
sop标准操作程序-ggt.doc
4页SOP标准操作程序GGTy-谷氨酰转移酶(货号:OSR6119, OSR6219)实验原理:7-谷氨酰转移酶的测量用于诊断和治疗肝脏疾病,如,酒精性肝硬变和初级和次级肝肿 瘤升高的血清7-谷氨酰转移酶(GGT),有时称作GGTP (EC2.3.2.2)可出现在所有的肝 脏疾病中在检测阻塞性黄疸,胆管炎和胆囊炎时,它比碱性磷酸酶,转氨酶和亮氨酸氨肽 酶(LAP)更灵敏GGT水平在肝病中升高较快,比LAP或5'-核昔酸酶水平有较高的值 *=中等程度的升高在传染性肝炎中可看到但是,升高的GGT水平也可以在慢性酒精中毒, 糖尿病和某些神经系统疾病中注意到GGT的正常水平可出现在骨骼疾病中,因此,血清 GGT可用于确定疾病是骨骼的,还是肝胆的方法奥林巴斯AU640 GGT程序是基于Szasz程序的修改方法2' \ GGT催化水溶性底物,y- 谷氨酰-3-竣基-4-硝基苯胺中的治谷氨酰到甘氨酰甘氨酸中,生成5-氨基-2-硝基苯甲酸盐 在410/480nm时吸光度的改变是山于5-氨基-2-硝基苯甲酸盐的形成,它的形成与标本中 GGT的活性成正比GGTL-治谷氨酰-3-竣基-4-硝基苯胺+甘氨酰甘氨酸 > L-治谷氨酰-甘氨酰甘氨酸+5-氨基-2-硝基苯甲酸盐标本:病人准备:无特殊要求。
类型:标本最好是无溶血的血清如果必须使用血浆,推荐的抗凝剂是EDTA肝素化血清 可能会在反应混合物中变得浑浊;柠檬酸盐,草酸盐和氟化物可使活性降低10%到15% 标本稳定性:GGT测定应在标本收集后尽快进行血清中的GGT在4°C下可稳定一月,在 -20°C稳定一年"仪器与材料:仪器:奥林巴斯AU640生化分析仪材料:奥林巴斯AU640 y-谷氨酰转移酶(GGT)参与反应成份的最终浓度:Tris 缓冲液(pH7.95) 100mmol/L甘氨酰甘氨酸 100mmol/LL-y-谷氨酰-3-竣基-4-硝基苯胺 4.0mmol/L其中含有保护剂注意:1.此试剂为体外诊断用2. 不要入口,吞下有害3. 保护剂为叠氮钠,与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物,即使只含有少量的叠 氮钠,如果排向下水道请用大量的水冲洗试验用试管的直径在12〜16mm试剂准备:奥林巴斯AU640的GGT是即开即用的无需特殊准备执行参数(性能参数):以下数据是根据奥林巴斯AU640GGT试剂已经建立的程序精密度:精密度的评估是根据NCCLS推荐的典型方法役AU640批内精密度小于5%,总 精密度小于10%,用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。
N=100平均值(U/L)批 内 精密度总 精 密 度SDCV%SDCV%130.11.10.11.1330.41.30.51.51580.70.41.20.7方法学比较:奥林巴斯AU640 GGT (方法1)与其它奥林巴斯分析仪器(方法2),共同做 183个病人标本相关系数达到0.9999,回归方程如下:GGT 方法 1= (GGT 方法 2X0.89) +0.6病人结果数值分布:0〜391U/L敏感度:在奥林巴斯AU640生化分析仪上每分钟变化0.23毫吸光度为1U/L 试剂的贮存:1.当保存于2〜8°C,不开盖情况下至标签的失效期2. 开盖后放于仪器的冰箱中可以稳定30天变质指示:试剂浑浊度增加表明已经变质,不能继续使用校准:标准液的准备:这个实验不需要标准液校准程序:AST的校准基于5-氨基-2-硝基苯甲酸盐的消光系数,在410/480nm的摩尔消光 系数为7453 o质控:在每一批标本中都应把奥林巴斯水平I与II质控血清(DR0061&62)作为未知标本 进行分析操作程序(逐步地):AU640开机1. 确认两瓶清洗剂有足够的量2. 打开蒸憾水供应系统的阀门3. 如果没有设定自动开机,请按分析仪器上的[POWER ON]键。
4. 确认打印机为开机并处于联机状态5. 在[Start Condition]屏幕,输入所需信息,并按F2退出6. 如果要求输入密码,请输入密码7. 确认仪器上的试剂的位置是否正确、数量(体积)是否充足,不足请添加并在系统状 态中的试剂状态检查试剂在急诊台Washl的位置的试管中加满一支1NHCL的样品针清洗液9. ISE (电极)需要以下步骤定标:a. 在急诊台相应位置放血清/尿高和低值标准液b. 在系统状态菜单选择ISE状态菜单c. 选择F5,选定合适的定标条目d. 定标完成后,确认斜率和因数是否在范围内开始分析:1. 把定标、质控、和标木架放在架了传送带上2. 用鼠标点击屏幕最上方的[START ANALYZER]图标3. 点击F2退出键,退回到主屏幕分析参数样品体积6微升稀释水0微升试剂1体积75微升稀释水20微升试剂2体积75微升稀释水20微升波长410/480方法Rate读点14/23温度37°C完整的实验参数与操作程序可以在AU640用户于册中查到计算:无需手工计算,在37°C每个标本的结果自动以U/L打印报告结果:参考范围10: 9-64U/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。
根据好的实验室经验,每个实验室应 建立自己的参考值不正常结果的处理程序:根据仪器参数的正常值会打印异常标志报告格式:自动地打印37°CU/L的报告,如果以SI单位(U/L)报告结果,要乘以0.017o操作过程注意事项:操作过程的限制性:OlympusAU640 GGT的线性范围是3〜1200U/L样品浓度超过线性 上限应稀释重做在AU640中应用自动重做功能,标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数超范围的标本也可以在四份生理盐水中加一份血清进行手工稀释,轻轻地混匀,在AU640 上当常规标本,结果乘以5干扰物质:已经发现某些抗颠痫药(苯妥英,巴比妥酸盐)会引起GGT值的假升高5o标本收集前的 过度饮酒会引起血清GGT的假升高°研究结果表明GGT受以下物质干扰7:乳糜 乳糜达到1000mg/dL时影响小于3%溶血 血红蛋白达到500mg/dL时影响小于3%胆红素 胆红素达到40mg/dL时影响小于3%Olympus的研究结果是根据现时发表的文献,Olympus美国公司正在进行准确性的研究,对 于其它物质的干扰,请参看Young发表的文献°参考文献:1. Tietz,N.W.(Ed),Fundamentals of Clinical Chemistry,3rd Edition,W.B.Saunders, 1987.2. Szasz,G.,Clin Chem, 15:124,19693. Szasz,G.,Z Klin Biochem,12:228,19744. Tietz,N.W.(Ed),Fundamentals of Clinical Chemistry,2rd Edition, 1990.5. Whitfield,J.B.Moss,D.W.,Neale,G.,Orme,M. and Breckenridge,A.,Brit Med J,1:316,1973.6. Rosalki,S.B.,Rau,D.,Clin Chem Acta,39:41,1972.7. NCCLS,Interference Testing in Clincial Chemistry,EP7-P, 1986.8. Young,D. S.,Effects of Drugs on Clincial Laboratory Tests,4th Edition, AACC Press, 1995.9. NCCLS,Evaluation Protocol EP5-T2,1992.10. 200 blood donors from North Texas.Data on file.。
