林木遗传育种学实验ppt课件.ppt

林木林木遗传学学实验实验一 植物有丝分裂制片及察看•一、实验目的一、实验目的•1. 学习并掌握植物根尖或叶片资料处置、学习并掌握植物根尖或叶片资料处置、染色、压片及制片察看的方法染色、压片及制片察看的方法•2. 察看植物细胞有丝分裂各时期染色体的察看植物细胞有丝分裂各时期染色体的形状变化，了解有丝分裂全过程形状变化，了解有丝分裂全过程•二、实验原理二、实验原理•各种生长旺盛的组织中，如胞原组织、根尖、芽各种生长旺盛的组织中，如胞原组织、根尖、芽尖等分生组织经常进展细胞分裂经过适当的取尖等分生组织经常进展细胞分裂经过适当的取材处置，加以固定、离解、染色、压片方法，可材处置，加以固定、离解、染色、压片方法，可以迅速将细胞分散到载玻片中，进而进展有丝分以迅速将细胞分散到载玻片中，进而进展有丝分裂和染色体动态的察看这是遗传学上经过细胞裂和染色体动态的察看这是遗传学上经过细胞分裂察看染色体行为、形状构造、数目，从而进分裂察看染色体行为、形状构造、数目，从而进展组织分析，鉴别杂种等常用的制片方法展组织分析，鉴别杂种等常用的制片方法 •三、实验器材•1 资料•大蒜根尖•2 器具•显微镜、小剪子、刀片、载玻片、盖玻片、培育皿、水浴锅、吸水纸、绘图纸•3 药品•卡诺氏固定液、0.1%秋水仙素溶液、0.1mol/L盐酸、醋酸洋红染液•四、实验方法 •1 发根•大蒜为资料，将大蒜磷茎置于盛水的烧杯口上，使大蒜鳞茎与水相接，在25℃下发根。

待根长1cm左右，于中午12:30～13:30切取根尖为宜•2 预处置 •将剪下的根尖立刻放入0.1％秋水仙碱，以药液浸没根尖为度，处置3～4h •3 固定 •资料经预处置后，用流水冲洗，然后投入卡诺液Ⅰ〔3份甲醇∶1份冰乙酸，现配现用〕中固定20～24h，用95％的乙醇洗两次，转入70％乙醇中保管备用•4 解离 •常用酸解法：从70％乙醇中取出固定好的根尖→流水冲洗３min→吸水纸吸干→放入小试管中→加适量1 mol/L HCl于60±0.5℃水浴解离10～15min•5 染色•1％醋酸洋红染色：将解离水洗后的资料吸干，挑取根尖乳白色分生组织于载玻片上夹碎捣烂，滴加1～2滴染液，染色10～20min，压片•6压片 •在经染色的资料上加一滴染液，盖上盖玻片，覆一层吸水纸，用带橡皮头的铅笔垂直敲打，或以拇指垂直紧压盖片(留意勿使盖片搓动)，使资料分散压平，便于察看•7 镜检 •先在低倍镜下寻觅有分裂相的视野，再用高倍镜或油镜仔细察看、记数或拍照•8 暂时封片保管•如制片标本符合要求，而又只需求短期(普通在一周以内)保管，可采用石蜡暂时封片用烧红解剖针挑取少量石蜡(或石蜡与凡士林等体积混合物)沿盖片周围封锁。

•制造完成的制片标本要贴上标签，注明资料称号、可察看到的有丝分裂典型时期、制片时间、制造者等信息•五、作业五、作业•１１ 制造细胞有丝分裂前、中、后、末各期制造细胞有丝分裂前、中、后、末各期的制片一张，中期应能数清染色体数贴的制片一张，中期应能数清染色体数贴上标签，注明资料称号，染色方法，制片上标签，注明资料称号，染色方法，制片日期和制造者姓名日期和制造者姓名•2 绘制所察看到有丝分裂典型时期的染色绘制所察看到有丝分裂典型时期的染色体图像，并简要阐明各时期染色体的行为体图像，并简要阐明各时期染色体的行为变化和特征变化和特征间期有丝分裂前期中期后期末期实验二 植物减数分裂•一、实验目的一、实验目的•1．学习花粉母细胞涂抹制片技术．学习花粉母细胞涂抹制片技术•2．经过察看进一步熟习减数分裂的全过程．经过察看进一步熟习减数分裂的全过程及各个时期染色体的动态变化和形状特征及各个时期染色体的动态变化和形状特征 •二、二、实验原理原理•减数分裂是减数分裂是发生在配子构成生在配子构成过程中一种特殊方式程中一种特殊方式的有的有丝分裂减数分裂包含两次延分裂减数分裂包含两次延续的分裂的分裂——减数第一分裂和减数第二分裂。

减数第一分裂和减数第二分裂经过减数分裂所减数分裂所构成的四分体构成的四分体细胞〔或雌、雄配子〕，其染色体胞〔或雌、雄配子〕，其染色体数目只需体数目只需体细胞的一半减数分裂胞的一半减数分裂过程中染色体程中染色体出出现同源配同源配对、非姊妹染色、非姊妹染色单体体间片段交片段交换、同、同源染色体相互分源染色体相互分别等一系列独特行等一系列独特行为•减数分裂减数分裂细胞染色体制片取材以高等胞染色体制片取材以高等动、植物雄、植物雄性生殖分裂性生殖分裂较为方便在适当的方便在适当的时机采集机采集动物精物精巢或植物花蕾巢或植物花蕾(花序花序)，，经适当技适当技术处置，置，压片就可片就可在在显微微镜下察看到下察看到细胞的减数分裂胞的减数分裂过程•三、实验器材•1.资料•紫鸭跖草的幼嫩花蕾 •2.实验器具•显微镜，酒精灯，载玻片，盖玻片，镊子，解剖刀，解剖针，等常用工具•3.药品•卡诺氏Ⅰ，甲醇冰乙酸〔甲醇∶冰乙酸=3∶1〕固定液，１mol/L HCI， 45％乙酸；0.5％醋酸洋红，改良苯酚品红，石蜡•四、实验方法四、实验方法•1．取材．取材 •花序基部、花蕾较小，花样尚未变黄变紫，其中花序基部、花蕾较小，花样尚未变黄变紫，其中必有处于减数分裂的花药。

必有处于减数分裂的花药•2．固定．固定 •将获得幼嫩花序或花蕾立刻投入固定液中，处置将获得幼嫩花序或花蕾立刻投入固定液中，处置12～～24h倒去固定液，用梯度乙醇倒去固定液，用梯度乙醇(95％％-80％％-70％％)依次浸泡漂洗依次浸泡漂洗5～～30min，直至去除乙，直至去除乙酸味固定后可置酸味固定后可置70％乙醇中保管％乙醇中保管•3．涂抹 •用镊子、解剖针等工具取出花药置干净载玻片上；用干净的刀片或镊子压在花药上向一端悄然抹去，将花粉母细胞压挤出来，留意勿使花药太过破碎；将挤出花粉母细胞(呈半透明胶状)小范围内涂成薄层•4．染色 •在涂好的载玻片上滴加一滴或半滴染液，稍后用镊子把一切可见花药壁残渣去除干净•5．镜检察看 •在低倍镜下寻觅适当视野，并正确区分处于减数分裂各个时期的花粉母细胞、二分体、四分体以及花粉粒、花药壁残留组织与细胞间期细线期偶线期粗线期双线期终变期中期Ⅰ后期Ⅰ末期Ⅰ中期Ⅱ后期Ⅱ末期Ⅱ实验三 染色体组型分析•一、实验目的一、实验目的•1．学习和掌握染色体组型分析的方法．学习和掌握染色体组型分析的方法•2．进一步了解染色体形状特征、在细胞分．进一步了解染色体形状特征、在细胞分裂中的联会笼统以及染色体组、核型及染裂中的联会笼统以及染色体组、核型及染色体数目、构造变异与生物进化的关系。

色体数目、构造变异与生物进化的关系•二、实验原理二、实验原理• 各种生物染色体的数目、形状和构造都是各种生物染色体的数目、形状和构造都是恒定的染色体组型，也称为核型，指一恒定的染色体组型，也称为核型，指一个个体或物种的特有的染色体构成，包括个个体或物种的特有的染色体构成，包括染色体数目以及每一条染色体所特有的形染色体数目以及每一条染色体所特有的形状特征〔染色体的长度、着丝粒的位置、状特征〔染色体的长度、着丝粒的位置、臂比值、随体的有无、次级缢痕的数目及臂比值、随体的有无、次级缢痕的数目及位置、异染色质的分布等〕核型是物种位置、异染色质的分布等〕核型是物种最稳定的性状和标志，通常在体细胞有丝最稳定的性状和标志，通常在体细胞有丝分裂中期时进展核型的分析鉴定，也可利分裂中期时进展核型的分析鉴定，也可利用减数分裂期的染色体进展分析鉴定用减数分裂期的染色体进展分析鉴定 染染色色体体组组型型分分析析就就是是经经过过对对染染色色体体标标本本和和其其照照片片进进展展丈丈量量、、对对比比分分析析、、配配对对、、分分组组、、陈陈列列，，对对各各染染色色体体的的形形状状进进展展分分析析。

在在细细胞胞遗遗传传学学、、现现代代分分类类学学、、生生物物进进化化和和遗遗传传育育种种学等研讨中，是重要的研讨手段学等研讨中，是重要的研讨手段三、实验资料：三、实验资料： 洋洋葱葱、、大大麦麦、、玉玉米米、、黑黑麦麦、、蚕蚕豆豆等等本本实验选用蚕豆〔实验选用蚕豆〔2n=122n=12〕四、实验用品：四、实验用品： 器器具具：：蚕蚕豆豆有有丝丝分分裂裂中中期期照照片片〔〔6x8cm6x8cm〕〕、、剪剪刀刀、、镊镊子子、、铅铅笔笔、、直直尺尺、、计计算算器器、、胶胶水水、、白纸等五、实验步骤：五、实验步骤： 1 1 丈丈量量：：丈丈量量每每条条染染色色体体的的总总长长度度及及长长臂臂长长度度和和短短臂臂长长度度对对于于有有随随体体的的染染色色体体，，随随体体的的长长度度可可以以计计入入也也可可以以不不计计入入染染色色体体长长度度之之内内，，需需求求注注明明每每条条染染色色体体的的着着丝丝粒粒应应平平分分为为二二，，计计入入两两条条臂臂长长度度之之内内〔〔要要使使丈丈量尽能够准确，应留意哪些问题？〕量尽能够准确，应留意哪些问题？〕。

 2 2 计算：根据丈量结果，计算出：计算：根据丈量结果，计算出： 相对长度相对长度= =某染色体的长度某染色体的长度染色体组内全部染色体总长度染色体组内全部染色体总长度臂比值臂比值= =长臂长度〔长臂长度〔q q〕〕 短臂长度〔短臂长度〔p p〕〕请问如何准确地确定染请问如何准确地确定染色体组内全部染色体的色体组内全部染色体的总长度？总长度？臂比值臂比值1.0~1.71.7~3.03.0~7.07.0以上以上 3 3 配配对对：：根根据据丈丈量量、、计计算算的的数数据据进进展展同同源染色体的配对源染色体的配对 4 4 陈陈列列和和剪剪贴贴：：将将配配对对的的染染色色体体按按由由大大到到小小的的顺顺序序进进展展陈陈列列并并编编号号等等长长的的染染色色体体短短臂臂长长的的排排在在前前面面，，特特殊殊的的染染色色体体〔〔如如性性染染色色体体〕〕排排在在最最后后陈陈列列、、剪剪贴贴时时，，让让各各对对染染色色体体的的着着丝丝粒粒排排在在一一条条直直线线上上，，短短臂臂在在上上，，长臂在下。

长臂在下 5 5 写写出出核核型型公公式式：：以以公公式式的的方方式式将将核核型型分分析析的的结结果果和和资资料料核核型型的的主主要要特特征征表表示示出出来来，，简明扼要简明扼要六、实验报告：六、实验报告： 完完成成蚕蚕豆豆的的染染色色体体组组型型分分析析，，包包括括染染色色体体组组型型图、数据表、核型公式图、数据表、核型公式七、结果与讨论：七、结果与讨论： 1 1 结果：蚕豆染色体组型分析的部分构造举例结果：蚕豆染色体组型分析的部分构造举例 2 2 讨讨论论：：染染色色体体组组型型分分析析的的意意义义请请大大家家查查阅阅相关资料相关资料实验四 植物多倍体的诱导及鉴定•一、实验目的•学习和掌握秋水仙碱诱发多倍体的普通方法 •察看多倍体植物植株(器官)形状特征与细胞学特点，了解同源多倍体鉴定方法 二、二、实验原理原理•秋水仙碱能抑制纺锤构成丝常用的有效浓度为0.01%～1.0% ，木本植物采用的浓度相对较高，可达1.5% ，而蔬菜或处置幼嫩资料等适用的浓度那么较低，普通不超越0.5% 处置方法可用水溶液浸渍、涂抹或点滴植物的分生组织，使每个复制为二的染色体不能向两极分开，同时细胞也不能分裂成两个子细胞，每个细胞内染色体添加一倍，构成多倍体细胞。

•鉴定多倍体植株的方法有形状学鉴定和细胞学鉴定两种•形状学鉴定是观测叶片气孔捍卫细胞、花、果实、种子的形状、花粉粒大小及育性等性状的变异进展间接鉴定•细胞学鉴定观测根尖、茎尖分生组织或花粉母细胞的染色体数目，直接鉴定三、三、实验资料料•杉木、马尾松等植物种子•水稻、大麦、豆类植物的种子或幼苗四、四、实验方法与步方法与步骤•〔一〕植物根尖多倍体的诱发•1、将杉木、马尾松、玉米、大麦、蚕豆、黑麦、西瓜等种子洗净后用水浸泡1～2d，然后摆放在铺有潮湿滤纸(或纱布)的培育皿中置于25℃～28℃条件下发芽，芽越壮越好当根长到1cm以上时取出洗净，将水吸干•2、移至0.01%～0.2% 的秋水仙素溶液中，使根部浸在药液中，根尖朝下，25℃条件下处置直到明显膨大为止(24h左右以致36h)；另设一清水处置对照处置过程中留意勿使药液干涸•3、取出资料洗净，用卡诺氏液固定1h，以备镜检〔二〕多倍体植物的诱发•1、种子处置•(1) 取蚕豆、亚洲棉等植物种子置0.05%～0.1% 秋水仙素溶液中(20℃～25℃)浸种24h，取出种子用自来水冲洗2～3次•(2) 将种子移至放有被0.025% 秋水仙素溶液润湿下的吸水纸的培育皿中加盖，放入20℃培育箱内发芽，普通处置两天就可长出幼苗。

对枯燥种子比浸过种的种子要多处置1天，种皮厚发芽慢的种子应先催芽后进展处置由于秋水仙素能妨碍根系发育，所以对已发芽的种子运用较低的秋水仙素溶液处置较短的时间•(3) 处置后取出幼苗，用自来水缓慢冲洗以免损伤，然后将幼苗移栽到大田或盆钵内，同时播种未经处置的种子幼苗作为对照〔三〕多倍体鉴定•1、植株形状特征的察看与鉴定•比较鉴定二倍体和多倍体在形状上的主要区别•2、叶片气孔捍卫细胞的测定•(1) 捍卫细胞丈量：仔细撕取二倍体和同源多倍体植株的叶片下表皮，置于载玻片上，并加1～2滴1% I-KI，盖上盖玻片在高倍镜下用测微尺丈量气孔捍卫细胞的大小，分别丈量10个捍卫细胞的长度和宽度，求其平均值捍卫细胞的形状因物种而异，双子叶植物的捍卫细胞多呈肾形，单子叶植物的捍卫细胞多呈哑铃形•(2) 气孔密度测定：将叶片表皮制片于显微镜下检查，计算每个视野气孔数，转换视野反复10次，求出平均值视野面积的计算，用目镜测微尺量出视野直径，按公式S=πr2求视野面积，得每平方毫米叶面积的气孔数•(3) 捍卫细胞内叶绿体数目测定：取叶片下表皮于载玻片上，滴加AgNO3溶液，数秒后加盖玻片，在显微镜下观测捍卫细胞内的叶绿体数目。

4、细胞学察看与鉴定•将秋水仙碱处置和对照资料的根尖固定，按根尖压片法(参见根尖压片法实验)进展解离、染色、制片镜检进展染色体数目鉴定•本卷须知•秋水仙碱属剧毒药品，具麻醉作用，操作时切勿使药液接触皮肤和溅入眼内七、作七、作业•1、察看比较二倍体与多倍体在植株(器官)形状特征上的主要区别•2、察看比较多倍体和正常二倍体捍卫细胞大小、气孔密度、捍卫细胞内叶绿体数目以及花粉粒大小等特征•3、察看蚕豆根尖中期分裂细胞(15～20个/人)，记载其中染色体加倍及未加倍的细胞数目，综合全班(组)结果，测算秋水仙碱诱发多倍体细胞的频率•4、绘制他所察看到的可以计数染色体数目的多倍性细胞图象•5、秋水仙碱处置为什么会产生组织中细胞的混倍性(或细胞嵌合)景象?由此，秋水仙碱处置应留意些什么?实验四四 人人类性状的性状的遗传分析分析•一、实验目的一、实验目的•人类是随机交配的群体，其性状的表现反人类是随机交配的群体，其性状的表现反映出群体的遗传组成，从群体性状的遗传映出群体的遗传组成，从群体性状的遗传分析，可以了解不同种族〔民族〕的基因分析，可以了解不同种族〔民族〕的基因频率和基因型频率以期了解控制不同性频率和基因型频率。

以期了解控制不同性状的基因的分布情况状的基因的分布情况•二、实验原理二、实验原理•在自然界，无论动植物一种性别的任何一个个体在自然界，无论动植物一种性别的任何一个个体有同样的时机与其相反性别的任何一个个体交配有同样的时机与其相反性别的任何一个个体交配假设某一位点有一对等位基因假设某一位点有一对等位基因A和和a，，A基因在群基因在群体出现的频率为体出现的频率为p，，a基因在群体出现的频率为基因在群体出现的频率为q；基因型；基因型AA在群体出现的频率为在群体出现的频率为D，基因型，基因型Aa在群体出现的频率为在群体出现的频率为H，基因型，基因型aa在群体出现的在群体出现的频率为频率为R群体〔D，，H，，R〕交配是完全随机的，〕交配是完全随机的，那么这一群体基因频率和基因型频率的关系是：那么这一群体基因频率和基因型频率的关系是：D=p2 户户 H=2pq R=q2• 这阐明任何一物种的一切个体，只需能随机这阐明任何一物种的一切个体，只需能随机交配，基因频率很难发生变化，物种能坚持相对交配，基因频率很难发生变化，物种能坚持相对稳定性根椐遗传平衡定律，可以对人类群体进稳定性。

根椐遗传平衡定律，可以对人类群体进展基因频率的分析展基因频率的分析 •三、实验资料三、实验资料•以班级的每一位同窗的以班级的每一位同窗的8种性状作为研讨小群体种性状作为研讨小群体•四、实验器具：笔和纸四、实验器具：笔和纸•五、实验步骤五、实验步骤•1. 以以10个人为一组，由小组长察看上述的前个人为一组，由小组长察看上述的前8个个单对基因控制性状的表现，并作记录单对基因控制性状的表现，并作记录•2. 统计全班〔年段〕的资料，进展基因频率和基统计全班〔年段〕的资料，进展基因频率和基因型频率的计算因型频率的计算•计算公式：计算公式：D+H=p2+2pq R=q2•六、作业六、作业•上交上交8种性状的基因频率和基因型频率种性状的基因频率和基因型频率林木育种学林木育种学实验实验一 花粉贮藏及花粉生活力的测定•一、实验目的一、实验目的•掌握贮藏花粉及花粉生活力测定的方法和原理掌握贮藏花粉及花粉生活力测定的方法和原理•二、实验原理二、实验原理•经过人为的发明条件减弱花粉的呼吸强度和新陈经过人为的发明条件减弱花粉的呼吸强度和新陈代谢活动可以延伸花粉的寿命通常花粉的形状、代谢活动可以延伸花粉的寿命。

通常花粉的形状、花粉中酶的活性以及积累淀粉〔淀粉质花粉〕的花粉中酶的活性以及积累淀粉〔淀粉质花粉〕的多少与花粉生活力亲密相关因此，可以利用花多少与花粉生活力亲密相关因此，可以利用花粉的形状察看，过氧化物酶、脱氢酶的活性高低，粉的形状察看，过氧化物酶、脱氢酶的活性高低，淀粉的含量以及在人工培育基上花粉管萌生的情淀粉的含量以及在人工培育基上花粉管萌生的情况作为确定花粉生活力高低的规范况作为确定花粉生活力高低的规范•三、三、实验资料料•杉木、杉木、马尾松、柳杉、柳尾松、柳杉、柳树、、锥栗、百合、牡丹、菊花等栗、百合、牡丹、菊花等植物的花粉植物的花粉•四、四、实验器具、器具、试剂•修枝剪、修枝剪、钢药筛、解剖、解剖针、、载玻片、玻片、悬液液载玻片、盖玻片、玻片、盖玻片、毛笔、硫酸毛笔、硫酸纸及硫酸及硫酸纸袋、指形管或小玻璃瓶、脱脂棉或袋、指形管或小玻璃瓶、脱脂棉或纱布、布、标签、玻璃、玻璃铅笔、笔、显微微镜、枯燥器、大广口瓶、恒、枯燥器、大广口瓶、恒温温箱、冰箱等温温箱、冰箱等•硫酸〔相硫酸〔相对密度密度1.45〕、无水〕、无水氯化化钙、硅胶、蔗糖或葡、硅胶、蔗糖或葡萄糖、蒸萄糖、蒸馏水、稀薄的硼酸〔水、稀薄的硼酸〔1：：100000〕、凡士林、〕、凡士林、联苯胺、苯胺、α—苯酚、酒精、碳酸苯酚、酒精、碳酸钠、、过氧化氧化氢、、2，，3，，5—三苯基四氮三苯基四氮唑、次甲基、次甲基蓝、愈、愈伤木酚等。

木酚等•五、实验方法及步骤五、实验方法及步骤•〔一〕花粉的搜集〔一〕花粉的搜集•1、树上搜集、树上搜集•2、摘下花序〔花穗〕搜集、摘下花序〔花穗〕搜集•3．培育花枝搜集．培育花枝搜集•〔二〕花粉贮藏〔二〕花粉贮藏•1、进展枯燥、进展枯燥 •2、过筛去杂、过筛去杂 •3、装瓶冷藏、装瓶冷藏 •〔三〕花粉生活力的测定〔三〕花粉生活力的测定•1 1、固体培育基法、固体培育基法•人为地发明适宜的花粉发芽的条件，依其发芽情人为地发明适宜的花粉发芽的条件，依其发芽情况来鉴定花粉的生活力况来鉴定花粉的生活力 •2 2、染色法、染色法 •利用脱氧化酶反响把花粉置于载玻片上，滴入利用脱氧化酶反响把花粉置于载玻片上，滴入0.025%0.025%的次甲基蓝溶液一滴，盖上盖玻片，数分的次甲基蓝溶液一滴，盖上盖玻片，数分钟后在显微镜下检查，凡无生活力的花粉被染成钟后在显微镜下检查，凡无生活力的花粉被染成深蓝色，有生活力的褪色为不同程度的浅蓝色或深蓝色，有生活力的褪色为不同程度的浅蓝色或灰色，褪色才干的强弱与生活力的强弱呈正相关灰色，褪色才干的强弱与生活力的强弱呈正相关 •3、形状察看法•有时还可采用一种更为简便的鉴定方法—形状鉴定法。

直接将花粉放在显微镜下察看，根据其形状特征判别生活力情况•普通把具有种类典型性的花粉〔指具有该种类花粉粒的大小、形状和色泽等〕作为具有生活力的花粉，把小型的、伸展的、畸形的作为无生活力的花粉•六、作业六、作业•1、详细记载花粉采集及储存的日期、花粉称号、、详细记载花粉采集及储存的日期、花粉称号、花粉搜集方法及过程、花粉贮藏方法花粉搜集方法及过程、花粉贮藏方法•2、经过实验总结所采集贮藏的花粉种类的特点经过实验总结所采集贮藏的花粉种类的特点•3、测定花粉生活力的意义有哪些？快速测定花、测定花粉生活力的意义有哪些？快速测定花粉生活力的方法有哪些？粉生活力的方法有哪些？•4、分别用染色法和发芽法计算花粉生活力分别用染色法和发芽法计算花粉生活力•5、绘一幅花粉粒发芽形状图绘一幅花粉粒发芽形状图 实验二 树木有性杂交技术•一、实验目的一、实验目的•1、了解树木有性杂交特点了解树木有性杂交特点•2、掌握树木有性杂交技术及其在育种上的运用掌握树木有性杂交技术及其在育种上的运用•二、实验原理二、实验原理•树木杂交育种，是运用遗传性不同的树种，或同树木杂交育种，是运用遗传性不同的树种，或同一树种的不同类型，在开花的时候，进展人工控一树种的不同类型，在开花的时候，进展人工控制授粉，以获得杂种的手段。

有性杂交，由于基制授粉，以获得杂种的手段有性杂交，由于基因的重新组合，杂种一代往往出现杂种优势人因的重新组合，杂种一代往往出现杂种优势人工杂交目的，在于获得和利用杂种优势工杂交目的，在于获得和利用杂种优势 •三、三、实验资料料•杉木、杉木、马尾松、湿地松、桃尾松、湿地松、桃树、月季、菊、月季、菊花、百合、木芙蓉等，各种花、百合、木芙蓉等，各种杨树或柳或柳树的的雌雄花枝雌雄花枝•四、四、实验器具、器具、试剂•修枝剪、剪刀、硫酸修枝剪、剪刀、硫酸纸袋、袋、纱布、棉花、布、棉花、标签、、标牌、回形牌、回形针、、镊子、毛笔、授粉子、毛笔、授粉器、器、记载薄、梯子、薄、梯子、铅笔、笔、10～～15×放大放大镜、培育瓶、花粉瓶等培育瓶、花粉瓶等•五、实验方法与步骤五、实验方法与步骤•1、制定育种目确实定杂交组合、制定育种目确实定杂交组合•2、亲本选择、亲本选择•3、花期调整、花期调整•4、母株去雄、母株去雄•5、套袋隔离、套袋隔离•6、花粉采集、花粉采集•7、授粉、授粉 •8、杂交后的管理、杂交后的管理•六、作业六、作业•1、察看描画杂交植物的花部构造，开花习、察看描画杂交植物的花部构造，开花习性。

性•2、详细记录杂交过程详细记录杂交过程•3、杂交任务终了后，仔细分析胜利与失败、杂交任务终了后，仔细分析胜利与失败的阅历教训，写出杂交任务小结的阅历教训，写出杂交任务小结实验三三 植物植物组织培育技培育技术•一、实习目的一、实习目的•1、经过实验，掌握植物组织培育操作技术经过实验，掌握植物组织培育操作技术•2、掌握培育基配制方法掌握培育基配制方法•3、了解外植体脱分化及再生的过程，了解、了解外植体脱分化及再生的过程，了解植物细胞全能性植物细胞全能性•二、实验原理二、实验原理•植物细胞具有潜在地发育成一个完好植株植物细胞具有潜在地发育成一个完好植株的才干，即细胞的全能性植物组织、器的才干，即细胞的全能性植物组织、器官等在无菌条件下，经过人工培育，可在官等在无菌条件下，经过人工培育，可在短期内快速、大量地增殖，并产生出完好短期内快速、大量地增殖，并产生出完好的植株•三、实验资料三、实验资料•杉木、马尾松、南方红豆杉、相思、乳源杉木、马尾松、南方红豆杉、相思、乳源木莲、巨尾桉等植物木莲、巨尾桉等植物•四、实验器具、试剂四、实验器具、试剂•显微镜、温箱、冰箱、烘箱、超净任务台、高压显微镜、温箱、冰箱、烘箱、超净任务台、高压灭菌锅。

分析天平、药物天平、铝锅、眼科剪刀、灭菌锅分析天平、药物天平、铝锅、眼科剪刀、枪形镊子、烧杯〔枪形镊子、烧杯〔50ml、、100ml、、500ml、、1 000ml〕、培育皿、三角瓶〔〕、培育皿、三角瓶〔50ml、、100ml、、500ml〕、量筒〔〕、量筒〔10ml、、100ml、、500ml、、1 000ml〕、吸管〔〕、吸管〔0.2ml、、0.5ml、、2ml、、5ml、、10ml〕、玻璃棒、漏斗、试剂瓶〔〕、玻璃棒、漏斗、试剂瓶〔50ml、、250ml、、500ml、、1 000ml〕、比色〕、比色皿酒精灯、硫酸纸、牛皮纸、脱脂棉、火柴、皿酒精灯、硫酸纸、牛皮纸、脱脂棉、火柴、花盆、酸度计、花盆、酸度计、pH值试纸•琼脂、酒精、琼脂、酒精、NaOH、、HCl、醋酸洋红色染色液、、醋酸洋红色染色液、碘碘-碘化钾、培育基成分〔见附表〕、吲哚乙酸〔碘化钾、培育基成分〔见附表〕、吲哚乙酸〔IAA〕、萘乙酸〔〕、萘乙酸〔NAA〕、动力精、赤霉素〔〕、动力精、赤霉素〔GA〕、〕、2，，4-D、激动素〔、激动素〔KT〕、〕、6-卞基腺嘌卞基腺嘌呤〔呤〔BA〕、玉米素〔〕、玉米素〔ZT〕、高锰酸钾、甲醇、〕、高锰酸钾、甲醇、重铬酸钾、硫酸、吲哚丁酸〔重铬酸钾、硫酸、吲哚丁酸〔IBA〕、叶酸、三〕、叶酸、三十烷醇。

十烷醇•五、五、实验方法与步方法与步骤•〔一〕培育基的配制〔一〕培育基的配制 •〔二〕外植体取材、消毒及接种〔二〕外植体取材、消毒及接种•1、取材与消毒、取材与消毒•自大田取材或温室取材自大田取材或温室取材时应选取无病、无虫、生取无病、无虫、生长安康的外植体外植体外表消毒的普通程序安康的外植体外植体外表消毒的普通程序为：：外植体外植体→→自来水多次漂洗自来水多次漂洗→→消毒消毒剂处置置→→无菌水无菌水反复冲洗反复冲洗→→无菌无菌滤纸吸干•2、无菌操作、无菌操作•〔〔1〕接种室消毒〕接种室消毒•超超净任任务台面用台面用70%酒精擦拭，翻开紫外灯照射酒精擦拭，翻开紫外灯照射20min，，进展无菌室及超展无菌室及超净工和台工和台杀菌•〔2〕资料的接种•操作人员接种前必需剪除指甲，并用肥皂水洗手，用70%酒精擦拭接种时最好戴口罩，必需在近火焰处翻开培育容器的瓶口，并使瓶倾斜〔瓶口低，瓶底高〕，以免空气中的微生物落入瓶口•〔三〕无菌培育与察看•接种后将资料放入培育室或培育箱内培育，温度普通为〔25±2〕℃，光照10～16h，光强1 000～2 000 lx，有的资料需求暗培育定期察看，继代培育〔或转接培育〕。

•七、作业七、作业•1、简述植物组织培育操作应留意的问题简述植物组织培育操作应留意的问题•2、根据本人的实验统计外植体的污染率、、根据本人的实验统计外植体的污染率、诱导脱分化率植株再生率诱导脱分化率植株再生率实验四四 超超级苗苗选择•一、实验目的一、实验目的•经过实验，初步掌握超级苗选择的方法经过实验，初步掌握超级苗选择的方法•二、实验原理二、实验原理•任何树种，在大量播种时经常可以察看到个别苗任何树种，在大量播种时经常可以察看到个别苗木长势异常突出假设苗木的立地条件，播种方木长势异常突出假设苗木的立地条件，播种方法和管理措施都近于一致，依然出现这种苗木，法和管理措施都近于一致，依然出现这种苗木，这就能够是其优良遗传特性表现的结果因此，这就能够是其优良遗传特性表现的结果因此，在苗期按速生性选择苗木，对于林木良种选育有在苗期按速生性选择苗木，对于林木良种选育有很重要的现实意义很重要的现实意义•三、实验器具三、实验器具•皮尺、钢卷尺、卡尺、记载簿、各种彩色皮尺、钢卷尺、卡尺、记载簿、各种彩色标牌、算盘或计算器标牌、算盘或计算器•四、实验资料四、实验资料•某树种一、二年生苗某树种一、二年生苗。

•五、五、选择的方法和步的方法和步骤•1、苗田概略、苗田概略调查记载•调查记载的工程有：苗田称号、地点、土壤情况、的工程有：苗田称号、地点、土壤情况、耕田制度、播种方法、耕田制度、播种方法、时间、面、面积、管理情况和、管理情况和产苗量等•2、苗木生、苗木生长调查•撒播：一是撒播：一是“对角角线〞〞调查法，根据播种面法，根据播种面积大小，大小，按一定按一定间隔隔设置小置小样方方调查；二是机械抽；二是机械抽样调查法，法，视播种面播种面积大小，大小，间隔隔3～～5畦抽一畦抽一样畦，畦畦，畦上上设置置2～～3个个调查小小样方•条播：普通条播：普通为机械抽机械抽样法，在法，在样畦上逢畦上逢10～～15行抽一行抽一调查样行•样方方总面面积通常占播种通常占播种总面面积的的2%～～4%•3、计算•4、苗木选择•〔1〕确定选择规范•按苗高选苗：普通按苗木平均高加3～4个规范差〔+3～4S〕选苗.•按高茎比选苗：苗木高茎比普通是成正相关，即苗木越高时普通根茎也愈粗，但也有少数例外，应选苗时，要思索到苗木粗壮•按苗木生长情况选苗：枝叶繁茂、生强壮、顶芽完好、无病虫害、根系兴隆 •〔2〕选苗挂牌：根据上述选苗规范在苗木中选苗，凡中选的苗木挂上一编号纸牌，并丈量记载其苗高，茎粗和生长情况。

•〔3〕起苗：普通利用超级苗营造实生种子园或作为嫁接种子园的砧木假设进展造林比较实验，还须从其周围起掘普通苗木作为对照，按实验要求造林比较 实验五五 遗传力的估算力的估算•一、实验目的一、实验目的•经过调查和资料分析，明确遗传力在育种中的意经过调查和资料分析，明确遗传力在育种中的意义，学习遗传力的估算方法义，学习遗传力的估算方法•二、实验原理二、实验原理•遗传力指的是亲本传送某一性状的才干，是当前遗传力指的是亲本传送某一性状的才干，是当前育种领域中广为运用的一个统计学估值，有广义育种领域中广为运用的一个统计学估值，有广义遗传力和狭义遗传力之分前者指遗传方差占表遗传力和狭义遗传力之分前者指遗传方差占表型方差的比值；后者指遗传方差中基因相加放在型方差的比值；后者指遗传方差中基因相加放在方差对表型方差的比例狭义遗传力的估算中排方差对表型方差的比例狭义遗传力的估算中排除了显性偏向、上位性效应和环境的影响，所得除了显性偏向、上位性效应和环境的影响，所得结果较广义遗传力更为可靠结果较广义遗传力更为可靠遗传力的概念遗传力的概念(一一)、概念、概念 数量性状的表数量性状的表现现型型值值〔 〔P〕 〕是其基因型是其基因型值值〔 〔G〕 〕和和环环境境〔 〔E〕 〕共同作用的共同作用的结结果，即：果，即：P＝＝G＋＋E 在基因型和在基因型和环环境境间间没有互作的前提下，一个没有互作的前提下，一个群体的群体的表型表型值变值变量量=基因型基因型值变值变量十量十环环境境变变量，即量，即 VP=VG十十VE,或或σP²=σG²+σe² 基因型基因型变变量分解量分解为为三个三个组组成部分。

即基因加成部分即基因加性效性效应变应变量量(VA )、、显显性性变变量量(VD)和上位和上位变变量量(VI)基因加性效基因加性效应变应变量：是指等位基因和非等位基量：是指等位基因和非等位基因因间间累加作用引起的累加作用引起的变变量量;显显性性变变量：是指等位基因量：是指等位基因间间相互作用引起的相互作用引起的变变量量;上位上位变变量：是指非等位基因量：是指非等位基因间间相互作用引起的相互作用引起的变变量后两部分量后两部分变变量量统统称称为为非加性非加性遗传变遗传变量量 (VNA) 基因型基因型变量可以用下式表示：量可以用下式表示： VG= VA + VD+ VI VG= VA + VD+ VI 于是，表于是，表现型型变量的公式可以表示量的公式可以表示为：： VP= VA + VD VP= VA + VD十十VIVI十十VE= VAVE= VA十十VNAVNA十十VEVE基基因因型型总变量量占占表表现型型变量量的的比比值，，是是广广义遗传力力〔〔H²H²〕〕，，包包括加性效括加性效应和非加性效和非加性效应两两类遗传变量。

量 , ,即即基因加性效基因加性效应变量占表量占表现型型变量的比量的比值，是狭，是狭义遗传力力(h²)(h²)，即，即 根据根据选择选择差和得到的差和得到的实实践改良效果估算的践改良效果估算的遗传遗传力，叫力，叫现实现实遗传遗传力〔力〔 〕它是选择选择呼呼应应与与选择选择差之比，即：差之比，即： = R/S = R/S(二二)遗传力的性质遗传力的性质1、不易受环境影响性状的遗传力、不易受环境影响性状的遗传力较易受环境影响办理状要高；较易受环境影响办理状要高；2、变异系数小的性状的遗传力较、变异系数小的性状的遗传力较变异系数大的性状高；变异系数大的性状高；3、质量性状〔经数量化处置〕的、质量性状〔经数量化处置〕的遗传力较数量性状的高遗传力较数量性状的高在实际上遗传力值应介于在实际上遗传力值应介于0－－1之之间当性状完全受环境条件作用间当性状完全受环境条件作用时，遗传力为时，遗传力为0；完全受遗传因子；完全受遗传因子控制时，遗传力等于控制时，遗传力等于1由于估算。

由于估算方法不准确，取样不恰当，遗传方法不准确，取样不恰当，遗传力能够超出实际估算范围力能够超出实际估算范围 表表6-1 一些树种高、木材比重和干形的狭义遗传力估值一些树种高、木材比重和干形的狭义遗传力估值〔三〕影响遗传力的要素〔三〕影响遗传力的要素1 群体：估算出来的遗传力只适用于在特群体：估算出来的遗传力只适用于在特定时间和空间下用于估算遗传力的那个群定时间和空间下用于估算遗传力的那个群体群体不同，估算出来的遗传力不会完体群体不同，估算出来的遗传力不会完全一样2 环境：同一类苗木，在不同环境条件下，环境：同一类苗木，在不同环境条件下，如一批生长在温室，另一批生长在大田，如一批生长在温室，另一批生长在大田，在温室内因环境方差小，遗传力会比大田在温室内因环境方差小，遗传力会比大田的高3 林分年龄：年龄不同，控制性状表现的林分年龄：年龄不同，控制性状表现的基因会改动，遗传力的估值也有不同基因会改动，遗传力的估值也有不同4 估算方法：计算不同，所得遗传力估值估算方法：计算不同，所得遗传力估值也不同总之，遗传力的估算会受供试资料的性质、总之，遗传力的估算会受供试资料的性质、群体大小、取样方法、估算方法、实验条群体大小、取样方法、估算方法、实验条件等等影响，它是一个方差，不是固定值。

件等等影响，它是一个方差，不是固定值因此，由遗传力估算出来的改良效果，在因此，由遗传力估算出来的改良效果，在运用时是有条件的，估算值在多数情况下运用时是有条件的，估算值在多数情况下只表示相对的大小，不能够确切须步改良只表示相对的大小，不能够确切须步改良效果 n三、三、实验资料料n某一植物不同某一植物不同杂交交组合的合的杂交交亲本，本，杂种种F1、、 F2 和和B1(F1×P1) 、、B2(F1×P2) 资料n四、四、实验方法与步方法与步骤n根据以下两根据以下两组资料，按公式分料，按公式分别求算求算遗传力遗传力的估算遗传力的估算 〔一〕由无性系估算广义遗传力〔一〕由无性系估算广义遗传力 〔二〕由亲一子关系估算狭义遗传力〔二〕由亲一子关系估算狭义遗传力 〔三〕由自在授粉子代资料估算遗传力〔三〕由自在授粉子代资料估算遗传力 〔四〕由控制授粉子代资料估算遗传力〔四〕由控制授粉子代资料估算遗传力〔一〕由无性系估算广义遗传力〔一〕由无性系估算广义遗传力 主要步骤如下：主要步骤如下： (1〕〕把把原原株株繁繁衍衍成成无无性性系系，，每每个无性系含假设干株；个无性系含假设干株； (2) 按田间设计要求栽种；按田间设计要求栽种； (3) 按按无无性性系系进进展展性性状状观观测测，，得得观测值；观测值； (4〕〕对对数数据据作作变变量量分分析析，，列列出出变量分析表；变量分析表； (5〕〕根根据据变变量量计计算算遗遗传传力力〔〔反反复力〕。

复力〕 表表6-2 杨树无性系高生长变量分析杨树无性系高生长变量分析期望均方值期望均方值 遗传力遗传力 例例6-1：有：有8个杨树无性系，每个无性系含个杨树无性系，每个无性系含5株株(r),对对3年生时树高年生时树高作变量分析，结果如表作变量分析，结果如表 〔 〔二二〕 〕由由亲亲一子关系估算狭一子关系估算狭义遗传义遗传力力 ．由子代与一个．由子代与一个亲亲本的回本的回归归系数估算系数估算遗传遗传力力回回归归系数可按下式系数可按下式计计算算 式中：式中：X ——亲亲本性状本性状观测值观测值 Y ——子代性状子代性状观测值观测值在用回在用回归归系数估算系数估算遗传遗传力力时该时该当留意以下各点：当留意以下各点：〔 〔1〕 〕亲亲子代的子代的树龄树龄必需一致或相近；必需一致或相近；〔 〔2〕 〕亲亲子代子代应处应处于一于一样样或或类类似的似的环环境条件下；境条件下；〔 〔3〕 〕丈量丈量亲亲子代性状的子代性状的单单位位应应一一样样 例例6-2：：设设在油松人工林中在油松人工林中选择选择10株株优树优树，分，分别别采种，按采种，按家系育苗造林。

家系育苗造林优树优树10年生年生树树高与其子代高与其子代10年生年生树树高平均高平均值值列入表列入表6-3母树号母树号母树母树(z)(z)子代子代(y)(y)1 12 23 34 45 56 6７７8 89 910102 2．．0 02 2．．5 53 3．．0 02 2．．1 12 2．．4 42 2．．3 32 2．．2 22 2．．8 82 2．．6 62.72.72 2．．4 42.22.22 2．．5 52 2．．3 32 2．．1 12 2．．8 81 1．．9 92.52.52.42.43.03.0〔三〕由自在授粉子代资料估算遗传力〔三〕由自在授粉子代资料估算遗传力1.由没有区组反复的田间设计资料估算由没有区组反复的田间设计资料估算设设有有f个个家家系系，，每每个个家家系系有有r株株苗苗，，那那么么共共有有fr个个数数据变量分析的方式如表据变量分析的方式如表6-4表表6-4 f6-4 f个家系，个家系，r r次反复次反复变变量分析方式表量分析方式表例例6-3：从：从侧侧柏人工林中柏人工林中选择选择的的8株株树树上分上分别别采种，并按家系育苗采种，并按家系育苗造林。

子代造林子代4年生年生时时丈量各家系全部丈量各家系全部12株苗木的高生株苗木的高生长长，，结结果如表果如表6-5表表6-5 侧侧柏半同胞家系柏半同胞家系单单株高生株高生长长〔〔cm〕〕将上列数据列出变量分析表：将上列数据列出变量分析表：表表6-6 侧柏半同胞家系高生长变量分析侧柏半同胞家系高生长变量分析由于半同胞子代基因型由于半同胞子代基因型值值〔〔G〕是〕是亲亲本育种本育种值值〔〔A〕的一半，根据〕的一半，根据变变量性量性质质，有：，有：于是，假于是，假设设按半同胞按半同胞单单株的表株的表现进现进展展选择选择，可用以下公式估算，可用以下公式估算单单株株遗传遗传力力从从期期望望均均方方的的构构造造可可知知，，家家系系均均方方〔〔Mf〕〕既既包包含含了了家家系系的的遗遗传传变变量量，，又又包包含含了了环环境境变变量量因因此此，，如如按按家家系系平平均均值值选选择择时时，，可可用用家家系系均均方方中中遗遗传传变变量量部部分分占占家家系系均方的比值作为家系遗传力的估计值根据本例均方构造，有：均方的比值作为家系遗传力的估计值根据本例均方构造，有：家系遗传力家系遗传力本例的家系遗传力公式还可写成以下方式本例的家系遗传力公式还可写成以下方式2．由．由单单点完全随机区点完全随机区组资组资料估算料估算 f个个家家系系，，b次次反反复复，，n株株小小区区的的分分析析方方式式如如表表6-7 3．由多点完全随机区．由多点完全随机区组资组资料估算料估算f个个家家系系，， s个个造造林林点点，，b次次反反复复〔 〔区区组组〕 〕，，n株株小小区区的的变变量量分分析析方方式式如如表表6-8。

表表6-8 变变量分析方式表量分析方式表由由变变量量分分析析求求得得各各均均方方值值后后，，可可经经过过表表6-8期期望望方方式式作作简简单单计计算算，，求求得得各各变变量量组组分分σν的的分分量量=(MF-MFS)/nbs求求得得变变量量组组分分后后，，即即可可估算估算遗传遗传力例例6-4：设松树种子园自在授粉半同胞家系〔：设松树种子园自在授粉半同胞家系〔f〕为〕为29个，在个，在3个地点〔个地点〔s〕作完全〕作完全随机组造林实验，每个地点反复〔随机组造林实验，每个地点反复〔b)6次，次，10株〔株〔n〕小区变量分析结果如下表：〕小区变量分析结果如下表：表表6-9 多点半同胞子代测定变量分析多点半同胞子代测定变量分析 n五、实验作业五、实验作业n提交实验报告一份提交实验报告一份。