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有效磷地测定实用标准文案土壤有效磷的测定（0.5molL-1NaHCO3浸提—钼锑抗比色法）一、实验目的土壤中有效磷的含量，随土壤类型、气候、施肥水平、灌溉、耕作栽培措施等条件的不同而异通过土壤有效磷的测定，有助于了解近期内土壤供应磷的情况，为合理施用磷肥及提高磷肥利用率提供依据土壤速效磷的测定中，浸提剂的选择主要是根据土壤的类型和性质测定浸提剂是否适用，必须通过田间试验来验证浸提剂的种类很多，近20年各国渐趋于使用少数几种浸提剂，以利于测定结果的比较和交流我国目前使用最广学的浸提剂是0.5molL-1NaHCO3溶液（Olsen法），测定结果与作物反应有良好的相关性[注1]，适用于石灰性土壤、中性土壤及酸性水稻土此外还使用0.03molL-1NH4F-0.025molL-1HCl溶液（BrayⅠ法）为浸提剂，适用于酸性土壤和中性土壤同一土壤用不同的方法测得的有效磷含量可以有很大差异，即使用同一浸提剂，而浸提时的土液比、温度、时间、振荡方式和强度等条件的变化，对测定结果也会产生很大的影响所以有效磷含量只是一个相对的指标只有用同一方法，在严格控制的相同条件下，测得的结果才有相对比较的意义。

在报告有效磷测定的结果时，必须同时说明所使用的测定方法二、实验原理石灰性土壤中磷主要以Ca-P（磷酸钙盐）的形态存在中性土壤Ca-P、Al-P（磷酸铝盐）、Fe-P（磷酸铁盐）都占有一定的比例0.5molL-1NaHCO3、（pH8.5）可以抑制Ca2+的活笥，使某些活性更大的与 Ca结合的P浸提出来；同时，也精彩文档实用标准文案可使比较活性的Fe-P和Al-P起水解作用而被浸出浸出液中磷的浓度很低，须用灵敏的钼蓝比色法测定，其原理详见土壤全磷的测定章节当土样含有机质较多时，会使浸出液颜色变深而影响吸光度，或在显色出现浑浊而干扰测定，此时可在浸提排荡后过滤前，向土壤悬液中加入活性碳脱色，或在分光光度计800nm波长处测定以消除干扰三、试剂配制（1）0.5molL-1NaHCO3(pH8.5)浸提剂42.0gNaHCO3（化学纯）溶于约800ml水中，稀释至1L，用浓NaOH调节至pH8.5（用pH计测定），贮于聚乙稀瓶或玻璃瓶中，用塞塞紧该溶液久置因失去CO2而使pH升高，所以如贮存期超过20天，在使用前必须检查并校准pH值2）无磷的活性碳粉和滤纸须做空白试验，证明无磷存在如含磷较多，须先用2molL-1HCl浸泡过液，用水冲洗多次后再用0.5molL-1NaHCO3浸泡过液，在布氏漏斗上抽滤，用水冲洗几次，最后用蒸馏水淋洗三次，烘干备用。

如含磷较少，则直接用0.5molL-1NaHCO3处理3）钼锑抗试剂10.0g钼酸铵[(NH4)6Mo7O244H2O]（分析纯）溶于300ml约60℃的水中，冷却另取181ml浓H2SO（4分析纯）慢慢注入约800ml水中，搅匀，冷却然后将稀H2SO4液入钼酸铵溶液中，随时搅匀，再加入100ml0.3%(m/v)酒石酸氧锑钾[K(SbO)C4H4O61H2O]溶液；最后用水稀释至2升，2盛于棕色瓶中，此为钼锑贮备液临用前（当天）称取 0.50g抗坏血酸（分析纯）溶于100ml钼锑贮备液中，此为钼锑抗试剂，在室温下有效期为24h，在2~8℃冰箱中可贮存7天4）磷标准贮备液（Cp=100mgL-1）称取105℃烘干2h的KH2PO4精彩文档实用标准文案（分析纯）0.4394g溶于200ml水中，加入5ml浓H2SO4（分析纯）转入1L容量瓶中，用水定容，该贮备液可长期保存5）磷标准工作液（Cp=5mgL-1）将一定量的磷标准贮备液用0.5molL-1NaHCO3溶液准确稀释20倍，该标准工作液不宜久存四、操作步骤1、将实验室准备好的风干后的土壤样品放入研钵中研磨，将研碎的土壤样品用带有筛底和筛盖的2mm筛孔的筛子过筛。

未通过筛子的土粒，再次研磨过筛，直至所有土壤样品全部过筛，只剩下砾石为止将剩余的砾石挑拣并入砾石中处理，切勿碾碎用天平分别称取过筛后的土样2g置于4个干燥的50ml塑料瓶中，加入0.5molL-1NaHCO3)浸提剂40ml，加1勺无磷活性碳，于往复振荡机上振荡301min，立即用无磷干滤纸过滤到干燥的50ml塑料瓶中2、在浸提土样的当天，吸取滤出液 10.00ml放入干燥的50ml塑料瓶中，加蒸馏水至30ml左右，加入5.00ml钼锑抗显色剂，慢慢摇动，使 CO2逸出再加入10.00ml水，充分摇匀，逐尽CO2定容至50ml在室温高于15℃处放置30min后，用1cm光径比色杯在700nm波长处测读吸光度，以空白溶液（10.00ml0.5molL-1NaHCO3溶液代替土壤滤出液，同上处理）为参比液，调节分光光度计的零点3、校准曲线：在测定土样的同时，准确吸取磷标准工作溶液0、2、4、6、8ml，分别放入 50ml容量瓶中，并用0.5molL-1NaHCO3溶液10ml,加水至30ml，加钼锑抗试剂5ml,定容至50ml,混匀显色，同待测液一样进行比色，绘成标准曲线，最后溶液中磷浓度为0、0.2、0.4、0.6、0.8mgL-1P。

五、数据收集及处理精彩文档实用标准文案(1) 磷标准工作溶液相关数据表（杯差：0.005）磷标准工作溶液02468体积（mL）溶液中磷浓度00.20.40.60.8（ mgL-1P）减去杯差后的00.0710.1940.2930.387吸光度A磷标准曲线标准曲线吸光度0.450.4y=0.498x-0.01020.350.30.250.20.150.10.05000.20.40.60.81磷浓度mgL-1根据磷标准曲线，样品的吸光度0、0.023、0.029、0.035、0.032在直线上找到相对应的磷浓度 Cp分别为0、0.067、0.079、0.091、0.085mgL-1再根据下面的公式可以计算样品中土壤有效磷：土壤有效磷（P），mgkg-1=显色液Cp*显色液体积*分取倍数/土壤质量式中： Cp——从校准曲求得土壤滤出液中磷的浓度，mgL-1P显色液体积——50ml代入相关数据到以上公式可得：土壤有效磷=Cp*50*（40/10）/2精彩文档实用标准文案=Cp*100因此将从校准曲求得土壤滤出液中磷的浓度Cp值0、0.067、0.079、0.091、0.085mgL-1分别代入以上公式可得到土壤有效磷数据如以下表：(2) 样品溶液相关数据表（杯差：0.005）管号空白1234减去杯差后的00.0230.0290.0350.032吸光度A样品中磷浓度00.0670.0790.0910.085（mgL-1）样品中土壤有06.77.99.18.5效磷（ mgkg-1）最后算得样品中土壤有效磷平均值为：(6.7+7.9+9.1+8.5)/4=8.05mgkg-1六、实验结论（ 1）已知用0.5molL-1NaHCO3浸提—钼锑抗比色法测定结果的评价标准如下：土壤有效P(mgkg-1)<55~10>10土壤有效P供应标准低（缺磷）中（边缘值）高（不缺磷）根据评价标准可见样品土壤有效磷含量为边缘值， 是处于缺磷和不缺磷之间，因此为了达到标准，土壤有效P供应还需要增加，有必要施加适量的磷肥。

2）误差分析：精彩文档实用标准文案从样品中土壤有效磷的数据来看，可以发现，虽然土壤样品是4个平行组，可是最后测出来的样品中土壤有效磷的数据在平均值上下波动比较大，误差也比较大而造成这样的情况可能有：1 、我们小组是分开行动的，有一部分同学取风干土样加浸提剂和无磷活性碳，有一部分同学去做磷标准工作溶液这样的结果就是磷标准工作溶液定容后显色30 多分钟，才开始往振荡好的样品里加钼锑抗显色剂和定容虽然最后磷标准液和样品是一起去测吸光度的，可是它们显色的时间都是不一样的，这样会导致一定的实验误差因此，应该等样品振荡好之后再制作磷标准液，尽量保证磷标准液和样品显色时间一样长2、在定容之前，我们都没有认真检查容量瓶有没有漏水因此，在定容的时候，我们在上下摇动容量瓶时有少量溶液流出，这也造成了一定的实验误差3 、浸提时的土液比、温度、时间、振荡方式和强度等条件的变化，对测定结果也会产生很大的影响其中，在20—30摄氏度提取温度范围内，以24—26摄氏度为标准，温度每升高1摄氏度，土壤有效磷含量增加0.43mg/kg同时，有效磷的测定值也随浸取剂pH值的上升而增大，因此浸取剂pH值的变化是不可忽视的碳酸氢钠溶液最好临时现配，浸提前应该要将浸取剂的pH调至8.5。