菌种传代操作规程2022版药典菌种传代.docx

本文格式为Word版，下载可任意编辑菌种传代操作规程2022版药典菌种传代 GMP管理文件 题 目 菌种传代操作规程 编码： 页序/ 总页 1/2 制 定 审 核 批 准 制订日期 审核日期 批准日期 颁发部门 质量部 生效日期 分发部门 化验室 一、 目的：为使菌种传代操作模范化、制度化，故建立此规程 二、 适用范围：菌种传代须按本规程执行 三、 责任者：微生物限度检查化验员，质量检测中心主任 四、 正文： 1、培养基的制备 按微生物限度检查用稀释剂、培养基配制操作规程及斜面配制操作规程配制好相应培养基大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、沙门菌、用胰酪大豆胨琼脂斜面培养基，白色念珠球菌、黑曲霉用沙氏葡萄糖琼脂斜面培养基，制备好的培养基预培养48小时后，确认无菌落生长方可使用 2.菌种传代 2.1菌种传代前应打定好适于该菌种生长的培养基和培养设备，全体操作均应在符合生物安好养护的生物安好柜内举行 2.2点燃酒精灯，在火焰上部操作，将原有的菌种斜面（简称菌种管）与待接种的崭新斜面培养基（简称接种管）持在左手拇指、食指及中指之间，菌种管在前，接种管在后，使试管内斜面向上，两支试管口平齐，应斜持试管呈45°角，以免管底凝集水浸湿培养基外观。

用右手在火焰旁转动两支试管胶塞，以便接种时易于拨取再用右手持接种环的柄端，垂直或稍斜地把接种环在火焰上灼烧将接种环烧红约30s，随后将接种棒金属片面在火焰上烧灼，以彻底灭菌用右手的小指和手掌之间以及无名指与小指之间，在火焰旁分别拔除两支试管的胶塞，持住在将试管口在火焰上通过以杀灭管口的细菌，但勿烧的过热，将烧灼的接种环插入菌种管内，先接触无菌苔生长的培养 GMP管理文件 题 目 菌种传代操作规程 编码： 页序/总页：2/2 基上，如有溶印那么说明接种环未冷却，待冷后，再从斜面上挑取少许菌苔取出时接种环不能通过火焰，应在火焰旁急速插入接种管，在斜面上由下而上划 “Z”字型曲线，当接种完毕，立刻将管口通过火焰灭菌，右手到火焰旁塞上胶塞，不要将管口离开火焰旁去迎接右手的胶塞结果将接种环烧灼灭菌放置备用 3.培养 将以上接种好的各菌管放入相应温度的培养箱内，白色念珠菌放入23-28℃培养箱内培养24-48h，黑曲霉放入23-28℃培养箱内培养5-7天，其它菌种放入30-35℃培养箱内培养18-24小时 4.保存 除铜绿假单胞菌需室温保存外，将其它传代培养后的菌种应放入4-6℃的冰箱冷藏保存。

依据：《中国药典》2022版及中国药品检验标准操作模范 — 3 —。