
高考生物实验记忆知识点总结.doc
15页实验二:实验二:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1 1、实验材料:、实验材料: 1、做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨因 为组织的颜色较浅,易于观察经试验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、 白色甘蓝叶、白萝卜2、做脂肪的鉴定实验应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡 3~4 小时(也可用蓖麻种子)3、做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清4、淀粉的鉴定:马铃薯匀浆 四、实验用具:四、实验用具:双面刀片、试管(最好用刻度试管)、试管夹、试管架、大小烧杯、小 量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸、显微镜 五、实验试剂:五、实验试剂: 1.斐林试剂斐林试剂(包括甲液:质量浓度为 0.1g/ mL NaOH 溶液和乙液:质量浓度为 0.05g/ mL CuSO4溶液) 2.苏丹苏丹ⅢⅢ或苏丹或苏丹ⅣⅣ染液染液 3.双缩脲试剂双缩脲试剂(包括 A 液:质量浓度为 0.1g/ mL NaOH 溶液和 B 液:质量浓度为 0.01g/ mL CuSO4溶液) 4.体积分数为体积分数为 50%50%的酒精溶液的酒精溶液 5.碘液碘液 6.蒸馏水蒸馏水 六、方法步骤:六、方法步骤: 一、可溶性糖的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释1. 制备组织样液。
(去皮、切块、研磨、过滤)苹果或梨组织液必须临时制备 因苹果多酚氧化酶含量高,因苹果多酚氧化酶含量高, 组织液很易被氧化成褐色,组织液很易被氧化成褐色, 将产生的颜色掩盖将产生的颜色掩盖2. 取 1 支试管,向试管内 注入 2mL 组织样液3. 向试管内注入 1mL 新制 的斐林试剂,振荡应将组成斐林试剂的甲液、乙 液分别分别配制、储存,使用前使用前才 将甲、乙液等量混匀成斐林试 剂;切勿切勿将甲液、乙液分别加入苹 果组织样液中进行检测斐林试剂很不稳定,甲、斐林试剂很不稳定,甲、 乙液混合保存时,生成的乙液混合保存时,生成的 CuCu ( ( OHOH ) ) 2 2在在 70~70~ 90900 0C C 下分解成黑色下分解成黑色 CuOCuO 和水;和水; 甲、乙液分别加入时可能甲、乙液分别加入时可能 会与组织样液发生反应,会与组织样液发生反应, 无无 CuCu OHOH 生成4. 试管放在盛有 50-650C 温 水的大烧杯中,加热约 2 分 钟,观察到溶液颜色:浅蓝浅蓝 色色 →→ 棕色棕色 →→ 砖红色砖红色(沉(沉 淀)淀)最好用试管夹夹住试管上部, 使试管底部不触及烧杯底部, 试管口不朝向实验者。
也可用酒精灯对试管直接加热防止试管内的溶液冲出试防止试管内的溶液冲出试 管,造成烫伤;管,造成烫伤;缩短实验时间缩短实验时间 二、脂肪的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释花生种子浸泡、去皮、切下一些 子叶薄片,将薄片放在载玻片的 水滴中,用吸水纸吸去装片中的 水干种子要浸泡 3~4 小 时,新花生的浸泡时 间可缩短因为浸泡时间短,不易切片;因为浸泡时间短,不易切片; 浸泡时间过长,组织较软,切浸泡时间过长,组织较软,切 片不易成形切片要尽可能薄片不易成形切片要尽可能薄 些,便于观察些,便于观察在子叶薄片上滴 2~3 滴苏丹苏丹ⅢⅢ或或 苏丹苏丹ⅣⅣ染液染液,染色 1 分钟染色时间不宜过长用吸水纸吸去薄片周围染液,用 50%酒精洗去浮色,吸去酒精酒精用于洗去浮色,不洗去浮酒精用于洗去浮色,不洗去浮 色,会影响对橘黄色脂肪滴的色,会影响对橘黄色脂肪滴的 观察同时,酒精是脂溶性溶观察同时,酒精是脂溶性溶 剂,可将花生细胞中的脂肪颗剂,可将花生细胞中的脂肪颗 粒溶解成油滴粒溶解成油滴用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴 上 1~2 滴蒸馏水,盖上盖玻片滴上清水可防止盖盖玻片时产滴上清水可防止盖盖玻片时产 生气泡。
生气泡低倍镜下找到花生子叶薄片的最 薄处,可看到细胞中有染成橘黄橘黄 色色或或红色红色圆形小颗粒圆形小颗粒装片不宜久放时间一长,油滴会溶解在乙醇时间一长,油滴会溶解在乙醇 中三、蛋白质的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释制备组织样液 (浸泡、去皮研磨、过滤 )黄豆浸泡黄豆浸泡 1 1 至至 2 2 天,容易研天,容易研 磨成浆,也可购新鲜豆浆以磨成浆,也可购新鲜豆浆以 节约实验时间节约实验时间加样液约 2ml 于试管 中,加入双缩脲试剂 A,摇 匀;再加入双缩脲试剂 B 液 3~4 滴,摇匀,溶液变紫色A 液和 B 液也要分开配制, 储存鉴定时先加先加 A A 液后加液后加 B B 液液CuSOCuSO4 4溶液不能多加溶液不能多加先加先加 NaOHNaOH 溶液,为溶液,为 CuCu2+2+与蛋与蛋 白质反应提供一个碱性的环白质反应提供一个碱性的环 境A A、、B B 液混装或同时加入,液混装或同时加入, 会导致会导致 CuCu2+2+变成变成 CuCu ( ( OHOH ) ) 2 2沉淀,而失效沉淀,而失效 否则否则 CuSOCuSO4 4的蓝色会遮盖反的蓝色会遮盖反 应的真实颜色。
应的真实颜色可用蛋清代替豆浆蛋清要先稀释如果稀释不够,在实验中蛋如果稀释不够,在实验中蛋 清粘在试管壁,与双缩脲试清粘在试管壁,与双缩脲试 剂反应后会粘固在试管内壁剂反应后会粘固在试管内壁 上,使反应不容易彻底,并上,使反应不容易彻底,并 且试管也不易洗干净且试管也不易洗干净附:淀粉的检测和观察 用试管取 2ml 待测组织样液, 向试管内滴加 2 滴碘液,观 察颜色变化碘液不要滴太多以免影响颜色观察以免影响颜色观察七、考点提示:七、考点提示: 1、常见还原性糖与非还原性糖有哪些? 答:答:葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;淀粉、 蔗糖、纤维素都是非还原性糖 2、还原性糖植物组织取材条件? 答:答:含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如:苹果、 梨、白色甘蓝叶、白萝卜等 3、研磨中为何要加石英砂?不加石英砂对实验有何影响? 答:答:加石英砂是为了使研磨更 充分不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少,使鉴定时溶液颜色变化不明显 4、斐林试剂甲、乙两液的使用方法?混合的目的?为何要现混现用? 答:答:混合后使用; 产生氢氧化铜;氢氧化铜不稳定 5、还原性糖中加入斐林试剂后,溶液颜色变化的顺序为? 答:答:浅蓝色 棕色 砖红色。
6、花生种子切片为何要薄? 答:答:只有很薄的切片,才能透光,而用于显微镜的观察 7、转动细准焦螺旋时,若花生切片的细胞总有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是 什么? 答:答:切片的厚薄不均匀 8、脂肪鉴定中乙醇作用? 答:答:洗去浮色 9、双缩脲试剂 A、B 两液是否混合后用?先加 A 液的目的怎样通过对比看颜色变化? 答:答: 不能混合;先加 A 液的目的是使溶液呈碱性;先留出一些大豆组织样液做对比实验三:观察实验三:观察 DNADNA 和和 RNARNA 在细胞中的分布在细胞中的分布一、实验原理:一、实验原理: 1、真核细胞的 DNA 主要分布在细胞核内,RNA 主要分布在细胞质中 2、甲基绿和吡罗红两种染色剂对 DNA 和 RNA 的亲和力不同,甲基绿对 DNA 亲和力强,使 DNA 显现出绿色,而吡罗红对 RNA 的亲和力强,使 RNA 呈现出红色用甲基绿、吡罗红的 混合染色剂将细胞染色,可同时显示 DNA 和 RNA 在细胞中的分布 3、盐酸的作用 ① 盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输; ② 盐酸使染色体中的 DNA 与蛋白质分离,便于 DNA 与染色剂的结合 二、实验材料:二、实验材料:人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞 三、实验用具:三、实验用具:大小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、 石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、显微镜 四、方法步骤:四、方法步骤: 1、取材 ① 滴:在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液; ② 刮:用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下; ③ 涂:将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中; ④ 烘:将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。
2、水解 ① 解:将烘干的载玻片放入装有 30ml 质量分数为 8%的盐酸的小烧杯中,进行材料的水解;② 保:将小烧杯放入装有 30℃温水的大烧杯中保温 5 分钟 3、冲洗涂片 ① 冲:用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片 10 秒钟; ② 吸:用吸水纸吸去载玻片上的水分 4、染色 ① 染:用 2 滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上,染色 5 分钟; ② 吸:吸去多余染色剂; ③ 盖:盖上盖玻片 5、观察 ① 低:在低倍物镜下,寻找染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰;② 高:转到高倍物镜,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况 五、考点提示:五、考点提示: 1、取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以避免装片中出现太多的杂质; 2、取洋葱表皮细胞时,尽量避免材料上带有叶肉组织细胞; 3、冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗; 4、用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动,使 载玻片均匀受热,以免破裂; 5、烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自然冷却 1 分钟实验四:体验制备细胞膜的方法实验四:体验制备细胞膜的方法一、实验原理:一、实验原理:细胞膜的流动性和半透性 二、实验材料:二、实验材料:猪(或牛、羊、人)的新鲜的红细胞稀释液(血液加适量的生理盐水) 三、实验用具:三、实验用具:蒸馏水、试管、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜 四、方法步骤:四、方法步骤: 1、用试管吸取少量红细胞稀释液,滴一小滴在载玻片上,盖上盖玻片,制成临时装片 2、在高倍镜下观察,待观察清晰时,在盖玻片的一侧滴一滴蒸馏水,同时在另一侧用吸水 纸小心吸引,注意不要把细胞吸跑。
上述操作均在载物台上进行,并持续观察细胞的变化 可以看到近水的部分红细胞发生变化;凹陷消失,细胞体积增大,很快细胞破裂,内容物 流出 五、考点提示:五、考点提示: 1、选择动物细胞进行实验的原因:动物细胞无细胞壁 2、选择哺乳动物成熟红细胞进行实验的原因:人和其他哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众 多的细胞器(膜),可以得到较纯净的细胞膜 3、细胞破裂后,用什么方法获得较纯的细胞膜:将涨破的细胞溶液,经过离心分离得到细 胞膜 4、如何获得植物细胞膜:先用纤维素酶和果胶酶将植物细胞壁水解得到原生质体;再将原 生质体放入清水中,水自由扩散进入,原生质体涨破;最后经过离心分离得到植物细胞膜5、稀释及稀释的时候用生理盐水的原因:稀释后,可以减少血液中的血浆蛋白等杂物用 生理盐水是为了保持渗透压,防止在稀释的时候就发生细胞破裂实验五:用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体实验五:用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体一、实验原理:一、实验原理: 1、叶肉细胞中的叶绿体,呈绿色、扁平的椭球形或球形,散布于细胞质中,可以在高倍显 微镜下观察它的形态 2、线粒体普遍存在于动物细胞和植物细胞中,健那绿染液能使活细胞中的线粒体呈现蓝绿 色。
通过染色,可以在高倍显微镜下观察到处于生活状态的线粒体的形态有短棒状、圆球 状、线形、哑铃形等 二、实验材料:二、实验材料:新鲜的藓类的叶、人的口腔上皮细胞、新配制的质量分数为 1%的健那 绿染液(将 0.5g 健那绿溶解于 50mL 生理盐水中,加温到 30-40 摄氏度,使其充分溶 解) 三、实验用具:三、实验用具:显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、消毒牙签四、方法步骤:四、方法步骤: 1、观察叶绿体 低倍镜下找到叶片细胞→低倍镜下找到叶片细胞→高倍镜下观察 2、观察线粒体染色→制片→低倍镜下找到口腔上皮细胞→高倍镜下观察 五、考点提示:五、考点提。












