狂犬病及疫苗课件.ppt

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗(yìmiáo)(yìmiáo)第一页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗狂犬病n n狂犬病又称恐水症（hydrophobia）：是狂犬病病毒引起的一种(yī (yī zhǒnɡ)zhǒnɡ)人畜共患的中枢神经系统急性传染病n n多见于狗、狼、猫等食肉动物，人多因被病兽咬伤而感染死亡率几乎100%第二页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗狂犬病毒狂犬病病毒(bìngdú)(Rabies virus)是一种嗜神经性病毒属于弹状病毒科弹状病毒科 (Rhabdoviridae)、狂、狂犬病毒属犬病毒属 (Lyssavirus)病原学病原学第三页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗病原学病原学A .病毒的子弹状外形；B. 蜂窝状核衣壳（RNP）；C. 病毒外表面(biǎomiàn)双层脂质突起第四页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗狂犬病毒狂犬病毒形态形态(xíngtài)(xíngtài)子弹子弹(zǐdàn)(zǐdàn)状，一端圆状，一端圆形，形，另一端平凹，宽另一端平凹，宽75-75-80nm80nm，，长长140-180nm140-180nm 第五页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗第六页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗核酸核酸：：-ssRNA-ssRNA衣壳衣壳：螺旋对称排列螺旋对称排列包膜包膜：： M2 M2蛋白（内层蛋白（内层(nèi cénɡ)(nèi cénɡ)）；脂蛋白（主要成分）；）；脂蛋白（主要成分）；刺突刺突：与病毒的感染性、血凝性和毒力等相关与病毒的感染性、血凝性和毒力等相关结构结构(jiégòu)第七页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗结构(jiégòu)(jiégòu)n n病毒主要编码病毒主要编码5种蛋白种蛋白(dànbái)(dànbái)：：糖蛋白（G）、核蛋白（N）、聚合酶（L）、磷蛋白（NS）和膜蛋白（M）•糖蛋白能与乙酰胆碱受体结合，决定了病毒具有嗜神经性，产生中和抗体有保护作用；•核蛋白抗原，是荧光免疫法检测的靶抗原，有助于临床诊断第八页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗 狂犬病病毒的动物感染狂犬病病毒的动物感染(gǎnrǎn)(gǎnrǎn)范围较广，主要在野生动范围较广，主要在野生动物及家畜中自然感染物及家畜中自然感染(gǎnrǎn)(gǎnrǎn)与传与传播 在易感动物或人的中枢神经细在易感动物或人的中枢神经细胞、主要是胞、主要是大脑海马回的锥体细大脑海马回的锥体细胞胞中增殖时，可以在胞质内形成中增殖时，可以在胞质内形成一个或多个、圆形或椭圆形、直一个或多个、圆形或椭圆形、直径为径为20nm20nm～～30nm30nm的嗜酸性包涵体，的嗜酸性包涵体，称称内基小体（内基小体（Negri bodyNegri body））。

通过检查动物或人脑组织标本通过检查动物或人脑组织标本中的内基小体，可以辅助诊断中的内基小体，可以辅助诊断狂犬病 培养培养(péiyǎng)(péiyǎng)特特性性第九页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗Negri body of rabies virus in infected neuron(intra-cytoplasmic)第十页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗内基小体为圆形或卵圆形嗜酸性小体，大小为1－20um，一般在5－10um之间，见于胞浆内任何部位或树突中，可有一个(yī ɡè)(yī ɡè)或多个，其形状与所在部位有关包涵体所在细胞可无明显病变，或可仅有尼氏体减少第十一页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗病原学病原学 来源于世界各地的狂犬病病毒来源于世界各地的狂犬病病毒(bìngdú)(bìngdú)分离株的抗原性不分离株的抗原性不同根据病毒同根据病毒(bìngdú)(bìngdú)表面表面糖蛋白糖蛋白G G的抗原性差异，狂犬病病的抗原性差异，狂犬病病毒可分为毒可分为4 4个血清型个血清型狂犬病病毒的主要抗原包括狂犬病病毒的主要抗原包括: : 糖蛋白糖蛋白G G: :病毒表面，刺激机体产生中和抗体、血凝抑病毒表面，刺激机体产生中和抗体、血凝抑制抗体和细胞免疫应答；制抗体和细胞免疫应答； 核蛋白核蛋白N N：病毒核心，属特异性抗原，能够以核蛋白：病毒核心，属特异性抗原，能够以核蛋白(RNP)(RNP)的形式诱生保护性的细胞免疫应答，但刺激机体不能的形式诱生保护性的细胞免疫应答，但刺激机体不能产生保护性抗体。

产生保护性抗体 抗原性抗原性第十二页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗狂犬病毒的血清型1 1、血清、血清(xuèqīng)(xuèqīng)1 1型：典型的狂犬病毒株，犬类传播型：典型的狂犬病毒株，犬类传播2、血清2型：Lagos蝙蝠株，分离自尼日利亚和中非共和国3 3、血清、血清3 3型：型：MokolaMokola病毒株，分离自尼日利亚田鼠病毒株，分离自尼日利亚田鼠4 4、血清、血清4 4型：型：DuvenhageDuvenhage病毒株，分离自南非狂犬病病毒株，分离自南非狂犬病人人5 5、血清、血清2 2型：型：EBL1EBL1蝙蝠株，分离自乌克兰蝙蝠蝙蝠株，分离自乌克兰蝙蝠6 6、血清、血清2 2型：未定型株，分离自乌克兰蝙蝠型：未定型株，分离自乌克兰蝙蝠第十三页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗病原学病原学野毒株（野毒株（wild strain）或街毒株（）或街毒株（street strain））:从自然从自然 感染的动物体内分离到的病毒感染的动物体内分离到的病毒固定毒株（固定毒株（fixed strain））:将野毒株在家兔脑内连续传将野毒株在家兔脑内连续传 代后，病毒对家兔致病的潜伏期可以随传代次数代后，病毒对家兔致病的潜伏期可以随传代次数 的增加而逐渐缩短；传代至的增加而逐渐缩短；传代至50代左右时，潜伏期代左右时，潜伏期 可由原来的可由原来的4周左右缩短为周左右缩短为4天～天～6天；但继续进行天；但继续进行(jìnxíng) 传代，潜伏期不再缩短。

这种变异的狂犬病病毒传代，潜伏期不再缩短这种变异的狂犬病病毒 被称为固定毒株（被称为固定毒株（fixed strain）） . 其其重要特点重要特点:是对家兔的致病性增强，对人或犬的是对家兔的致病性增强，对人或犬的 致病性明显减弱；并且从脑外途径对犬进行接种致病性明显减弱；并且从脑外途径对犬进行接种 时，不能侵入脑神经组织引起狂犬病时，不能侵入脑神经组织引起狂犬病 变异变异(biànyì)第十四页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗病毒抵抗力不强病毒抵抗力不强对热敏感，对热敏感，60℃℃经经30min或或100℃℃2min即可灭活即可灭活易被易被紫外线、甲醛、紫外线、甲醛、强酸、强碱、乙醇、乙醚等灭活强酸、强碱、乙醇、乙醚等灭活肥皂水、离子型或非离子型去垢剂亦有灭活作用肥皂水、离子型或非离子型去垢剂亦有灭活作用(zuòyòng)在冰冻干燥下可保存数年在冰冻干燥下可保存数年 病原学病原学抵抗力抵抗力第十五页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗传染源•发展中国家主要传染源是病犬，由病犬传播者约占80～90%，其次为猫和狼。

一般认为，动物发病(fā bìng)(fā bìng)前5天唾液中可含有病毒；•发达国家野生动物如狐狸、食血蝙蝠、臭鼬和浣熊等逐渐成为重要传染源；•无症状带毒的犬、猫等兽类亦有传染性； 流行病学流行病学(liú xínɡ (liú xínɡ bìnɡ xué)bìnɡ xué) 第十六页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗BATarmadillo第十七页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗Catfoxraccoon dog第十八页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗传播(chuánbō)(chuánbō)途径•被患病动物咬伤、抓伤，病毒自皮肤损伤处进入人体；•粘膜也是病毒的重要侵入(qīnrù)(qīnrù)门户，如眼结合膜被病兽唾液沾污等；•也可由染毒唾液污染外环境（石头、树枝等）后，再污染普通创面而传染流行病学流行病学(liú xínɡ (liú xínɡ bìnɡ xué)bìnɡ xué) 第十九页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗流行病学流行病学(liú xínɡ (liú xínɡ bìnɡ xué)bìnɡ xué) 易感人群 人群普遍易感，兽医、动物饲养者与猎手尤易遭感染； 接触家犬或野兽机会多的农村青壮年和儿童居多，男性多于女性。

流行特征 温血动物传染病，分布广泛，以家犬密度大的地方多见；全年(quán nián)发生，冬季发病率略低 第二十页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗2006，1至2007，5狂犬病发病(fā bìng)情况图第二十一页，共六十三页狂犬病及疫苗2002—2006狂犬病发病(fā bìng)情况第二十二页，共六十三页狂犬病及疫苗发病发病(fā bìng)(fā bìng)机理机理人被病犬咬伤人被病犬咬伤病毒随犬唾液经伤口进入人体病毒随犬唾液经伤口进入人体（病毒在入侵部位的肌肉细胞（病毒在入侵部位的肌肉细胞(xìbāo)(xìbāo)中增殖）中增殖）通过神经肌肉接头侵入周围神经通过神经肌肉接头侵入周围神经细胞细胞- -细胞间传递形式细胞间传递形式神经节直至中枢神经系统（脑组神经节直至中枢神经系统（脑组织中病毒迅速增殖扩散）织中病毒迅速增殖扩散）沿传出神经传至唾液腺及其他组织沿传出神经传至唾液腺及其他组织第二十三页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗临床表现临床表现 潜伏期潜伏期 人被狂犬咬伤，发病率为人被狂犬咬伤，发病率为30%～～60%。

咬伤后能否发病，咬伤后能否发病，与受伤部位、伤势程度及病畜唾液中的病毒量有关与受伤部位、伤势程度及病畜唾液中的病毒量有关. 短的短的5日，长的达日，长的达10余年，多数余年，多数(duōshù)1～～3个月；个月；儿童、头面部咬伤、伤口深、扩创不彻底者潜伏期短；儿童、头面部咬伤、伤口深、扩创不彻底者潜伏期短； 第二十四页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗典型临床表现典型临床表现：：前驱期前驱期 发热、头痛、乏力、周身不适等症状，对痛、声、光等刺激较发热、头痛、乏力、周身不适等症状，对痛、声、光等刺激较敏感，并有咽喉紧缩感约敏感，并有咽喉紧缩感约5050～～80%80%病人伤口部位及其附近有麻木或蚊走感；病人伤口部位及其附近有麻木或蚊走感；兴奋期或痉挛期兴奋期或痉挛期 处于兴奋状态，如极度恐惧、烦燥，对水声、风等刺激处于兴奋状态，如极度恐惧、烦燥，对水声、风等刺激非常敏感，易于引起发作性咽肌痉挛、呼吸困难等部分患者出现特殊的恐水非常敏感，易于引起发作性咽肌痉挛、呼吸困难等部分患者出现特殊的恐水症状，在饮水、见水、流水声或谈及饮水时，可引起严重咽喉肌痉挛，称为症状，在饮水、见水、流水声或谈及饮水时，可引起严重咽喉肌痉挛，称为“恐水症恐水症”（（hydrophobiahydrophobia））。

随后，部分病人出现精神失常、定向力障随后，部分病人出现精神失常、定向力障碍、幻觉、谵妄碍、幻觉、谵妄(zhānwàng)(zhānwàng)等病程进展很快；等病程进展很快；麻痹期麻痹期 痉挛减少或停止，出现弛缓性瘫痪，神志不清，最终因呼吸痉挛减少或停止，出现弛缓性瘫痪，神志不清，最终因呼吸麻痹和循环衰竭而死亡麻痹和循环衰竭而死亡 第二十五页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗体体体体液液液液免免免免疫疫疫疫：：感感染染后后机机体体产产生生中中和和抗抗体体有有中中和和游游离离 状态的病毒、阻断病毒进入神经细胞状态的病毒、阻断病毒进入神经细胞(shén jīnɡ xì bāo)内的作用内的作用 接接种种疫疫苗苗所所获获得得的的防防止止发发病病效效果果可可能能与与此此 有有关关但但抗抗体体对对已已进进入入神神经经细细胞胞内内的的病病毒毒难难以以 发发挥挥作作用用同同时也可能产生免疫病理反应而加时也可能产生免疫病理反应而加 重病情细胞免疫细胞免疫细胞免疫细胞免疫：：杀伤性杀伤性T淋巴细胞淋巴细胞特异性地作用于病毒的蛋白抗特异性地作用于病毒的蛋白抗原，引起病毒溶解；单核细胞产生的原，引起病毒溶解；单核细胞产生的IFN和和IL-2具有抑制具有抑制病毒复制病毒复制(fùzhì)和抵抗病毒攻击的作用。

和抵抗病毒攻击的作用免疫性免疫性第二十六页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗预防(yùfáng)(yùfáng) n n加强动物管理，控制(kòngzhì)(kòngzhì)传染源• •大力宣传养狗及其他野生动物的危害；大力宣传养狗及其他野生动物的危害；• •野犬应尽量捕杀；野犬应尽量捕杀；• •家犬应严格进行登记和疫苗接种；家犬应严格进行登记和疫苗接种；• •狂犬或患狂犬病的野兽应立即击毙焚毁或深埋，严禁剥皮狂犬或患狂犬病的野兽应立即击毙焚毁或深埋，严禁剥皮吃肉第二十七页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗预防(yùfáng)(yùfáng) 狂犬病暴露(bàolù)(bàolù)后预防（2006年10月卫生部发布《狂犬病暴露后处置工作规范（试行）》）第二十八页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗第二十九页，共六十三页狂犬病及疫苗伤口(shāngkǒu)(shāngkǒu)处理n n立即用肥皂水、消毒剂或单用清水反复清洗伤口，时间不低于立即用肥皂水、消毒剂或单用清水反复清洗伤口，时间不低于1515分钟，分钟，伤口深时要用注射器灌注反复冲洗；伤口深时要用注射器灌注反复冲洗；n n然后用酒精反复消毒，最后然后用酒精反复消毒，最后(zuìhòu)(zuìhòu)涂上碘酒；涂上碘酒；n n伤口不止血、不包扎、不缝合；伤口不止血、不包扎、不缝合；n n使用人抗狂犬病免疫球蛋白（使用人抗狂犬病免疫球蛋白（HRIGHRIG））10 IU/kg10 IU/kg或马抗狂犬病免疫血清或马抗狂犬病免疫血清20 IU/kg20 IU/kg在伤口底部和周围行局部浸润注射；同时以相同剂量做臂部在伤口底部和周围行局部浸润注射；同时以相同剂量做臂部肌肉注射。

肌肉注射n n必要时使用抗菌药物；伤口深时还要使用破伤风抗毒素必要时使用抗菌药物；伤口深时还要使用破伤风抗毒素第三十页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗预防接种预防接种(yù fánɡ jiē zhǒnɡ)(yù fánɡ jiē zhǒnɡ) 接种接种狂犬疫苗狂犬疫苗是预防发病是预防发病(fā bìng)(fā bìng)的重要措施的重要措施即所谓的即所谓的预防性治疗预防性治疗由于狂犬病的潜伏期由于狂犬病的潜伏期长，从被咬伤到发病一般经过几十天或几个长，从被咬伤到发病一般经过几十天或几个月，在此期间尽早接种疫苗可免于发病月，在此期间尽早接种疫苗可免于发病 严重咬伤者，除应给予严重咬伤者，除应给予高效价免疫血高效价免疫血清清进行被动免疫外，仍需要接种狂犬疫苗，进行被动免疫外，仍需要接种狂犬疫苗，可收到更佳效果可收到更佳效果第三十一页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗疫苗(yìmiáo)(yìmiáo)注射n n暴露前预防：适用于高危人群如兽医、山洞探险者、相关实暴露前预防：适用于高危人群如兽医、山洞探险者、相关实验人员验人员(rényuán)(rényuán)、动物管理员，、动物管理员，0 0、、7 7、、2121天各天各2ml2ml肌肉注射；肌肉注射；2 2～～3 3年加强注射一次；年加强注射一次；n n暴露后预防：暴露后预防：咬伤后注射越早越好咬伤后注射越早越好• •一般患者接种一般患者接种5 5次，次，0 0、、3 3、、7 7、、1414、、3030各接种一次；各接种一次；• •严重咬伤患者接种严重咬伤患者接种1010次，前次，前6 6天每日一针，天每日一针，1010、、1414、、3030、、9090天各天各1 1针。

针• •1 1年内再次咬伤者，年内再次咬伤者，0 0、、3 3天各接种一次；天各接种一次；1 1～～3 3年内再次咬伤，年内再次咬伤，0 0、、3 3、、7 7各接种一次；超过各接种一次；超过3 3年，重新接种年，重新接种n n注意疫苗储存在注意疫苗储存在2 2～８～８℃℃第三十二页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗疫苗疫苗(yìmiáo)(yìmiáo)的历史的历史公元七世纪：公元七世纪：公元七世纪：公元七世纪： 印度的佛教徒以喝蛇毒的方式获得对毒蛇的免印度的佛教徒以喝蛇毒的方式获得对毒蛇的免印度的佛教徒以喝蛇毒的方式获得对毒蛇的免印度的佛教徒以喝蛇毒的方式获得对毒蛇的免 疫应为最早的预防免疫的记载；疫应为最早的预防免疫的记载；疫应为最早的预防免疫的记载；疫应为最早的预防免疫的记载； 公元十世纪：公元十世纪：公元十世纪：公元十世纪： 据据据据19321932年在天津出版的《中国医学史》记年在天津出版的《中国医学史》记年在天津出版的《中国医学史》记年在天津出版的《中国医学史》记 载，中载，中载，中载，中国已有种痘的记载，但无法考证；国已有种痘的记载，但无法考证；国已有种痘的记载，但无法考证；国已有种痘的记载，但无法考证； 公元十六世纪：公元十六世纪：公元十六世纪：公元十六世纪： 据据据据17421742出版的《出版的《出版的《出版的《 医宗金鉴》记载，至少医宗金鉴》记载，至少医宗金鉴》记载，至少医宗金鉴》记载，至少(zhìsh(zhìshǎ ǎo)o)在在在在 1695 1695年中国已确有用干的天花痂粉吹鼻种痘、用棉花蘸天花痂粉年中国已确有用干的天花痂粉吹鼻种痘、用棉花蘸天花痂粉年中国已确有用干的天花痂粉吹鼻种痘、用棉花蘸天花痂粉年中国已确有用干的天花痂粉吹鼻种痘、用棉花蘸天花痂粉塞鼻和健康小孩穿几天出天塞鼻和健康小孩穿几天出天塞鼻和健康小孩穿几天出天塞鼻和健康小孩穿几天出天 花小孩内衣等方式种痘免疫的记载花小孩内衣等方式种痘免疫的记载花小孩内衣等方式种痘免疫的记载花小孩内衣等方式种痘免疫的记载. .公元十八世纪：英国公元十八世纪：英国公元十八世纪：英国公元十八世纪：英国Edward Jenner Edward Jenner 接种牛痘预防天花接种牛痘预防天花接种牛痘预防天花接种牛痘预防天花第三十三页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗疫苗疫苗(yìmiáo)(yìmiáo)的历史的历史公元十九世纪：公元十九世纪：公元十九世纪：公元十九世纪： 七十年代法国七十年代法国七十年代法国七十年代法国 Louis Pasteur Louis Pasteur研究减毒鸡霍研究减毒鸡霍研究减毒鸡霍研究减毒鸡霍 乱菌乱菌乱菌乱菌18851885年年年年Louis Pasteur Louis Pasteur 狂犬病疫苗的试验成功；狂犬病疫苗的试验成功；狂犬病疫苗的试验成功；狂犬病疫苗的试验成功；公元十九世纪末公元十九世纪末公元十九世纪末公元十九世纪末: : 美国美国美国美国 Salmon, Smith, Salmon, Smith,法国法国法国法国 ChamberlainChamberlain和和和和 Roux Roux分别研究的细菌疫苗分别研究的细菌疫苗分别研究的细菌疫苗分别研究的细菌疫苗: : 伤寒、霍伤寒、霍伤寒、霍伤寒、霍乱乱乱乱(huòluàn)(huòluàn)和鼠疫菌苗；和鼠疫菌苗；和鼠疫菌苗；和鼠疫菌苗；公元二十世纪：公元二十世纪：公元二十世纪：公元二十世纪： 1927 1927年上市的卡介苗，法国年上市的卡介苗，法国年上市的卡介苗，法国年上市的卡介苗，法国CalmetteCalmette和和和和 GuerinGuerin从牛分离的结核菌通过牛胆汁传代获得的减毒株制成的疫从牛分离的结核菌通过牛胆汁传代获得的减毒株制成的疫从牛分离的结核菌通过牛胆汁传代获得的减毒株制成的疫从牛分离的结核菌通过牛胆汁传代获得的减毒株制成的疫苗，苗，苗，苗，19361936年年年年Wilson Smith Wilson Smith 和和和和 Thomas Francis Thomas Francis分别在禽分别在禽分别在禽分别在禽胚中研胚中研胚中研胚中研 制成功灭活的甲型流感疫苗。

制成功灭活的甲型流感疫苗制成功灭活的甲型流感疫苗制成功灭活的甲型流感疫苗第三十四页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗疫苗疫苗(yìmiáo)(yìmiáo)的历史的历史 人用疫苗发展一览表人用疫苗发展一览表人用疫苗发展一览表人用疫苗发展一览表 减毒活疫苗减毒活疫苗减毒活疫苗减毒活疫苗 全病原体灭活疫苗全病原体灭活疫苗全病原体灭活疫苗全病原体灭活疫苗 纯化蛋白纯化蛋白纯化蛋白纯化蛋白/ /多糖疫苗多糖疫苗多糖疫苗多糖疫苗 基因工程疫苗基因工程疫苗基因工程疫苗基因工程疫苗 十八世纪十八世纪十八世纪十八世纪 天花疫苗，天花疫苗，天花疫苗，天花疫苗，17981798 十九世纪十九世纪十九世纪十九世纪 狂犬病疫苗，狂犬病疫苗，狂犬病疫苗，狂犬病疫苗，1885 1885 伤寒疫苗伤寒疫苗伤寒疫苗伤寒疫苗18961896 霍乱疫苗霍乱疫苗霍乱疫苗霍乱疫苗18961896 鼠疫疫苗鼠疫疫苗鼠疫疫苗鼠疫疫苗18971897 二十世纪二十世纪二十世纪二十世纪 BCG BCG（结核）（结核）（结核）（结核）1927 1927 百日咳，百日咳，百日咳，百日咳，1926 1926 （全细胞）（全细胞）（全细胞）（全细胞） 白喉，白喉，白喉，白喉，19231923 早早早早 期期期期 黄热疫苗，黄热疫苗，黄热疫苗，黄热疫苗， 1935 1935 流感疫苗，流感疫苗，流感疫苗，流感疫苗，1936 1936 破伤风，破伤风，破伤风，破伤风，19271927 立克次体，立克次体，立克次体，立克次体，1938 1938 二次大战二次大战二次大战二次大战 脊灰（口服）脊灰（口服）脊灰（口服）脊灰（口服） 脊灰（脊灰（脊灰（脊灰（ 注射）注射）注射）注射） 肺炎球菌肺炎球菌肺炎球菌肺炎球菌 乙型肝炎（酵母乙型肝炎（酵母乙型肝炎（酵母乙型肝炎（酵母 以以以以 后后后后 麻疹、腮腺炎麻疹、腮腺炎麻疹、腮腺炎麻疹、腮腺炎 狂犬病疫苗（新）狂犬病疫苗（新）狂犬病疫苗（新）狂犬病疫苗（新） 脑膜炎球菌脑膜炎球菌脑膜炎球菌脑膜炎球菌 或哺乳细胞表达）或哺乳细胞表达）或哺乳细胞表达）或哺乳细胞表达） 乙型脑炎乙型脑炎乙型脑炎乙型脑炎 乙型脑炎乙型脑炎乙型脑炎乙型脑炎 流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌 百日咳类毒素百日咳类毒素百日咳类毒素百日咳类毒素 风疹风疹风疹风疹(fēn(fēnɡ ɡ zhěn) zhěn)、水痘、水痘、水痘、水痘 甲肝疫苗甲肝疫苗甲肝疫苗甲肝疫苗 乙型肝炎（血浆乙型肝炎（血浆乙型肝炎（血浆乙型肝炎（血浆 腺病毒腺病毒腺病毒腺病毒 出血热出血热出血热出血热 森林脑炎森林脑炎森林脑炎森林脑炎 轮状病毒轮状病毒轮状病毒轮状病毒 伤寒（伤寒（伤寒（伤寒（ViVi多糖）多糖）多糖）多糖） 伤寒伤寒伤寒伤寒 流感嗜血（结合）流感嗜血（结合）流感嗜血（结合）流感嗜血（结合） 百日咳（无细胞）百日咳（无细胞）百日咳（无细胞）百日咳（无细胞） 第三十五页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗 狂犬狂犬(kuánɡ quǎn)(kuánɡ quǎn)疫苗的应用疫苗的应用一、狂犬一、狂犬(kuán(kuánɡ ɡ qu quǎ ǎn)n)疫苗的种类疫苗的种类二、狂犬疫苗的接种程序二、狂犬疫苗的接种程序 a. 暴露前程序暴露前程序 b. 暴露后程序暴露后程序 c. 其它免疫程序其它免疫程序第三十六页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗 狂犬疫苗的接种狂犬疫苗的接种(jiēzhòng)(jiēzhòng)程序程序1 . 暴露前免疫程序暴露前免疫程序(chéngxù)(chéngxù) 标准免疫程序标准免疫程序 0 7 28天天 0 28 56天天 第三十七页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗 暴露后免疫暴露后免疫(miǎnyì)(miǎnyì)程序程序 标准标准(biāozh(biāozhǔ ǔn)n)免疫程序免疫程序 0 3 7 14 28标准加强免疫程序标准加强免疫程序 0 3 7 14 28 90首剂加倍程序首剂加倍程序 2 1 1皮内多点免疫程序皮内多点免疫程序 8 4 1 1 2 2 2 0 1 1第三十八页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗非标准免疫程序(chéngxù)(chéngxù)（暴露后） 2 1 1免疫程 0 7 21 （天） 上臂三角肌注射：     几种疫苗几种疫苗(yìmiáo)(yìmiáo)接种后的抗体反应接种后的抗体反应 疫苗疫苗 第七天第七天 抗体抗体 iu/ml iu/ml 血清血清阳转率阳转率 HDV 0.5 (0-6.7) 17/26 HDV 0.5 (0-6.7) 17/26 (65%) (65%) PCEC 1.2 (0.1-21.9) 19/23 PCEC 1.2 (0.1-21.9) 19/23 (83%)(83%) PVRV 1.0 (0.1-2.3) 18/23 PVRV 1.0 (0.1-2.3) 18/23 (78% ) (78% ) 第三十九页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗 非标准免疫非标准免疫(miǎnyì)(miǎnyì)程序（暴露后）程序（暴露后） 8-4-1-1免疫程序 0 7 21 91（天） 注射时间 上 臂 肩胛(jiānji(jiānjiǎǎ) ) 大腿 腹壁 （天） 三角肌 上 方 内侧 0         7     28  91  每点0.1ml 第四十页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗非标准免疫程序非标准免疫程序(chéngxù)(chéngxù)（暴露后）（暴露后） 皮内多点免疫皮内多点免疫(mi(miǎ ǎnyì)nyì)程序程序 2-2-2-0-1-1 注射时间注射时间 0 3 7 14 28 96（天）      2 2 2 0 1 1 第四十一页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗 狂犬狂犬(kuánɡ quǎn)(kuánɡ quǎn)疫苗接种后的效果疫苗接种后的效果评价评价 血清中和抗体：血清中和抗体： WHO：血清中和抗体≥ 0.5IU/ml 方法：方法： 小鼠脑内测定法小鼠脑内测定法 ( ( MNT ) 荧光灶抑制试验荧光灶抑制试验 ( ( RFFIT ) ELISA、乳胶乳胶(rǔjiāo)(rǔjiāo)(rǔjiāo)(rǔjiāo)凝集试验等只作参凝集试验等只作参考考第四十二页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗 狂犬疫苗狂犬疫苗(yìmiáo)(yìmiáo)的种类的种类WHO推荐的狂犬疫苗(yìmiáo)(yìmiáo) HDCV HDCV人二倍体细胞培养疫苗人二倍体细胞培养疫苗 PCEC PCEC 鸡胚细胞培养疫苗鸡胚细胞培养疫苗 PDEV PDEV 纯化鸭胚疫苗纯化鸭胚疫苗 PVRV PVRV 纯化纯化Vero Vero 细胞疫苗细胞疫苗我国生产的狂犬疫苗 PHKCPHKC地鼠肾地鼠肾细胞培养疫苗细胞培养疫苗 PVRV PVRV 纯化纯化Vero Vero 细胞疫苗细胞疫苗第四十三页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗 各类人用狂犬病疫苗(yìmiáo)(yìmiáo) 疫苗种类疫苗种类 毒种毒种 纯化方法纯化方法 生产国家生产国家----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------原代地鼠肾细胞原代地鼠肾细胞 aG aG株株 柱纯析柱纯析 中国中国原代狗肾细胞原代狗肾细胞 AM AM 末精制末精制 荷兰荷兰原代鸡胚细胞原代鸡胚细胞 Fluly-LEP-C25 Fluly-LEP-C25 超速离心超速离心 德国德国原代鸡胚细胞原代鸡胚细胞 Fluly-HEP Fluly-HEP 超速离心超速离心 日本日本胚鸭细胞胚鸭细胞 PM PM株株 梯度密度离心梯度密度离心(líxīn)(líxīn) 瑞士瑞士人胚肺二倍体细胞人胚肺二倍体细胞 PM PM株株 超速离心超速离心 英国瑞士英国瑞士（（ WI-38 WI-38 ）） 德国法国美国德国法国美国 人胚肺二倍体细胞人胚肺二倍体细胞 SAD SAD 超速离心超速离心 加拿大加拿大 (MRC-5) (MRC-5)VeroVero细胞细胞 PM PM 梯度密度离心梯度密度离心 法国法国 aG aG株株 CTN-1 CTN-1株株 中国中国 ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------第四十四页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗佐剂疫苗佐剂疫苗(yìmiáo)(yìmiáo)和无佐剂疫苗和无佐剂疫苗(yìmiáo)(yìmiáo) 免疫效果的比较免疫效果的比较 采血时间 抗体(kàngtǐ)(kàngtǐ)GMT 抗体(kàngtǐ)(kàngtǐ)阳转率 IU/ml( IU/ml(血清血清) (%) ) (%) 天 佐剂 无佐剂 佐剂 无佐剂 7 0.1 0.4 8.1 45.2 7 0.1 0.4 8.1 45.2 14 1.2 2.3 59.5 100 14 1.2 2.3 59.5 100 45 16.5 17.5 100 100 45 16.5 17.5 100 100第四十五页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗我国生产我国生产(shēngchǎn)(shēngchǎn)狂犬疫苗的企业狂犬疫苗的企业北京生物制品研究所北京生物制品研究所 V V 沈阳安迪生物高科技公司沈阳安迪生物高科技公司 H H V V上上海海生生物物制制品品研研究究所所 V V 长长春春长长生生实实业业股股份份公公司司( (ɡǔɡǔ fèn fèn ɡ ɡōnōnɡ ɡ sī)sī) H H V V 长春生物制品研究所长春生物制品研究所 H H V V 辽宁生物工程公司辽宁生物工程公司 H H V V兰州生物制品研究所兰州生物制品研究所 H H V V 大连高新生物技术公司大连高新生物技术公司 H H武武 汉汉 生生 物物 制制 品品 研研 究究 所所 V V 吉吉 林林 亚亚 太太 H H宁波荣安生药业公司宁波荣安生药业公司 V V 河北省医药技术公司河北省医药技术公司 H H常州延申生物药业常州延申生物药业 V V 河南普新生物工程有限公司河南普新生物工程有限公司 H H海南生物制品研究所海南生物制品研究所 V V第四十六页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗生产生产(shēngchǎn)(shēngchǎn)用细胞用于疫苗生产用细胞用于疫苗生产(shēngchǎn)(shēngchǎn)的优缺的优缺点点 原代细胞：原代细胞：原代细胞：原代细胞： 地鼠、沙鼠肾细胞、鸡胚细胞地鼠、沙鼠肾细胞、鸡胚细胞地鼠、沙鼠肾细胞、鸡胚细胞地鼠、沙鼠肾细胞、鸡胚细胞 优点：优点：优点：优点：  来源容易，这些动物的繁殖快，尤其是地鼠是哺乳动来源容易，这些动物的繁殖快，尤其是地鼠是哺乳动来源容易，这些动物的繁殖快，尤其是地鼠是哺乳动来源容易，这些动物的繁殖快，尤其是地鼠是哺乳动 物中繁殖物中繁殖物中繁殖物中繁殖 最快的动物之一；最快的动物之一；最快的动物之一；最快的动物之一；4-54-54-54-5周出现性周期，怀孕期周出现性周期，怀孕期周出现性周期，怀孕期周出现性周期，怀孕期15-1815-1815-1815-18天，哺乳期天，哺乳期天，哺乳期天，哺乳期20202020 天，产后天，产后天，产后天，产后(chǎn hòu)(chǎn hòu)(chǎn hòu)(chǎn hòu)24-3624-3624-3624-36小时即可发情排卵，一年可产小时即可发情排卵，一年可产小时即可发情排卵，一年可产小时即可发情排卵，一年可产8-108-108-108-10胎。

胎  制备的细胞没有遗转物质的突变，比较安全，不必考虑疫苗中的制备的细胞没有遗转物质的突变，比较安全，不必考虑疫苗中的制备的细胞没有遗转物质的突变，比较安全，不必考虑疫苗中的制备的细胞没有遗转物质的突变，比较安全，不必考虑疫苗中的 残余残余残余残余DNADNA；；；；  病毒容易在这些细胞中适应病毒容易在这些细胞中适应病毒容易在这些细胞中适应病毒容易在这些细胞中适应 缺点：缺点：缺点：缺点：  需要建设相应的动物房，污染环境；需要建设相应的动物房，污染环境；需要建设相应的动物房，污染环境；需要建设相应的动物房，污染环境；  制备疫苗需要宰杀大量的动物制备疫苗需要宰杀大量的动物制备疫苗需要宰杀大量的动物制备疫苗需要宰杀大量的动物  动物容易污染细菌、病毒、寄生虫等外源物质。

动物容易污染细菌、病毒、寄生虫等外源物质动物容易污染细菌、病毒、寄生虫等外源物质动物容易污染细菌、病毒、寄生虫等外源物质  大量处死动物不符合大量处死动物不符合大量处死动物不符合大量处死动物不符合“ “动物论理学动物论理学动物论理学动物论理学” ”要求，要求，要求，要求，第四十七页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗生产生产(shēngchǎn)(shēngchǎn)用细胞用于疫苗生产用细胞用于疫苗生产(shēngchǎn)(shēngchǎn)的优的优缺点缺点 传代细胞系：传代细胞系：传代细胞系：传代细胞系： Vero Vero细胞、细胞、细胞、细胞、BHK-21BHK-21 优点：优点：优点：优点：  传代细胞系，几乎可以取之不竭传代细胞系，几乎可以取之不竭传代细胞系，几乎可以取之不竭传代细胞系，几乎可以取之不竭  已经全面检定，其特性符合人用疫苗的生产，细胞库一经已经全面检定，其特性符合人用疫苗的生产，细胞库一经已经全面检定，其特性符合人用疫苗的生产，细胞库一经已经全面检定，其特性符合人用疫苗的生产，细胞库一经 建立，细胞质量可高度控制建立，细胞质量可高度控制建立，细胞质量可高度控制建立，细胞质量可高度控制  该细胞生长条件要求不高，容易培养繁殖；该细胞生长条件要求不高，容易培养繁殖；该细胞生长条件要求不高，容易培养繁殖；该细胞生长条件要求不高，容易培养繁殖；  可用生物反应器大规模生产可用生物反应器大规模生产可用生物反应器大规模生产可用生物反应器大规模生产  大多数病毒能在该细胞系中复制繁殖大多数病毒能在该细胞系中复制繁殖大多数病毒能在该细胞系中复制繁殖大多数病毒能在该细胞系中复制繁殖  疫苗生产是不要动物疫苗生产是不要动物疫苗生产是不要动物疫苗生产是不要动物 缺点缺点缺点缺点(quēdi(quēdiǎ ǎn)n)：：：：  由于是传代细胞系，有一定的致肿瘤性；由于是传代细胞系，有一定的致肿瘤性；由于是传代细胞系，有一定的致肿瘤性；由于是传代细胞系，有一定的致肿瘤性；  疫苗必须纯化，且细胞疫苗必须纯化，且细胞疫苗必须纯化，且细胞疫苗必须纯化，且细胞DNADNA含量须达到标准（含量须达到标准（含量须达到标准（含量须达到标准（10ng/10ng/剂）剂）剂）剂）  目前不适合活疫苗的生产目前不适合活疫苗的生产目前不适合活疫苗的生产目前不适合活疫苗的生产第四十八页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗 狂犬狂犬(kuánɡ quǎn)(kuánɡ quǎn)疫苗的质量标准疫苗的质量标准物理检查物理检查 乳白色疏松乳白色疏松乳白色疏松乳白色疏松(shū sōnɡ)(shū sōnɡ)体体体体PHPH值值 7.2 – 8.07.2 – 8.0溶解时间溶解时间 ≤ 1 ≤ 1 ≤ 1 ≤ 1 分钟分钟分钟分钟硫柳汞含量硫柳汞含量 (mg/ml) (mg/ml) ≤ 0.10≤ 0.10≤ 0.10≤ 0.10蛋白含量（蛋白含量（ug/ug/剂）剂） ≤≤≤≤ 120 120残余水份含量残余水份含量 % (g/g ) % (g/g ) ≤ 3.0≤ 3.0≤ 3.0≤ 3.0残余牛血清蛋白残余牛血清蛋白(ng / (ng / 剂剂) ) ≤ 50≤ 50 灭活试验灭活试验 小鼠应健在小鼠应健在小鼠应健在小鼠应健在残余残余DNADNA含量含量 (ng/ (ng/剂剂) ) ≤ 10≤ 10≤ 10≤ 10 无菌试验无菌试验 应无细菌生长应无细菌生长应无细菌生长应无细菌生长异常毒性试验异常毒性试验 小鼠试验小鼠试验 小鼠应键在小鼠应键在小鼠应键在小鼠应键在, , 体重增加体重增加体重增加体重增加 豚鼠试验豚鼠试验 豚鼠应键在豚鼠应键在豚鼠应键在豚鼠应键在, , 体重增加体重增加体重增加体重增加效力试验效力试验 (IU/ (IU/剂剂) ) ≥ 2.5≥ 2.5≥ 2.5≥ 2.5热稳定试验热稳定试验 (IU/ (IU/剂剂) ) ≥ 2.5≥ 2.5≥ 2.5≥ 2.5 第四十九页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗狂犬疫苗狂犬疫苗(yìmiáo)(yìmiáo)中添加剂安全性问题中添加剂安全性问题 人白蛋白问题人白蛋白问题n n 人血白蛋白在疫苗中作为添加剂起到 保护(b(bǎ ǎohù)ohù)和稳定疫苗的作用n n 我国有1亿人为乙型肝炎病毒携带者n n 有为数众多的丙型肝炎患者n n 80-100万的HIV感染者n n 全球几乎无AIDS患者的国家 第五十页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗 狂犬狂犬(kuánɡ quǎn)(kuánɡ quǎn)疫苗中添加剂安全性疫苗中添加剂安全性问题问题 人白蛋白人白蛋白: 目前人白蛋白的生产工艺为“低温乙醇法”（Cohn 6Cohn 6法）法）经不同浓度的乙醇反复沉淀的 第五组分中所得，所用血源须严格反复筛查，最终产品还须经60℃ ℃ 10小时(xi(xiǎ ǎoshí)oshí)的巴氏法专项病毒灭活，经验证该产品有可靠的安全性，国内外至今尚无使用该产品而感染HIV、HBV、HCV等报道第五十一页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗 狂犬疫苗狂犬疫苗(yìmiáo)(yìmiáo)中添加剂安全性问中添加剂安全性问题题牛血清： 是细胞培养疫苗在细胞培养过程中必须的添加剂是细胞培养疫苗在细胞培养过程中必须的添加剂 纯化过程中已基本去除，质量标准50 n g/n g/剂剂 最担心疯牛病（疯牛病（传染性海绵状脑病、传染性海绵状脑病、 BSEBSE ））源于源于 英英国的国的BSEBSE愈演愈烈，已经蔓延到法国、德国、比利时等愈演愈烈，已经蔓延到法国、德国、比利时等3131个国家个国家(guójiā)(guójiā)最近日本、加拿大、韩国也相继报告了最近日本、加拿大、韩国也相继报告了BSEBSE WHO ：人及动物传染性海绵状脑病相关的医用或人及动物传染性海绵状脑病相关的医用或 其他制品的研讨会报告（其他制品的研讨会报告（1997. 31997. 3）） Report of a WHO Consultation on Medicinal and Other Products in Report of a WHO Consultation on Medicinal and Other Products in Relation to Human and Animal Transmissible Spongiform Relation to Human and Animal Transmissible Spongiform Encephalitis Encephalitis 第五十二页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗牛组织牛组织(zǔzhī)(zǔzhī)及体液的传染性分类及体液的传染性分类I I 类类类类 高度感染高度感染高度感染高度感染 脑脊髓（脑脊髓（脑脊髓（脑脊髓（ 眼）眼）眼）眼）IIII类类类类 中度感染中度感染中度感染中度感染 脾脏、扁逃体、淋巴结、回肠、近端大脾脏、扁逃体、淋巴结、回肠、近端大脾脏、扁逃体、淋巴结、回肠、近端大脾脏、扁逃体、淋巴结、回肠、近端大 肠、脑脊液、脑垂体、肾上腺、（硬脑肠、脑脊液、脑垂体、肾上腺、（硬脑肠、脑脊液、脑垂体、肾上腺、（硬脑肠、脑脊液、脑垂体、肾上腺、（硬脑 膜、松果体、胎盘）膜、松果体、胎盘）膜、松果体、胎盘）膜、松果体、胎盘）IIIIII类类类类 低感染性低感染性低感染性低感染性 周围神经、鼻黏膜、胸腺、骨髓、肝、周围神经、鼻黏膜、胸腺、骨髓、肝、周围神经、鼻黏膜、胸腺、骨髓、肝、周围神经、鼻黏膜、胸腺、骨髓、肝、 肺、胰腺肺、胰腺肺、胰腺肺、胰腺IVIV类类类类 无感染性无感染性无感染性无感染性 骨骼肌、心脏、乳腺、牛奶、血清、粪骨骼肌、心脏、乳腺、牛奶、血清、粪骨骼肌、心脏、乳腺、牛奶、血清、粪骨骼肌、心脏、乳腺、牛奶、血清、粪 便、肾脏、甲状腺、唾液腺、唾液、卵便、肾脏、甲状腺、唾液腺、唾液、卵便、肾脏、甲状腺、唾液腺、唾液、卵便、肾脏、甲状腺、唾液腺、唾液、卵 巢、子宫、睾丸巢、子宫、睾丸巢、子宫、睾丸巢、子宫、睾丸( (ɡ ɡ ɡ ɡāo wán)āo wán)、附睾、胎儿组织、（初、附睾、胎儿组织、（初、附睾、胎儿组织、（初、附睾、胎儿组织、（初 乳、胆汁、骨骼、软骨组织、结缔组织、乳、胆汁、骨骼、软骨组织、结缔组织、乳、胆汁、骨骼、软骨组织、结缔组织、乳、胆汁、骨骼、软骨组织、结缔组织、 毛发、皮肤、尿液）毛发、皮肤、尿液）毛发、皮肤、尿液）毛发、皮肤、尿液）第五十三页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗CJDCJD和和vCJDvCJD问题问题(wèntí)(wèntí)(wèntí)(wèntí)n n源于英国的源于英国的BSEBSE愈演愈烈，已经蔓延到法国、德国、比利时愈演愈烈，已经蔓延到法国、德国、比利时等等3131个国家BSEBSE又与人类又与人类vCJDvCJD有关到20022002年年6 6月，在英月，在英国已确认为国已确认为vCJDvCJD病人有病人有122122人，其中人，其中113113人已死亡对人已死亡对113113个个死亡病历因果分析，死亡病历因果分析，8989例确定是例确定是BSEBSE感染，其他感染，其他2424人可能与人可能与BSEBSE有关n n目前虽无证据表明经血、血液成分和血液制品转播目前虽无证据表明经血、血液成分和血液制品转播vCJDvCJD，但是由于，但是由于vCJDvCJD是新出现的疾病，现在就认为是新出现的疾病，现在就认为vCJDvCJD无传染性还为时过早无传染性还为时过早(wéi shí ɡuò zǎo)(wéi shí ɡuò zǎo)动物试验表明血动物试验表明血液中传染因子含量低，但有传染性而且实验证明牛液中传染因子含量低，但有传染性。

而且实验证明牛BSEBSE可以传染给羊因此有理论上的风险应特别关注可以传染给羊因此有理论上的风险应特别关注经人血传染经人血传染vCJDvCJD的可能性的可能性第五十四页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗狂犬疫苗狂犬疫苗(yìmiáo)(yìmiáo)安全性问题安全性问题（（（（ Vero Vero 细胞残余细胞残余细胞残余细胞残余DNADNA）））） 质量标准10n g/剂 100pg /剂 检测灵敏度 ： 1-10pg/ml 2ug (2x10 2ug (2x106 pg) SV40DNA pg) SV40DNA可使可使50%50%动物动物(dòngwù)(dòngwù)致瘤致瘤 为一个致瘤剂量为一个致瘤剂量 如100pg则为100/2 x106 6=0.5x10=0.5x10-4-4致瘤剂量致瘤剂量 如每个细胞基因组如每个细胞基因组DNADNA为为10pg, 而一个癌基因为10Kb(约10-5-5pg ),pg ),则致瘤基因为细胞基因组的则致瘤基因为细胞基因组的1/101/106 6，100pg100pg细胞细胞DNADNA中含中含100 X10100 X10-6-6pgpg致瘤基因致瘤基因, ,则致瘤剂量为则致瘤剂量为 10 10- -4 4/2x10/2x106 6=0.5x10=0.5x10-10-10个致瘤剂量。

个致瘤剂量 一个致瘤剂量的细胞一个致瘤剂量的细胞DNA10000ng .DNA10000ng .第五十五页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗Vero细胞细胞(xìbāo)(xìbāo)的致肿瘤性的致肿瘤性 Montagnon实验： 用裸鼠进行肿瘤实验，用裸鼠进行肿瘤实验，10106 或或10107 7细胞注射裸鼠，细胞注射裸鼠， 同时用同时用HelaHela细胞作对照细胞作对照 137-169 137-169代：代： 注射部位结节呈退行性变，全部注射部位结节呈退行性变，全部(quánbù)(quánbù) 动物无肿瘤发生动物无肿瘤发生 190-210 190-210代：代： 注射部位结节呈进行性变，全部注射部位结节呈进行性变，全部 动物出现肿瘤，且半数动物发生动物出现肿瘤，且半数动物发生 肺和淋巴节的肿瘤转移。

结论：结论：170170代以前的细胞是安全的代以前的细胞是安全的第五十六页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗Vero细胞残余细胞残余(cányú)(cányú)DNA的标准的标准 Vero 细胞残余细胞残余DNA 质质质质 量量量量 标标标标 准：准：准：准： 80 80年代年代年代年代(niándài)(niándài)：：：： 美国美国美国美国 FDA FDA →→ 10pg / 10pg /剂剂剂剂 欧盟、欧盟、欧盟、欧盟、WHO WHO →→ 100pg / 100pg /剂剂剂剂 我国卫生部我国卫生部我国卫生部我国卫生部→→ 100pg / 100pg /剂剂剂剂 90 90年代后期：年代后期：年代后期：年代后期： WHO WHO 推荐为推荐为推荐为推荐为→→ 10ng/ 10ng/剂剂剂剂 2005 2005年版《中国药典》年版《中国药典》年版《中国药典》年版《中国药典》 100 pg / 100 pg /剂剂剂剂 检测灵敏度：检测灵敏度：检测灵敏度：检测灵敏度： 1-10pg/ml 1-10pg/ml第五十七页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗狂犬疫苗安全性问题狂犬疫苗安全性问题（（（（ Vero Vero 细胞细胞细胞细胞(xìbāo)(xìbāo)残余残余残余残余DNADNA）））） Melissa Duxbury的实验： 人血浆的DNA平均浓度为250-1500ng/ml, 500ml250-1500ng/ml, 500ml的的全血含全血含60%60%的血浆，的血浆， DNA DNA浓度按浓度按1500ng/ml1500ng/ml计，一次输计，一次输入入500ml500ml的全血，侧会有的全血，侧会有450ug450ug的的DNADNA由静脉进入体内，由静脉进入体内，经多年观察未发现与经多年观察未发现与DNADNA相关的肿瘤发生相关的肿瘤发生 接受了后来被证实为白血病的供血者的血，受血者经接受了后来被证实为白血病的供血者的血，受血者经7 7年年观察未发现白血病和淋巴瘤患者观察未发现白血病和淋巴瘤患者(huànzhě)(huànzhě) 1ug的病毒致癌基因DNA可使动物发生肿瘤， 50u 的细胞致癌基因DNA不能使动物发生肿瘤第五十八页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗狂犬狂犬(kuánɡ quǎn)(kuánɡ quǎn)疫苗安全性问题疫苗安全性问题（（B-丙内脂）丙内脂） B-B-丙内脂：丙内脂：丙内脂：丙内脂： * 1981 * 1981年美国年美国年美国年美国 Alabama Alabama州州州州Auburn Auburn 大学的兽医学生暴大学的兽医学生暴大学的兽医学生暴大学的兽医学生暴 露前程序免疫接种露前程序免疫接种露前程序免疫接种露前程序免疫接种HDCVHDCV疫苗疫苗疫苗疫苗(yìmiáo)(yìmiáo)（用（用（用（用B-B-丙内脂灭活、）丙内脂灭活、）丙内脂灭活、）丙内脂灭活、） * 1983 * 1983年年年年131131个学生进行加强免疫，个学生进行加强免疫，个学生进行加强免疫，个学生进行加强免疫， 10 10天后其中天后其中天后其中天后其中2020人人人人 出现荨麻疹等较严重的副反应出现荨麻疹等较严重的副反应出现荨麻疹等较严重的副反应出现荨麻疹等较严重的副反应 * 13 * 13人查到了抗人白蛋白人查到了抗人白蛋白人查到了抗人白蛋白人查到了抗人白蛋白IgEIgE * BPL-HAS * BPL-HAS 变性的变性的变性的变性的 HSA HSA  产生抗人白蛋白产生抗人白蛋白产生抗人白蛋白产生抗人白蛋白IgE IgE  出现过敏反应。

出现过敏反应出现过敏反应出现过敏反应 第五十九页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗狂犬疫苗狂犬疫苗(yìmiáo)(yìmiáo)安全性问题安全性问题（（（（B-B-丙内脂）丙内脂）丙内脂）丙内脂） 原因： 生产工艺： 细胞培养扩增病毒时需加入人白蛋白细胞培养扩增病毒时需加入人白蛋白细胞培养扩增病毒时需加入人白蛋白细胞培养扩增病毒时需加入人白蛋白     灭活病毒灭活病毒灭活病毒灭活病毒 浓缩病毒液浓缩病毒液浓缩病毒液浓缩病毒液  纯化纯化纯化纯化  配制配制配制配制(pèizhì)(pèizhì)  分装分装分装分装     + +         B-B-丙内脂丙内脂丙内脂丙内脂 密度梯度区带离心法密度梯度区带离心法密度梯度区带离心法密度梯度区带离心法 添加剂添加剂添加剂添加剂     2 2万万万万 / PRM / PRM、危险、危险、危险、危险  冻干冻干  成品成品成品成品（有变性的（有变性的（有变性的（有变性的BPL-HAS)BPL-HAS)第六十页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗狂犬狂犬(kuánɡ quǎn)(kuánɡ quǎn)疫苗安全性问题疫苗安全性问题（（（（B-B-丙内脂）丙内脂）丙内脂）丙内脂） 改进措施和解决办法 生产工艺： 细胞培养扩增细胞培养扩增细胞培养扩增细胞培养扩增  加毒种培养加毒种培养加毒种培养加毒种培养  收获病毒液收获病毒液收获病毒液收获病毒液     加人白蛋白加人白蛋白加人白蛋白加人白蛋白  纯化纯化纯化纯化  灭活病毒灭活病毒灭活病毒灭活病毒  配制配制配制配制  分装分装              柱层析纯化柱层析纯化柱层析纯化柱层析纯化 B-B-丙内脂丙内脂丙内脂丙内脂 添加剂（人白蛋白）添加剂（人白蛋白）添加剂（人白蛋白）添加剂（人白蛋白）     具有浓缩、高度纯化功能、不危险具有浓缩、高度纯化功能、不危险具有浓缩、高度纯化功能、不危险具有浓缩、高度纯化功能、不危险 冻干冻干冻干冻干  成品成品成品成品(chéngp(chéngpǐ ǐn)n)（无变性的（无变性的（无变性的（无变性的BPL-HAS)BPL-HAS)第六十一页，共六十三页。

狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗 谢 谢！第六十二页，共六十三页狂犬病及疫苗狂犬病及疫苗内容(nèiróng)总结狂犬病及疫苗3、血清3型：Mokola病毒株，分离自尼日利亚田鼠5、血清2型：EBL1蝙蝠株，分离自乌克兰蝙蝠对热敏感，60℃经30min或100℃2min即可灭活也可由染毒唾液污染外环境（石头、树枝等）后，再污染普通(pǔtōng)创面而传染谢 谢第六十三页，共六十三页狂犬病及疫苗。