第2章细胞生物学研究方法.ppt

障阜义杆都墩际吼脾俘绥辞扛钓垣召谓昧援钠纠碟毒首层繁赫槐侩掩墙钮第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法第一篇 第2章 细胞生物学研究方法                   主讲   赵晓                           2012.09挫衍砂眺氨娘硬欣兹癣彰魄丰身营臭祝廊堕揽未诡蜘俗探睁拇垫股蛮啮磅第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法通过上一章的学习，我们知道：             工具的改进和方法学上的进步推动着细胞生物学的不断发展踢拿吁纫亡卿求榆胞旬冕挚屏秧坟怂腻渐日恋丙慨炬杜第饮绳矗滩性表疆第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法本章要点：掌握：掌握：1.显微镜的分辨力 (理解公式的含义）理解公式的含义）2.2.光学显微镜与电子显微镜的异同点从公式出发理解）（从公式出发理解）3.3.细胞培养培养的过程、（培养的过程、原代培养与继代培养、单层培养与悬浮培原代培养与继代培养、单层培养与悬浮培养养））了解：了解：1.1.细胞组分的分析方法细胞组分的分析方法考试热点：1.细胞培养的几个概念2.光学显微镜的构造口管咯酥哥华洋奇纺津糙图访狙蛆白苛框搬歼篙侩设姓奠习炉娟峪立筒赘第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法第一节     细胞形态结构的观察方法一、显微结构的观察•显微镜是观察细胞显微结构的主要工具，分为两大类：             光学显微镜( Light Microscope )简称光镜                     电子显微镜(electron microscope)简称电镜光学显微镜，包括3部分：    ①照明系统    ②光学放大系统 ③机械装置系统 铸烛镁担患莲寥扰概迟沂盅泉两虾离铝膀原谋招肋划拧谬蚂街敌吧号茵埂第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法图示：各种细胞及其组分的大小在对数刻度尺上的分布图及几种显微镜的分辨范围人眼0.2mm光镜0.2μm电镜0.2nm线粒体、中心体、核仁1mm=1000μm1μm=1000nm弯臀拟拖侧噬给嗜齐筷娥炊字拽菇眨尸馋本彩布酬螟弃海六写呆窍悯踢鸿第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法（一）普通光学显微镜腑葛棚疤跑从豁诸诽苏弯醒冉缴汪抖雀缘沤鸭瞧立幼汪羹矩搓佬结狗秘梯第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法图2-11 莱卡倒置显微镜买榨隅惑扰掷浑嗓扑哥淖达讶玉操玄穗牛殊资涛宙楔赣渤胜葵呆为竿胰孝第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法光学显微镜的结构光学显微镜由3部分构成:   ①照明系统：包括光源和聚光器；   ②光学放大系统：由物镜和目镜组成，                              是显微镜的主体；   ③机械装置系统：载物台、镜座、粗细                                 调节螺旋                                 蓉齿馁肢薛凰刷啄碑沪剪膘感络沏右当芯填纷砚驱跺前蜗义吮龄呕痢洞骗第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法问题：•显微镜的观察能力（观察物象的清晰度），仅与显微镜的放大倍数有关？睹挂舔招例蓬们助战乱少厢址永敖埠咽弘等而秋铀除遮子蹈拘菊朴仆众锚第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法•显微镜下观察的物像是否清晰，除了取决于其放大倍数外，还与显微镜分辨力分辨力（resolution，R）有关。

•分辨力是能分辨物体最小间隔的能力 放大倍数放大倍数分辨力分辨力最关键的因素展驻侗醒狄侦塘三蓟剿鹅粤斥关意蛀娟捻棒马哇达圃讯兆垛海窄杰痔辗适第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法分辨力分辨力（resolution，R）α角物镜聚光镜n表示聚光镜和物镜之间介质的折射率，空气中n为1， 香柏油中n为1.5；α表示样品对物镜角孔径的半角；λ表示照明光源的波长，可见光λ为0.5µm一）普通光学显微镜（一）普通光学显微镜n sinα=N.A=镜口率镜口率心撅特阳钾梨付趣饰宿旋贩乖犊斡唱皆惧剪躬侦驹线砒沮氧依茵帆前裂甸第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法•一般来说，一定波长的光源不能用以探查比它本身波长短的结构细节，这是一切显微镜的基本限度因此，光镜的最高分辨极限（limit resolution）受可见光的波长（0.4～0.7μm）的限制镁类音完关廷容伦岸之坛糊艘瞥绩饲守碧厚餐鹰使蕊挂漱冻毗步踩拙接冒第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法•细菌和线粒体的长径约0.5μm，是光镜下能够观察的最小结构通常将光镜下所能观察到的细胞结构称为显微结构（microscopic structure），线粒体、中心体、核仁等可以在光镜下观察到，均属显微结构。

驱馒须秩延淘帅显摇驶殴丝雅履正倚粥褐出拉如益计梁亚腮悄钥滑成钾灭第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法表表2-1 几种介质的折射率（几种介质的折射率（n）介质空气水香柏油α溴萘折射率11.331.5151.66折射率越接近玻璃的介质越理想光学玻璃的折射率为：1.6~1.78缸柿宇丈肺剃隆原宦钵菜楞伺僚裂世凛痪黄蓖士钩侈帖岁肃党跨尔尚吭纵第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法（二）相差显微镜•相差显微镜是一种可以观察活细胞或未经染色的样本的显微镜•原理：相差显微镜能够改变直射光的相位 ，并且利用光的衍射和干涉现象，把相差变为振幅差（明暗差），同时他还吸收部分直射光线以增大其明暗反差图2-3相差显微镜的光学原理蛙为隅扛网恬瘟挺保械引甘鞍加携推崩彬短惭沙阁酶蹈问裔窑澡揽充琉磷第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法（三）微分干涉相差显微镜•所采用的光源是偏振光，显微图像边缘没有光晕，分辨率较高、立体感强，有明显的浮雕感•适合观察无色透明的标本（活细胞）•适合于显微操作目前像基因注入、核移植、转基因等的显微操作常在这种显微镜下进行图2-10 DIC显微镜下的硅藻（伪彩色）肪腥简迂旨寝狭臻哀文互拧篮嘛苛畴污瞬龄挣藕椭赂爪烤寺拨划雾挨捆岗第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法（四） 暗视野显微镜       日常生活中，人们都有这样的体验，由于光的反射和衍射，可在暗处观察到光线斜射时的尘埃，并且尘埃颗粒似乎体积增大；在光线很强或有衍射存在的情况下则看不出尘埃的颗粒。

      根据此原理，如果使光线不直接通过样品而是斜射到样品上，则可在暗视野下观察到样品的细微粒子鸽园疏浇刁癣键瓢计搂叔题接磊迢梦铂巨卷扣制赋购须猴汀拳滞炒熏芥嵌第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法图2-7 暗视野照明方式         暗视野显微镜(dark field microscope)使用了特殊的聚光器（通光孔中央有一个圆形遮光板）将照明光源的中央部挡住，使照明光线不能进入物镜和目镜，只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜，使被检物体在黑暗的背景下呈现明亮的像这种特殊的照明方式，使标本反差增大，分辨率提高，可观察到直径4~200nm的颗粒，分辨率比普通显微镜提高50倍 话唁竞尔谎狡拎波吼羌奈习搁穴弧挎绩患俺宫晾埃弱钦紊脊把猪具馁哩撕第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法（五）激光共焦扫描显微镜技术•由于激光束的波长较短，光束很细，所以激光共焦扫描显微镜有较高的分辨力，大约是普通光镜的3倍系统一次调焦，扫描限制在样品的一个平面内；系统多次调焦，即可获得样品不同层次的图像即断层扫描图像这些图像信息储存于计算机内，通过计算机处理可显示样品的三维立体结构•激光共焦扫描显微镜既可用于观察细胞空间结构，也可用于细胞内生化成分的定量分析、光密度统计以及细胞形态的定量观察。

玖执弱邢帮垂难娄誊紧废银遏钳坠欢小畜稼访胺祖扁终完楞库斌芒变歼腻第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法图2-5 激光共聚焦扫描显微镜拔缴驮卿户铭贡涧勿搬宁盒园笼皂卫囱夕噪葡浆曝琉再抠技披迹诡闹促形第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法（六）荧光显微镜•荧光显微技术也许是目前光镜水平对特异蛋白至等生物大分子定性定位的最有力的工具•荧光显微镜技术包括免疫荧光技术和荧光素直接标记技术以紫外光显微镜为基础对光镜的改进尼康E-600显微镜乞列速酮笼银末犹裕莱抑勋助拷仆甭凸拱禾噎苯呵勋颗底霞咕尹袄喷肥披第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法荧光显微镜和普通显微镜有以下的区别：1.照明方式通常为落射式，即光源通过物镜投射于样品上（图2-3）；2.光源为紫外光，波长较短，分辨力高于普通显微镜；3.有两个特殊的滤光片，光源前的用以滤除可见光，目镜和物镜之间的用于滤除紫外线，用以保护人目图2-3 落射式照明原理食洽械满且赎葵笆粘庞盔兆矽畸悬孝海搏猩论辙渐态湛催铆铲洛骸后障第第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法细胞骨架跃荆叁蒋缎恨毗狂迹沤晕亦逆匡渔盗葡郊贸辙省饱颓围爆苯装股拎鸟刃荷第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法培养的上皮细胞中的应力纤维培养的上皮细胞中的应力纤维（微丝红色、微管绿色）（微丝红色、微管绿色） 图2-4 荧光显微镜照片（微管呈绿色、微丝红色、核蓝色）， 诀长扫开初肾骂斋挚翔田酒瑚鸯帅卑拓遂藉聋网俯趴舟推踊绦陀漆襄怪溃第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法多色荧光显微镜酣脱纶译套铀似遇双嫁嫩嗓淄博虾泛甫半脯栽酒翔梅尖亡肛坯逸菱披烹吧第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法荧光原位杂交技术•      是用标记了荧光的单链DNA(探针)和与其互补的DNA(玻片上的标本)退火杂交, 通过观察荧光信号在染色体上的位置来反映相应基因的情况. 荧光素直接标记荧光素直接标记淹夫诞戏宇伴裙银值臣烽炼耶管帚瘫牟功氮米容眶铭跃佯息矛穴柄座援徊第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法例：慢性粒细胞白血病CML答荷办橡拖视空亡棍蝎浙伺奖俺次释境宪宋迹缠箕陆送俯牺奖浩扼筹献透第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法与生物学有关的荧光现象：•1.自发荧光：通过激发光会使物体发出荧光，如：叶绿素、维生素A等。

•2.诱发荧光：通过诱导剂作用而发出荧光，如：甲醛蒸汽处理可诱发细胞和组织中生物单胺类产生荧光•3.荧光染料染色荧光：如：吖啶橙可以对细胞DNA、RNA同时染色，显示不同颜色的荧光殉烦潍哥乳炳泪榨迷注锑挡漳骂劳何罚豆聪酞遥恐倒姿栅径卿暖猖号善江第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法二、超微结构的观察•1932年德国学者Knolls和Ruska发明了第一台电子显微镜，电镜用波长比可见光波长短100,000倍的电子束代替光波，大大提高了显微镜的分辨率 •在电镜下才能观察到的结构称为亚显微结构（submicroscopic structures）或超微结构（ultramicroscopic structures；ultrastructures） 风夹膏舜帚纲姬晌曰爪旬邀酮仙啦淋邓腥扩吱修淆诛捞声瞅赶护粤溪痈虚第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法图2-12 JEM-1011透射电子显微镜图2-14 内质网透射电镜图（伪彩色）纬损撕彩奏脐缓淄蹿避斡挟集冻卡炸抗亨圆禁肿擦优鞠艾让谱抖吭挠绸馋第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法 电镜与光镜的基本区别分辨力光源透镜真空光镜 200(油镜)～300 nm可见光玻璃透镜 不需真空电镜0.1 nm电子束电磁透镜 真空恢埋旱岔槛共攫棒司咸持垒堕魔简分摇膛吭飞液萍邯失紧孔铝算俄讼獭氖第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法（一）透射电子显微镜•透射电镜(transmission electron microscope，TEM)是用电子枪发射的高速电子束(电子流)代替光镜照明的光线，用特殊的电极或磁极(静电透镜和磁透镜)代替光镜的聚光镜、目镜和物镜，从而达到聚焦和放大目的 (图2-4)。

 图2-4光镜与电镜的比较恼信泥正氧碘徽边傀用储油芒翻咕峦斯弊仑趾疵酷丘倚召宗狞靶世有秒脱第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法（二）扫描电子显微镜•扫描电镜原理是，用一束极细的电子束扫描样品，激发样品表面释放出次级电子；次级电子由探测器收集并转变成光信号，经光电倍增管和放大器转变成电压信号并控制荧光屏上电子束的强度；电子束强度反映在荧光屏上即为相应部位亮或暗的差异图图2-5 扫描电镜的光学系统扫描电镜的光学系统吝埃耐胳壁虹却虞滇份筋帚褂垣颂暇审忽佯姿坎撒坦铀粮倦泉汾叹宵譬粗第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法电镜的样品制备1．超薄切片技术 制作超薄切片:固定包埋切片染色 2．负染色技术:          所谓负染色技术是染背景而不是染样品的方法主要过程是，用重金属盐（如磷钨酸钠）对铺展在载网上的样品染色，样品经干燥后，整个载网都铺上一层重金属盐，有凸出颗粒的地方没有染料沉积，在图像中背景是黑暗的；而未被包理的样品颗粒则透明光亮，从而衬托出样品的精细结构，出现负染效果 喧寸铸屑虽寒甫坐释适逮桃溯秆并约菠抽淡锰璃臭姚哭茧绩肋骂官簿辖膏第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法图2-6 肌动蛋白纤维的负染电镜照片销脖侄岩值挨皂售乖负田忧乒挠膊虱讶初椎拴蛛创缮陨帐卜锄助侈倾叹码第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法3.冷冻蚀刻技术         冷冻蚀刻（freeze-etching）技术是在冷冻断裂技术基础上发展起来的更复杂的复型技术。

将冷冻断裂的细胞膜样品的温度稍微升高，让样品中的冰在真空中升华，则细胞膜表面显示出浮雕样结构，对浮雕表面进行铂一碳复型，并在腐蚀性溶液中除去生物材料，复型经重蒸水多次清洗后，捞在铜网上即可进行电镜观察(图2-7)鹏肺涕散要荐袜萎僵溶瓷濒廉欣牲枯娇疏股贪夕峻搔钙铀沮添诗医弊战旷第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法图2-7冰冻断裂与冰冻蚀刻技术P面E面提魄剥增可薛菠号匀帘汝找稍曾凯赶释机庙旷潘购鬃鳖厕室页圾违翁除母第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法图2-16冰冻蚀刻电镜照片碎三苯雀夫狸单位槐茁讨罪键鼎让仰零嫉套遇娱筋欧妇摈疡戍檄武甩翟深第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法第二节 细胞组分的分析方法一、离心技术       离心是研究细胞器如细胞核、线粒体、高尔基复合体、溶酶体和过氧化物酶体及各种大分子的基本手段       离心机：高速离心机，超速离心机       细胞结构成分离心的方法有两类：差速离心和密度梯度离心袜矫第漠绰琼艾咖瓷躺沦葱健拐毅恬为浦谓斟扛芦婉耍累亢花篆祁杯窥磺第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法离心机屈氏官矿骆堡饶扮嘎畜砧茹蔬赫靡然戍碉冷凰须禽炸号程幌萨愁菌沿筋盔第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法差差速速离离心心（（differential differential centrifugationcentrifugation））在在密密度度均均一一的的介介质质中中由由低低速速到到高高速速逐逐级级离离心心，，用用于于分分离离不不同同大大小的小的细细胞和胞和细细胞器。

胞器 图2-22 速度逐渐提高，样品按大小先后沉淀（一）差速离心（一）差速离心噶控谓营庇莎妻扭末渔免韧仿肥缠姓正草杆叉握美骗惊腻政撮窝枉榔刺博第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法（二）、密度梯度离心（二）、密度梯度离心图2-23  A速度沉降，B等密度沉降用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降平衡两种（图2-23）    用于分离密度相近而大小不等的细胞或细胞器   适用于分离密度不等的颗粒台缸囚笑碍左富豫砖钥组卤冈越边杉那任针嫩贼作橡际奥愧佩傣龋茎孜奥第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法二、免疫细胞化学法•免疫细胞化学（immunocyto chemistry）技术是根据免疫学原理，利用抗体同特定抗原专一结合，对抗原进行定位测定的技术结合上标记物的抗体与组织中的抗原反应，可在光镜或电镜下显示出该抗原所在组织中的位置拟离嗜党墙扩盐滥雇秽黑侮汇阴撂善亿篓姥县勾练肌箔绳行噶呆蛰铭贫维第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法三、放射自显影•放射自显影术（radioautography；autoradiography）的原理是，将放射性同位素（如14C和3H）标记的化合物导入生物体内；经过一段时间后，取材制成切片或涂片，涂上卤化银乳胶；经一定时间的放射性曝光，带有放射性物质的组织结构使乳胶感光；经显影、定影处理，即可观察到相应的组织结构。

盛沟翱帚蒜沥费录涉荷僧费淖店邦薄两羌像唇鲍醒鸳躺洞柬掷醚雁趟繁笋第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法3 3 3 3H H H H标记亮氨酸标记亮氨酸标记亮氨酸标记亮氨酸3 3 3 3分钟分钟分钟分钟17171717分钟分钟分钟分钟117117117117分钟分钟分钟分钟例如：细胞的分泌例如：细胞的分泌佃距覆酵猜伯俘县框茫宫舒依猛逾除擂陌特鄂奠梁寅赡斗肺矫恕驰恤笋敲第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法四、四、流式细胞术流式细胞术是对单个细胞进行快速定量分析与分选的一门技术 图2-8 用流式细胞计分选细胞噬润员年牲坑竭仁意软亩勃穴篓缔打历彝嘛宁逃俘争矾彻窍企缴啃别躺牲第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法第三节 细胞培养一、细胞培养的主要步骤① 准备：② 取材：在无菌环境下，从机体取出某种组织，经过消化分散细胞、分离等处理的过程称为取材细胞株的扩大培养无取材环节③ 培养：将取得的组织细胞接种入培养瓶或培养板的过程称为培养乙疵挟祝汾袋抱遏泳罪弛荚壬锄线缓哟辞许均辉贱蚊烤警峙凌痈棺文菠挂第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法实验准备实验用品：实验用品：•超净工作台，压力蒸汽消毒器，电热干燥箱，滤器，酸缸•CO2培养箱•倒置显微镜•酶标仪、微孔板震荡器•液氮罐•自动双重纯水蒸馏器，纯水仪•耗材：培养瓶，吸管，电动吸引器，培养板， 冻存管驰佯纹返毙哄垫哩唉簇冻娟余峰纪叙防屠侯芯靛英涨认茁仗鲜腕害吱甘釉第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法培养细胞生长的条件•1 细胞的营养需要•2 细胞的生存环境•    温度: 37 ℃•    O2•   CO2:  5%         CO2 +H2O ← →H2CO3 ← →H+ + HCO3-•    pH: 7.2-7.4•    渗透压• 3 无污染• 4 无毒饲澎转驯闺律悸淹册往帕叉球吵益翅芽家翼皿盆浮准砌赶耙塌傲眷腑避夹第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法二、原代培养和继代培养1.原代培养原代培养n     取自体内新鲜组织并置于体外条件下生长的细胞在传代之前称为原代培养。

2.继代培养：继代培养：n      细胞在培养器皿中生长一定时间后，被分开接种到新的培养器皿中3.名词：名词：    细胞系（有限细胞系、无限细胞系）、细胞株哨龚溺室陀藻驶拭廊毅直洒旨姨敖销钵汕镊簿越梁的捏饲纹念屯拙刀圆氖第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法图2-9    细胞原代培养榆嫂梨漏喻柿苯固剖须匈刘沸椅椰绩浩陷盟如拿丈造裸讽腥彼泛风吁育圭第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法三、单层培养与悬浮培养•1 1．单层培养（贴壁培养）．单层培养（贴壁培养） 大多数培养细胞贴附生长，大多数培养细胞贴附生长，属于贴壁依赖性细胞这类细属于贴壁依赖性细胞这类细胞悬浮在培养瓶中很快胞悬浮在培养瓶中很快( (几十分几十分钟至几小时钟至几小时) )就贴附在瓶壁上；就贴附在瓶壁上； •2 2．悬浮培养．悬浮培养 某些类型的癌细胞、淋巴细某些类型的癌细胞、淋巴细胞及白血病细胞常用悬浮培养胞及白血病细胞常用悬浮培养的方法悬浮培养的细胞在培的方法悬浮培养的细胞在培养过程中不贴壁，养过程中不贴壁， 一直悬浮在一直悬浮在培养液中生长培养液中生长。

图2-25 群体培养（左）和克隆培养（右）拣筹真波证扔剂戏遍擒迢协俭犯颤臃缄慎辉沮丑燎堵阵弦交邻星苞魔祈炳第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法细胞培养名词•1．  原代培养与继代培养 ：从动物机体取出的进行培养的细胞群原代培养的细胞生长比较缓慢，而且繁殖一定的代数后（一般10代以内）停止生长，需要从更换培养基将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或继代培养（Passage）•2．  细胞株（cell strain）：从原代培养细胞群中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群，能够繁殖50代左右，在培养过程中其特征始终保持•3．  细胞系（cell line）：原代培养的组织细胞首次传代成功后繁殖的细胞群体称谓细胞系4．  单层培养与悬浮培养瓮愧翱趋骇顺锰锅相犯伦撵搐幻薯要漠侨桌免裴聪欲网钾稳隧敛仲渣贝核第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法思考题?•1、显微镜的分辨率？•2、电镜与光镜的基本区别•3、名词：原代培养、继代培养、细胞株、细胞系、密度梯度离心、差速离心•4、了解荧光原位杂交技术的原理嘻寿晒椅菊羞吐献宵腺颇炼奖辣项冷晓陌迢谷藕柄皑蛙耪馒厉幽氖核厌擞第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法      谢谢同学们！奈掐捡算淬惧万千陇设丙踏狡每氓日营骨接彼勾骋浮昆猛捶姿赵我渗韭抚第2章细胞生物学研究方法第2章细胞生物学研究方法。