[医药卫生]非发酵菌.ppt

非发酵革兰阴性杆菌非发酵(Nonfermenters)革兰阴性杆菌n非发酵菌是一群需氧、无芽孢、氧化分解利用糖 类或是不利用糖做为能量来源的革兰阴性杆菌n通常所讲的非发酵菌指在KIA表面24小时内能够 生长，在底部不生长的需氧革兰阴性杆菌主要的非发酵革兰阴性杆菌属n假单胞菌属：n产碱杆菌属n黄杆菌属：n无色杆菌属n莫拉菌属：n不动杆菌属:n莫拉菌属n丛毛菌属葡萄糖氧化-发酵（O/F试验）初步分群鉴定试验n1、葡萄糖氧化-发酵（O/F试验）OF培养基:蛋白胨和糖类的比例为1:5而不同于发酵菌的 1:2n2、动力 半固体培养基:应只穿刺培养基顶部4mm，在培养4-6小时 后首次观察结果,24和48小时后再次观察结果更准确的 方法是湿片法和鞭毛染色n3、氧化酶阳性但并非所有氧化酶阳性的革兰阴性杆菌都是非发酵菌常见非发酵菌革兰阴性杆菌的初步分群鉴定试 验 假单胞 无色杆 黄杆 不动杆 产碱杆 丛毛 莫拉菌属 菌属 菌属 菌属 菌属 菌属 菌属n氧化酶 + + +/- - + + +/- n葡萄糖氧化-发酵（O/F试验） 0/- 0 0 0/- - - - n动力 +/- +/- +/- - + + -一、假单胞菌属(Pseudomonas)n直或微弯无芽孢革兰阴性杆菌，氧化酶 阳性，动力+（一个或多个极鞭毛），严 格需氧，氧化利用葡萄糖、触酶阳性、 MAC生长，水溶性色素。

铜绿 荧光 恶臭 斯氏 曼多辛 假产碱 产碱 氧化酶 99 97 100 100 100 100 96 麦康凯 100 100 100 100 100 100 96 42℃ 100 0 0 69 100 94 0 硝酸盐还原 98 19 0 100 100 100 94 青脓素 65 91 82 0 0 0 0 精氨酸 100 97 100 0 100 78 12 明胶液化 82 100 0 0 0 0 0 葡萄糖 97 100 100 96 100 9 0 木糖 90 100 100 93 75 18 0 乳糖 1 24 25 0 0 0 0 麦芽糖 1 2 31 100 0 0 0 甘露醇 70 53 25 89 0 0 0 鞭毛数 1 >1 >1 1 1 1 1铜绿假单胞菌（P.aeruginosa）n分布广泛，是非发酵菌中最具临床意义的细菌，也是 医院内感染最多见的细菌，主要引起条件感染。

n感染多发生于烧伤、急性白血病、器官移植病人及静 脉药瘾者，感染多位于潮湿部位，如气管造口、留置 的导管、创面、外耳道、角膜和渗出性皮肤伤口处n囊性纤维化病人呼吸道分离的铜绿假单胞菌具有生物 膜（其产生的大量藻酸盐包围了菌体所致），导致本 病的治疗困难和高死亡率n其淡蓝色脓性渗出物及闻到绿脓素的生姜样气味具有 特征性生物学特性 n直或微弯杆菌，有荚膜，单 端有1根鞭毛，运动活泼 n严格需氧，最适生长温度 35℃， 4℃不生长，42℃生 长n严格需氧，氧化利用葡萄糖 、 MAC生长n血平板上形成大而扁平，湿润，边缘不齐，有金属光泽，有生姜气味的灰绿色菌落，并形成透明溶血环n有时可产生水滴样样菌落，无色素不溶血（囊性纤维化病人）色素形成n在普通琼脂平板上产生特征性的蓝绿色水溶性绿脓 素和带荧光水溶性青脓素(荧光素)（荧光假单胞菌和恶臭假单胞菌也可产生）荧光素（青脓素）铜绿假单胞菌的分型n药敏分型n血清学分型：菌体O抗原n噬菌体分型n质粒指纹图谱分析n重复序列PCRn脉冲场凝胶电泳质粒指纹图谱分析铜绿假单胞菌的耐药性n细菌耐药机制¨外膜通透性降低¨产生灭活酶或钝化酶¨主动外排系统将抗生素泵出胞外¨抗菌药物作用靶位改变n各种抗生素治疗铜绿假单胞菌所致感染过程 中都可能发生耐药。

铜绿假单胞菌感染的控制n易感危重病人不应安排在已有过铜绿假单胞菌感 染的病房n各种抗菌药物、溶液、软膏、器械等应避免被铜 绿假单胞菌污染n采取适当的分型方法对感染菌株进行流行病学调 查和监控荧光假单胞菌(P.fluorescens)n产青脓素，但不能产绿脓素， 4℃生长, 42℃ 不生长, 最适温度25-30℃ n见于水和土壤中，都可作为咽部的正常菌群 存在，是人类少见的条件致病菌n荧光假单胞菌和污染的血制品关系密切，可 见于近期接受过血液制品而致菌血症的患者 嗜麦芽窄食单胞菌n窄食单胞菌属,假单胞菌科，嗜麦芽窄食单胞菌分布广泛，可引起条件感染是一种重要的 医院获得性病原体，本菌可分离于几乎所有 部位，最常见的是呼吸道.n引起本菌定植和感染的危险因素有：机械通 气、广谱抗生素的预防性应用、化疗、插管 和中性粒细胞减少等嗜麦芽窄食单胞菌n嗜麦芽窄食单胞菌为有动力杆菌，具有丛极鞭毛， 血平板上菌落粗糙呈淡黄色或浅绿色，有氨气味n根据 赖氨酸脱羧酶试验阳性和DNA酶阳性、氧化酶阴性可很容易与其他假单胞菌区别，本菌葡萄糖氧 化缓慢，可快速氧化分解麦芽糖不动杆菌属n广泛分布于自然和医院环境中，能在潮湿和干燥的表 面生存，也可存在于健康人的皮肤.n无动力、氧化酶阴性、硝酸盐还原阴性¨醋酸钙不动杆菌¨鲍曼不动杆菌鲍曼不动杆菌n在非发酵菌中本菌是在临床标本中的分离阳性率仅次于铜绿假单胞菌而居第二位的条件致病菌，通常不动杆菌对健康人体不致病，但对体弱者可引起感染。

n本菌能够获得多重耐药性和能够在大多数环境表面生存，所以由本菌引起的医院获得性感染有增加的趋势，医院获得性感染最常见的是呼吸道或手术部位、应用器械或ICU的住院患者产碱杆菌属n氧化酶阳性的革兰氏阴性杆菌，不分解糖类,周鞭毛，在含蛋白的肉汤中产氨有医学意义的产碱杆菌属主要有n木糖氧化产碱杆菌木糖氧化亚种A.xylosoxidans subsp. Xylosoxidansn木糖氧化产碱杆菌脱硝亚种A.xylosoxidans subsp.denitrificansn粪产碱杆菌A.faecalisn皮氏产碱杆菌A.piechaudiin粪产碱杆菌大部分感染是条件致病，主要来自潮湿环境，如雾化器、呼吸机和灌洗液等，血、痰、尿是常见发现部位氧化酶阴性，无动力 不动杆菌属氧化酶阴性，有动力 洋葱伯克菌(93%氧化酶弱阳性) 唐菖蒲伯克菌 浅黄华丽单胞菌 栖稻黄素单胞菌 少动鞘氨醇单胞菌(94%氧化酶阳性) 嗜麦芽窄食单胞菌氧化酶阳性，无动力 动物伤口伯杰菌 短稳杆菌 尿道寡源菌 威克菌属 莫拉菌属 华丽杆菌属氧化酶阳性，有动力 产碱杆菌 洋葱伯克菌 皮氏伯克菌 类鼻疽伯克菌 铜绿假单胞菌及其他大部分假单 胞菌非发酵菌实验室发现和鉴定非发酵菌的原则：1、除了铜绿假单胞菌、鼻疽伯克菌、假鼻疽伯克氏菌和脑膜脓毒华丽杆菌，非发酵菌的毒力一般较低，易于感 染非发酵菌的特定环境和疾病因素包括：n1）恶性肿瘤、导管插入术、气管开口术、淋巴穿刺，透析、灌洗和瓣膜置换等。

n2）长期皮质类固醇、抗生素和抗肿瘤治疗n3）患有代谢性或慢性感染性疾病n4）烧伤、开放性伤口及各种渗出性损伤2、大多数非发酵菌在不同环境中都有其自然定植部位，可成为人类感染的潜在传染源n1）医院环境中的各种水源这些液体经常与住院病人的粘膜和其他身体部位发生直接接触n2）各种仪器用具，如麻醉设备、镊子、体温计、纱布、拖把、毛巾等n3）身体的某些潮湿部位，如腹股沟、腋窝、肘窝及甲沟等在夏天易受感染 n4）各种家畜、宠物可致其主人感染n3、某些非发酵菌可引起特定的感染，败血症可由任何非发酵菌引起，而大部分非发酵菌可致肺炎或支气管炎、化脓性关节炎、尿道炎、手术和外伤后伤口感染、结膜炎等n4、临床分离的革兰阴性杆菌，如血平板上菌落小，KIA或TSA培养基生长，氧化酶阳性可怀疑为非发酵菌 5、很多非发酵菌对抗生素具有某种方式的多重耐药性，了解这些耐药方式有助于提供此菌株属于某种非发酵菌的最初线索常见菌种的鉴定（一）排除法n临床标本中最常见的非发酵菌是铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌大部分菌株只需通过观察和少数生化实验便可很容易鉴定，这种快速鉴定不仅可快速为临床医生提供信息，而且省时、省力、经济。

1.铜绿假单胞菌n95%以上的铜绿假单胞菌可通过观察以下几个特 征而得到鉴定：n氧化酶阳性（10秒内）n菌落较大，生姜样气味n绿脓素产生n少数铜绿假单胞菌可产生其他颜色色素，如红脓 素（红色），黑脓素（棕色到黑色），青脓素（ 黄色）铜绿假单胞菌鉴定无色素/只产生荧光素的铜绿假单胞菌：n42℃能够生长n乙酰胺的碱化作用n硝酸盐、亚硝酸盐的脱氮作用n极性单鞭毛，有动力 大多数铜绿假单胞菌可通过观察典型的大菌落， 在首次分离的培养基上呈蓝绿色而很容易得到鉴 定，进一步检查生姜样气味、产荧光素和氧化酶 试验，其他附加试验一般不需要2、鲍曼不动杆菌n鲍曼不动杆菌是临床实验室第二位最常见 的非发酵菌，下列特征可对其做预先鉴定 ： 1）麦康凯平板上生长良好（菌落可呈轻微 粉红色） 2）氧化酶阴性 3）氧化分解葡萄糖，产酸 4）氧化分解乳糖，产酸 5）无动力 6）对青霉素耐药性鲍曼不动杆菌n最初的线索是对临床标本直接革兰染色，观察到 微小（1.0×0.7）双球菌n取自琼脂或肉汤培养基的菌株革兰染色，则菌体 较大，更似杆菌n在血平板上鲍曼不动杆菌不产生色素n菌落在麦康凯平板上则呈微弱的粉红色，在伊红 美蓝琼脂上呈蓝色。

n耐青霉素，可与对青霉素高度敏感的莫拉菌（革 兰染色通常也为球杆状）相区别其他非发酵菌的鉴定方法（二）分组法n如果一株非发酵革兰阴性杆菌不是铜绿假 单胞菌、鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞 菌，必须增加其他的试验来进行种的鉴定n根据动力和氧化酶将各种临。