耳聋基因诊断ppt课件.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,耳聋基因诊断,揭示耳聋背后的秘密,哈尔滨医科大学附属第四医院检验科,梁红艳,背 景,1,耳聋的遗传模式,2,常见的致聋基因及位点,3,耳聋基因诊断的方法,4,常用,SNP,检测方法,5,传音、感音及其听觉传导通路中的听神经和各级中枢发生病变，引起听功能障碍，产生不同程度的听力减退根据听力减退的程度不同，又称之为听力障碍、听力减退、听力下降等耳聋,背 景,1,听力正常父亲,+,听力正常母亲,听力,普通人中，大约有,56%,的人也会携带隐性状态的耳聋基因突变如果夫妻双方都携带相同的耳聋基因，就算听力正常，也有高达,25%,的几率生育出聋儿例如：父,听力正常,SLC26A4 2168,位点杂合突变,母,听力正常,SLC26A4 IVS-7,位点杂合突变,孩子,先天性耳聋,SLC26A4 2168,和,IVS-7,位点杂合突变,按遗传模式分类,常染色体显性遗传,常染色体隐性遗传,X,和,Y,染色体伴性遗传,线粒体母系遗传,耳聋的遗传模式,2,常染色体显性遗传,在一个大家系中可以有很多耳聋病人，耳聋就像一个幽灵一样在这个家系中游荡,常染色体隐性遗传,比例最高，由于这种患儿需要父母各携带一个致病等位基因，因此通常表现为散发病例,X,和,Y,染色体伴性遗传,线粒体母系遗传,一般比较少见，,X,连锁遗传多是由母亲传给儿子，女儿一般不发病，或者病情较轻，,Y,连锁遗传是男性相传，更为少见,母亲将基因传给儿子或女儿，有些线粒体基因突变患儿可以出现氨基糖甙类药物耳毒性，这种患儿即使使用正常剂量的药物，有时一针即可致聋,常染色体显性遗传,DFNA,，迄今已定位,27,型（,DFNA1,DFNA31),NSHI,类型,基因,临床表现,定位,常染色体显性遗传：,学语后进行性感音神经性聋,，,语言发育正常,DFNA1,HAID1,低频听力受损,5q31,DFNA2,GJB3,KCNQ4,在,1 000 Hz,以上频率每年下降,1,5 dB,；,1 000 Hz,以下每年下降,0.2,0.5 dB,。

逐渐发展为全频率中,-,重度聋,1p34,DFNA3,GJB2,GJB6,学语前中,-,重度感音神经性聋，听力常保持稳定或仅呈轻微进行性下降,13q12,DFNA5,DFNA5,听力减退与年龄和频率有关，多为高频神经性聋,7p15,DFNA6,低频听力受损,DFNA8,-tectorin,学语前中,-,重度感音神经性聋，听力常保持稳定或仅呈轻微进行性下降,11q22-24,DFNA9,COCH,听力减退与年龄和频率有关，多为高频神经性聋,14q12-13,DFNA11,Myosin7A,听力减退与年龄和频率有关，多为高频神经性聋,11q12.3-21,DFNA12,-tectorin,学语前中,-,重度感音神经性聋，听力常保持稳定或仅呈轻微进行性下降,11q22-24,DFNA15,POU4F3,听力减退与年龄和频率有关，多为高频神经性聋,5q31,NSHI,类型,基因,临床表现,定位,常染色体隐性遗传：,双耳学语前非进行性重,-,深度感音神经性聋,DFNB1,GJB2,临床表型不衡定，可为先天性聋或,1,10,岁期间进行性听力下降，受损程度可从轻重度聋,13q12,DFNB2,Myosin7A,听力下降在,500,8 000 Hz,大于,90 dB,11q12.3-21,DFNB3,Myosin15,17q11.2,DFNB4,PDS,（,SLC26A4),50%,合并有前庭导水管扩大,7q31,DFNB8,学语后进行性听力减退，但比常染色体显性遗传发病年龄早，听力下降速度快,DFNB9,OTOF,2p22-23,DFNB21,-tectorin,11q22-24,常染色体隐性遗传,常见的致聋基因及位点,3,GJB2,12rRNA,GJB3,常见致聋基因,SLC26A4,常见的致聋基因及位点,3,GJB2,GJB2,基因突变是非综合征型常染色体隐性遗传性语前聋的主要原因,种族差异明显，在欧美地区，,35delG,为主；在东亚,包括中国、日本和韩国,235delC,是常见的,GJB2,突变,据报道，中国非综合征型耳聋人群中，,235delC,占,16.3%,。

但我们的研究表明，在黑龙江地区，约占,30%,左右治疗方法：人工耳蜗植入,常见的致聋基因及位点,3,GJB2,GJB2,常见的突变位点,1,、,35delG,：在欧美多见，亚洲少2,、,79G-A,突变：目前认为是基因多态性,3,、,109A-G,突变：目前认为是基因多态性,4,、,176del 17bp,5,、,235delC,：在中国最常见,6,、,299-300delAT,7,、,341A-G,突变,也称,PDS,基因，这种基因突变可以造成两种临床表现，一是,Pendred,综合征，表现为甲状腺肿大和耳聋；另外一些患儿仅表现为耳聋，,CT,检查可以发现前庭导水管扩大,这些孩子在出生后有些听力是正常的，通常在一次轻微的外伤后（特别是头部外伤）出现听力下降，经过一段时间后听力可以部分恢复，但是经过多次发作，听力逐渐下降，最终需要植入人工耳蜗来帮助这些患儿恢复听力SLC26A4,对于这些孩子进行,SLC26A4,基因诊断，可以早期发现，提醒家长注意尽量避免孩子受到外伤，延缓听力下降的时间，可以为孩子争取宝贵的语言发育时间常见的致聋基因及位点,3,12rRNA,线粒体基因突变与氨基糖类药物的耳毒性有关,常用氨基糖类药物有庆大霉素、链霉素、小诺霉素、卡那霉素、丁胺卡那霉素、新霉素等等,临床上应用较为广泛，这些药物的过量或长期应用可以导致耳鸣、听力下降，但也有一些患者仅应用一次这些药物就出现耳鸣，甚至严重的听力下降，这些患者往往就与线粒体基因突变有关，也有些患者并不表现为氨基糖甙类药物的耳毒性，即使不用药，也会像其它基因突变一样出现耳聋。

常见的致聋基因及位点,3,GJB3,常见的致聋基因及位点,3,GJB3,纯合突变容易导致孩子后天感音神经性耳聋,耳聋基因诊断的方法,4,芯片法,荧光探针法,ARMS-PCR,法,测序法,芯片法,荧光,PCR,法,ARMS-PCR,法,测序法,有批号的厂商,博奥,济南英盛,智海生物,中生北控,检测位点,GJB2 35del G,GJB2 176 del 17bp,GJB2 235del C,GJB2 299-300delAT,GJB3 538 CT,SLC26A4 2168 AG,SLC26A4 IVS-7,12sRNA 1494 CT,12sRNA 1555 AG,济南英盛：,GJB2 235del C,智海生物,12sRNA 1494 CT,12sRNA 1555 AG,GJB2 35del G,SLC26A4 IVS-7,12sRNA 1494 CT,12sRNA 1555 AG,根据需要检测,优点,基因位点多,快速，成本低，无须特殊设备；可避免实验室污染,成本低,可发现其他基因突变，是金标准,缺点,需要基因芯片检测的系列设备,位点少，需要后续检测,操作繁琐，耗时长；易造成实验室污染,需要特殊设备；,成本高,位点少，需要后续检测,成本高,易造成实验室污染,适用大批量检测,适用大批量检测,技术含量高,测序技术,金标准！,常用,SNP,检测方法,5,PCR-RFLP,分型技术,常用,SNP,检测方法,5,TaqMan,探针分型技术,常用,SNP,检测方法,5,Multiplex SNaPshot,分型技术,常用,SNP,检测方法,5,电离飞行时间质谱（,MALDI-TOF MS,）分型技术,常用,SNP,检测方法,5,HRM,技术,常用,SNP,检测方法,5,等位基因特异,PCR,技术,常用,SNP,检测方法,5,。