实验一显微镜的基本知识与使用ppt课件.ppt

实验一实验一 显微镜的基本知识及使用方法显微镜的基本知识及使用方法一、目的要求一、目的要求l学习显微镜的原理、使用方法和保养学习显微镜的原理、使用方法和保养 l利用显微镜观察微生物标本利用显微镜观察微生物标本l学习显微数码系统的使用方法学习显微数码系统的使用方法 l学习生物绘图学习生物绘图二、实验程序二、实验程序了解显微镜的构造、原理了解显微镜的构造、原理利用显微镜观察微生物标本利用显微镜观察微生物标本了解显微数码系统的使用方法了解显微数码系统的使用方法生物绘图与拍照生物绘图与拍照三、实验材料三、实验材料l微生物染色装片标本微生物染色装片标本l显微镜、计算机、香柏油、二甲苯或乙醇显微镜、计算机、香柏油、二甲苯或乙醇乙醚混合液、擦镜纸等乙醚混合液、擦镜纸等四、实验步骤四、实验步骤（一〕了解显微镜的构造、原理（一〕了解显微镜的构造、原理链接实验录相链接实验录相    1、光学部分：、光学部分：   接目镜、接物镜、照接目镜、接物镜、照明装置明装置(聚光镜、虹彩聚光镜、虹彩光圈、反光镜等光圈、反光镜等)  它使检视物放大，造它使检视物放大，造成物象                              2、机械部分：、机械部分：  镜座、镜臂、镜筒、镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调载物台转移器、粗调节器、细调节器等部节器、细调节器等部件。

件   它起着支持、调理、它起着支持、调理、固定等作用固定等作用 显微镜的构造显微镜的构造图图1-2  光学显微镜的成像原理光学显微镜的成像原理倒立的虚像倒立的虚像工作原理工作原理 1、、 放大倍数放大倍数=接物接物镜放大倍数放大倍数×接目接目镜放大倍数放大倍数                                                                 2、、显微微镜的分辨率的分辨率   是表示是表示显微微镜辨析物体〔两端〕两辨析物体〔两端〕两点之点之间距离的能力，可用公式表示距离的能力，可用公式表示为：：                                                       D=λ/2n· sin(α/2)                                                                   式中式中D：物：物镜分辨出物体两点分辨出物体两点间的最短距离的最短距离                                                                ：可：可见光的波光的波长〔平均〔平均0.55m)                                n: 物物镜和被和被检标本本间介介质的折射率。

的折射率                      ：：镜口角〔即入射角）口角〔即入射角）3、数、数值孔径孔径 N.A=n.sin〔〔α/2））l①①干燥系物干燥系物镜  以空气以空气为介介质，如常用的，如常用的40×以下的以下的物物镜，数，数值孔径均小于孔径均小于1l②②油浸系物油浸系物镜  常以香柏油常以香柏油为介介质，此物，此物镜又叫油又叫油镜头，其放大率，其放大率为90×—100×，数，数值孔孔值大于大于1l根据物根据物镜放大率的高低，可分放大率的高低，可分为：：l①①低倍物低倍物镜  指指1×—6×，，NA值为0.04—0.15；；l②②中倍物中倍物镜  指指6×—25×，，NA值为0.15— 0.40；；l③③高倍物高倍物镜  指指25×—63×，，NA值为0.35—0.95；；l④④油浸物油浸物镜  指指90×—100×，，NA值为1.25—1.40油镜使用的原理油镜使用的原理Ø增加照明亮度：油增加照明亮度：油镜，即油浸接物，即油浸接物镜当光线由反光由反光镜通通过玻片与玻片与镜头之之间的空气的空气时，由于空气与玻片，由于空气与玻片的密度不同，使光的密度不同，使光线受到曲折，受到曲折，发生散射，降低了生散射，降低了视野的照明度。

若野的照明度若中中间的介的介质是一是一层油〔其折射率与油〔其折射率与玻片的相近），玻片的相近），则几乎不几乎不发生折射，生折射，增加了增加了视野的野的进光量，从而使物象光量，从而使物象更加清晰更加清晰Ø提高分辨率：香柏油〔提高分辨率：香柏油〔n=1.515〕〕为介介质时，其折射率与玻璃相近，光，其折射率与玻璃相近，光线经过载玻片后可直接通玻片后可直接通过香柏油香柏油进入物入物镜而不而不发生折射，从而增加生折射，从而增加数数值孔径达到提高分辨率的目的孔径达到提高分辨率的目的 （二〕了解显微数码系统的使用方法（二〕了解显微数码系统的使用方法l链接演示显微数链接演示显微数码系统软件的使码系统软件的使用方法用方法l演示拍照的方法演示拍照的方法l图片保存要求片保存要求l建文件建文件夹：：l   D:\环境境0511班班201922200****l图片：片：l        格式：格式：JPGl        文件名：文件名：环境境201922200****大大肠杆菌（杆菌（ 10×100 ））（三〕利用显微镜观察微生物标本l1、观察前的准备、观察前的准备l2、低倍镜观察、低倍镜观察l3、高倍镜观察、高倍镜观察l4、油镜观察、油镜观察l5、镜检完毕后的处理、镜检完毕后的处理1、观察前的准备、观察前的准备 （（1〕将显微镜置于平稳的实验台上，镜〕将显微镜置于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约为座距实验台边沿约为3－－4cm。

检查零件是检查零件是否齐全，镜头是否清洁否齐全，镜头是否清洁 （（2〕调节光亮度〕调节光亮度 （（3〕调节目镜及数值孔径大小〕调节目镜及数值孔径大小 链接实验录相链接实验录相2、低倍镜观察、低倍镜观察   将标本片放置在载物台上，用标本夹夹住，移动推动器，将标本片放置在载物台上，用标本夹夹住，移动推动器，使被观察的标本处在物镜正下方使被观察的标本处在物镜正下方    转动粗调节旋钮，使物镜调至接近标本处，用目镜观转动粗调节旋钮，使物镜调至接近标本处，用目镜观察并同时用粗调节旋钮慢慢下降载物台，直至物像出察并同时用粗调节旋钮慢慢下降载物台，直至物像出现，再用细调节旋钮使物像清晰为止现，再用细调节旋钮使物像清晰为止    用推动器移动标本片，找到合适的目的像并将它移到用推动器移动标本片，找到合适的目的像并将它移到视野中央进行观察视野中央进行观察 链接实验录相链接实验录相3、高倍镜观察、高倍镜观察l在低倍物镜观察的基础上转换高倍物镜较好在低倍物镜观察的基础上转换高倍物镜较好的显微镜，低倍、高倍镜头是同焦的，在正常的显微镜，低倍、高倍镜头是同焦的，在正常情况下，高倍物镜的转换不应碰到载玻片或其情况下，高倍物镜的转换不应碰到载玻片或其上的盖玻片。

上的盖玻片l若使用不同型号的物镜，在转换物镜时要从侧若使用不同型号的物镜，在转换物镜时要从侧面观察，避免镜头与玻片相撞然后从目镜观面观察，避免镜头与玻片相撞然后从目镜观察，调节光照，使亮度适中，缓慢调节粗调节察，调节光照，使亮度适中，缓慢调节粗调节旋钮，使载物台下降，直至物像出现，再用细旋钮，使载物台下降，直至物像出现，再用细调节旋钮调至物像清晰为止，找到需观察的部调节旋钮调至物像清晰为止，找到需观察的部位，并移至视野中央进行观察位，并移至视野中央进行观察l链接实验录相链接实验录相（（1 1〕升高镜筒，将油镜转至工作位〕升高镜筒，将油镜转至工作位置在玻片标本区域滴加香柏油在玻片标本区域滴加香柏油2 2〕从侧面注视，用粗调节器慢慢〕从侧面注视，用粗调节器慢慢降下镜筒，使油镜浸在油中几乎与降下镜筒，使油镜浸在油中几乎与装片接触，但不可压及装片，以免装片接触，但不可压及装片，以免压碎玻片，损坏镜头压碎玻片，损坏镜头3 3〕将光线调亮，目镜观察，用细〕将光线调亮，目镜观察，用细调节器校正焦距，直至物像看清为调节器校正焦距，直至物像看清为止仔细观察并绘图仔细观察并绘图链接实验录相链接实验录相4、油镜观察、油镜观察5、镜检完毕后的处理、镜检完毕后的处理（（1〕观察完毕，下降载物台，取下载玻片。

〕观察完毕，下降载物台，取下载玻片2〕将油镜头转出，先用擦镜纸擦去镜头上的香柏油，再用擦镜纸沾少〕将油镜头转出，先用擦镜纸擦去镜头上的香柏油，再用擦镜纸沾少许二甲苯〔或乙醚酒精混合液〕擦掉残留的香柏油，最后再用干净的许二甲苯〔或乙醚酒精混合液〕擦掉残留的香柏油，最后再用干净的擦镜纸擦干残留的二甲苯〔注意向一个方向擦拭）擦镜纸擦干残留的二甲苯〔注意向一个方向擦拭）3〕将各部分还原转动物镜转换器，使物镜头不与载物台通光孔相对，〕将各部分还原转动物镜转换器，使物镜头不与载物台通光孔相对，而是成八字形位置，再将镜筒下降至最低，同时降下聚光器用柔软而是成八字形位置，再将镜筒下降至最低，同时降下聚光器用柔软纱布清洁载物台等机械部分，最后套上镜罩，置阴凉干燥处存放纱布清洁载物台等机械部分，最后套上镜罩，置阴凉干燥处存放链接实验录相链接实验录相6、结果报告、结果报告l拍照与提交图片拍照与提交图片l   提交在高倍镜和油镜下观察到的微生物提交在高倍镜和油镜下观察到的微生物（（**菌〕形态图片，注明总放大倍数菌〕形态图片，注明总放大倍数l生物绘图生物绘图五、本卷须知五、本卷须知    1、不准擅自拆卸、不准擅自拆卸显微微镜的任何部件的任何部件,以免以免损坏。

坏                          2、、镜面只能用擦面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保擦，不能用手指或粗布，以保证光光洁度                                                       3、、观察察标本本时，必，必须依次用低、中、高倍依次用低、中、高倍镜，最后用油，最后用油镜当目视接目接目镜时，，特特别在使用油在使用油镜时，切不可使用粗，切不可使用粗调节器，以免器，以免压碎玻片碎玻片或或损伤镜面                                  4、、观察察时，两眼，两眼睁开，开，养成两眼能养成两眼能够轮换观察的察的习惯，以免眼睛疲，以免眼睛疲劳，并且能，并且能够在左眼在左眼观察察时，右眼注，右眼注视绘图                                                              5、拿、拿显微微镜时，一定要右手拿，一定要右手拿镜臂，左手托臂，左手托镜座，不可座，不可单手拿，更不可手拿，更不可倾斜拿                                           6、、显微微镜应存放在阴凉干燥存放在阴凉干燥处，以免，以免镜片滋生霉菌而腐片滋生霉菌而腐蚀镜片。

片六、六、 思考题思考题1、、 使用油镜时，为什么必须用镜头油？使用油镜时，为什么必须用镜头油？  2、、 使用油镜应特别注意哪些问题？使用油镜应特别注意哪些问题？实验结束后请确保油镜头擦拭干净！请值日同学留下。