实验六双波长分光光度法测定.ppt

单击此处编辑母版标题样式,,,*,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,实验六 双波长分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲恶唑的含量,,一、实验目的,,,1．掌握双波长分光光度法测定原理2．学习,双波长分光光度法在复方制,,剂分析中的应用复方磺胺甲噁唑片的处方为：,,磺胺甲噁唑（SMZ） 400g,,甲氧苄啶 （TMP） 80g 制成1000片,,每片含SMZ：360~440mg(Chp 2000),,二、基本原理,,,当吸收光谱重叠的,a、b,两组分共存时，若要消除,a,组分的干扰测定,b,组分，可在,a,组分的吸收光谱上选择两个吸收度相等的两波长,λ,1,和,λ,2,，,测定混合物的吸光度差值然后根据,ΔA,值计算,b,的含量,磺胺甲噁唑（,SMZ,）,在,257,nm,波长处有最大吸收；甲氧苄啶（,TMP,）,在此波长吸收最小并在,304,nm,波长附近有一等吸收点，,故选定257,nm,为,SMZ,的测定波长（,λ,2,），,在304,nm,波长附近选择参比波长（,λ,1,）,A,257,＝A,S，257,＋A,T,257,,A,304,＝A,S，304,＋A,T,304,,ΔA＝ A,257,－ A,304,∵A,T,257,＝A,T,304,,,＝A,S，257,－A,S，304,,＝ΔEC,SMZ,l,ΔA与C,SMZ,有线性关系。

在,λ,2,与,λ,1,两波长处分别测定供试品溶液与,SMZ,对照品溶液的吸收度，求出供试品溶液吸收度差值(,ΔA,x,),、,SMZ,对照品溶液的吸收度差值(,ΔA,s,),，,计算，即得每片中含SMZ的毫克数,,C,s,= 0.505mg/ml,,W,称,=0.06960g,,W=552.64mg,,,由于参比波长对测定影响较大，故采用对照品溶液来确定此波长可因仪器不同而异，测定时应仔细选择三、实验内容,,1、供试品溶液的制备（教师准备）,,取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于磺胺甲噁唑50,mg,与甲氧苄啶10,mg)，,置于100,mL,量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟使磺胺甲噁唑与氧苄啶溶解，加乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液二、对照品溶液的制备（教师准备）,,精密称取在105℃干燥至恒重的磺胺甲噁唑对照品50,mg,与甲氧苄啶对照品10,mg，,分别置于100,mL,瓶中，各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对照品溶液(1)与对照品溶液(2)三、磺胺甲噁唑的测定,,,精密量取供试品溶液与对照品溶液(1)，(2)各2,mL，,分别置于100,mL,量瓶中，各加0.4％氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀。

取对照品溶液(2)的稀释液，以257,nm,为测定波长（,λ,2,），,在304,nm,波长附近(每间隔0.5,nm),选择等吸收点波长为参比波长(,λ,1,)，,要求,ΔA＝A,λ2,－A,λ1,＝0再在,λ,2,与,λ,1,两波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液(1)稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值(,ΔA)，,计算，即得四、操作注意事项,,测定之前应先检查仪器波长是否准确五、思考题,,1．双波长分光光度法测定复方制剂有何优点?,,2．应用双波长分光光度法应如何选择测定波长和参比波长?,,。