U169, deoR, recAI, endAI, hsdR17(rk-, mk+), phoA, supE44,入thi-1, gyrA96, relA12、 大肠杆菌 BL21(DE3) 菌株该菌株用于咼效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因 T7噬菌体RNA聚合酶位于入噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上该菌适合表达 非毒性蛋白基因型: F-, ompT, hsdS(rBB-mB-), gal, dcm(DE3)3、 大肠杆菌BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够 降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。

      该菌适合表达毒性蛋白和非毒性 蛋白基因型: F-, ompT hsdS(rBB-mB-), gal, dcm(DE3, pLysS , Camr4、 大肠杆菌JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于 载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZAM15进行a -互补,从而显示B -半乳糖苷 酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株基因型: recA1, endA1, gyrA96, thi-1, hsdR17, supE44, relA1,A(lac-proAB) /F' [traD36, proAB+, lacIq, lacZA M15]5、 大肠杆菌TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传基因型:F- , mcrA A (mrr-hsd RMS-mcrBC), ©80 , lacZAM15,AacX74, recA1 ,araA 139A (ara-leu)7697, galU ,galK ,rps, (Strr) endA1, nupG6、 大肠杆菌HB101菌株 该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验。

      基因型: supE44,hsdS20(rB-mB-),recA13,ara-14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20, xyl-5,mtl-1,leuB6,thi-17、 XL10-Gold 菌株:所制备的感受态细胞是目前转化效率最高的感受态细胞,缺失几乎 所有已知的限制酶切系统;同时缺失核酸内切酶(endA),提高了质粒DNA的产量和质量;重 组酶缺陷型(recA)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA的稳定性,提高感受态转 化效率及大质粒转化能力的宿主菌基因型。

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