准分子激光原位角膜磨镶术前后泪液中神经生长因子水平与泪膜稳定性的相关性分析.doc

1准分子激光原位角膜磨镶术前后泪液中 神经生长因子水平与泪膜稳定性的相关 性分析【摘要】 目的 探讨内源性神经生长因子（nerve growth factor，NGF）在准分子激光原位角膜磨镶术（laser in situ keratomileusis，LASIK）后干眼中的作用机制方法 LASIK 术前及术后 1 天、2 天、10 天及 30 天在 17 例患者（34 眼）下睑结膜囊内抽取泪液标本，采用双抗体夹心酶联免疫吸附分析法检测泪液中 NGF 含量，同时行泪膜稳定性的检查，并对两者行相关性分析结果 NGF 含量在术前平均值为（21.96±8.22）μg/ml，术后 1 天、2 天、10 天含量分别为(12.76±3.55)μg/ml、(11.01±4.66)μg/ml、(13.55±4.93)μg/ml，与术前比较差异有统计学意义（P0.05）；术后 30 天含量(19.16±8.79)μg/ml，与术前比较差异无统计学意义(P0.05)术前泪膜破裂时间（breaking-up time，BUT）均值为(12.62±1.99)s，术后 1 天、2 天、10 天和 30 天分别为(4.68±1.77)s、(4.84±1.92)s、(7.36±1.53)s 和(8.82±3.08)s，与术前比较差异有统计学意义(P0.05)；术后 1 天与 2 天比较差异无统计学意义(P0.05)，术后 1 天（2 天）、10 天、30 天比较差异均有统计学意义(P0.05）。

泪液中 NGF 含量与泪膜稳定性具有正相关（r=0.484，P0.01）结论 LASIK 术后泪液 NGF 的含量存在一个由降低到正常的动态变化过程，NGF含量变化是泪膜稳定性下降的相关因素之一 【关键词】 准分子激光角膜切削术；神经生长因子；泪膜稳定性；干眼Relationship between the levels of nerve growth factor in tears and tear film stability after LASIK2［Abstract］ Objective To study the mechanism of endogenous nerve growth factor(NGF) in the dry eye after LASIK.Methods Nerve growth factor levels in the tears of 34 eyes before and after LASIK were studied with a monoclonal antibody based ELISA before LASIK and 1 day，2 days，10 days，and 30 days after LASIK.Tear film stability was examined during the same visits.And then the relationship between the levels of NGF in tears and tear film stability in the eyes of pre and postoperative LASIK patients was studied.Results Mean value of NGF before LASIK was (21.96±8.22)μg/ml and mean values at 1 day，2 days，10 days and 30 days after LASIK were(12.76±3.55)μg/ml，(11.01±4.66)μg/ml，(13.55±4.93) μg/ml，(19.16±8.79)μg/ml，respectively.The NGF levels in tears at the first three visits post-operation were significantly different from levels in the pre-operative group.(P0.05).However，There was no significant difference between the pre- surgical level and the level at the 30 days visit post-operation(P0.05).Tear film stability before LASIK was(12.62±1.99)seconds，and at 1 day，2 days，10 days and 30days after LASIK，it was(4.68±1.77) seconds，(4.84±1.92) seconds，(7.36±1.53) seconds，and (8.82±3.08)seconds，respectively.Tear film stability at the time of the four visits after surgery was significantly different from the preoperative level (P0.05).There was a positive correlation between tear film content and changes in tear film stability after LASIK(r=0.484，P0.01).Conclusion The decrease of BUT is the cause of dry eye and the changes in tear film stability and the onset of dry eye after LASIK are related to the level of NGF.［Key words］ LASIK;nerve growth factor;tear film stability;dry eye近年来，准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratomileusis，LASIK)成为屈光手术的主流手术。

除了视力的上升，视觉质量以及舒适度也成为患者追求的目标然而术后患者常常出现眼干涩、异物感、易疲劳等干眼症状，在一定程度上影响了视觉质量有研究表明局部应用含神经生长因子（nerve growth factor，NGF）滴眼液可以改善 LASIK 术后患者的干眼症状神经生长因子存在于角膜组织［1，2］，其含量的稳定性是维持正常角膜上皮完整和角膜感觉的重要因素LASIK术后角膜 NGF 含量变化国内外文献鲜有报道本研究采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（avidin-biotin peroxidase complex enzyme-liked immunosorbent assay，ABC ELISA ）测定 LASIK 手术前后泪液中 NGF 水平的变化，结合泪膜稳定性检测，对 NGF 与干眼关系进行探讨31 对象与方法1.1 对象选择 选取 2006 年 9～11 月在我院行 LASIK 手术患者 17 例（34 眼），性别不限，年龄为 18～32 岁，平均（22.19±4.58）岁术前等效球镜度数为（-3.65±1.90）DS病例选取标准：（1）无角膜接触镜配戴史；（2）屈光度稳定 2 年以上；（3）没用过影响泪液分泌及泪膜稳定性的药物(抗青光眼药物、皮质类固醇药物等)；（4）术前经过裂隙灯及眼底检查，排除眼科其他疾病，如干眼（参照刘祖国干眼诊断标准［3］）、圆锥角膜、慢性泪囊炎、病毒性角膜炎活动期、青光眼、视网膜病变及视神经病变；（5）排除全身结缔组织疾病及自身免疫性疾病，如系统性类风湿关节炎、多发性硬化、严重的糖尿病及妊娠等；（6）近视度数不超过-10.00 D；（7）患者中央角膜厚度不低于 500 μm。

1.2 检查项目 常规检查裸眼视力、矫正视力、裂隙灯眼前节检查、角膜地形图、超声角膜测厚、眼压测量、散瞳查眼底、主客观验光等1.3 泪膜稳定性测定（BUT） 荧光素钠滴入患者结膜囊后，在裂隙灯下用钴蓝滤光片观察一次瞬目到泪膜出现干斑所需要的时间双眼分别测量 3 次取平均值1.4 手术方法 手术采用 120 刀头行角膜瓣切削，角膜瓣蒂位于上方，切削厚度均为 160 μm1.5 术后用药 按常规术后用药1.6 泪液标本收集 分别于术前和术后 1 天、2 天、10 天、30 天收集泪液表麻下将厚度为 0.5 mm、直径 3 mm 圆形滤纸片（吸附体积约为 6.5 μl）放入患者眼下穹隆部中外 1/3 结膜囊内，嘱其轻闭双眼待滤纸片湿透达到充分饱和后取出，并立4即放入 EP 试管内于-60 ℃冰箱内保存待检全部病例均在相同条件下采集泪液作为样本1.7 NGF 水平的测定 采用 ABC ELISA 法NGF 检测盒(购自武汉博士德公司)，96 孔聚苯乙烯酶标板(美国 Nunc 公司生产)，Thermolab systems multiskan MK3 型酶联免疫检测仪1.8 统计学分析 采用 SPSS 13.0 软件进行统计分析，计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示；组间差异采用单因素方差分析；多个样本均数间的两两比较用 LSD-t 检验，P0.05 为差异有统计学意义。

2 结果LASIK 手术前后泪液的 NGF 平均含量和 BUT 均值结果，见表 1LASIK 术后 1天、2 天、10 天泪液 NGF 平均含量较术前减少，差异有统计学意义（P0.05）；术后 30 天 NGF 含量与术前比较差异无统计学意义（P0.05）LASIK 术后各时间点 BUT 与术前比较差异均有统计学意义(P0.05)；术后 1 天与术后 2 天比较差异无统计学意义(P0.05)；术后 1 天（2 天）、10 天、30 天比较差异均有显著性(P0.05)表 1 LASIK 手术前后 NGF 平均含量和 BUT 均值 注：与术前平均含量比较，*P0.05 LASIK 手术前后泪液 NGF 含量与相应的 BUT 值进行 Pearson直线相关性分析显示，两者呈正相关(r=0.484，P0.01)3 讨论神经生长因子是一种小分子多肽类神经营养因子除角膜神经外，角膜上皮细胞、内皮细胞及基质细胞也能合成释放 NGF 并存在其受体 TrkA［4，5］Lambiase 等5［6］运用自制 NGF 滴眼液治疗 12 例患有神经营养性角膜溃疡的患者，2 个月内所有病例全部愈合由此可以推断，NGF 是营养角膜组织，促进受损神经再生和维持健康角膜感觉的重要因子。

LASIK 手术不可避免的损伤角膜组织及角膜神经，术后患者常出现角膜知觉减退、眼干涩、异物感等眼表不适症状为此笔者研究泪液中 NGF 含量变化规律，以便更好地改善术后患者的视觉质量当任何原因引起泪液质和量或动力学异常导致泪膜不稳定，并伴有眼部不适症状时，称之为干眼［3］唯一直接测定泪膜稳定性的方法是泪膜破裂时间LASIK术后以荧光素染色法测定 LASIK 术前、术后的 BUT 结果显示：术前平均BUT：（12.62±1.99）s，术后 1 天：（4.68±1.77）s，术后 2 天：（4.84±1.92）s，术后 10 天：（7.36±1.53）s，术后 30 天：（8.82±3.08）s术后各时间点泪膜破裂时间与术前比较均缩短，差异有统计学意义（P0.05），且以术后 1 天和 2 天缩短最为明显与王礴等［7］研究结果相似，LASLK 术后出现眼干症状的原因主要与泪膜稳定性下降有关，术后 BUT 较术前有下降，但处于一个逐渐恢复的过程本研究结果发现，LASIK 术前泪液中 NGF 均值（21.96±8.22）μg/ml，术后 1 天、2天、10。