体外诊断试剂生产质量控制要点课件.ppt

体外体外诊断断试剂生生产质量控制要点量控制要点体外诊断试剂产品介绍一酶联免疫诊断试剂产品乙型肝炎病毒外表抗原诊断试剂盒〔酶联免疫法〕二快速诊断试剂产品人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂盒〔胶体金法〕三PCR核酸诊断试剂产品乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒〔PCR-荧光探针法〕四临床化学诊断试剂产品葡萄糖试剂盒〔液体单试剂〕〔氧化酶法〕【产品名称】【产品名称】 乙型肝炎病毒外表抗原诊断试剂盒〔酶联免疫法〕乙型肝炎病毒外表抗原诊断试剂盒〔酶联免疫法〕【包装规格】【包装规格】 96人份人份/盒盒【预期用途】【预期用途】 本试剂盒采用酶联免疫法原理检测本试剂盒采用酶联免疫法原理检测HBsAg，适用于血清或，适用于血清或血浆类标本血浆类标本酶联免疫法反响原理l双抗体夹心法l双抗原夹心法标本抗-HBs抗-HBs-HRPHBsAg乙型肝炎病毒外表抗原诊断试剂盒〔酶乙型肝炎病毒外表抗原诊断试剂盒〔酶联免疫法〕的原理联免疫法〕的原理采用抗-HBs包被反响板，参加待测样本，经孵育后，参加抗-HBs-HRP，当样本中存在HBsAg时，该HBsAg与包被抗-HBs结合并与抗-HBs-HRP结合形成抗-HBs-HBsAg-抗-HBs-HRP复合物，参加TMB底物产生显色反响，反之那么无显色反响。

试剂盒组份试剂盒组份 1. 微孔反微孔反应板板 2. 酶酶结合物合物 3. 阳性阳性对照照 4. 阴性阴性对照照 5. 洗洗涤液液 6. 显色色剂A 7. 显色色剂B 8. 终止液止液 9. 封片封片 10. 说明明书主要生产设备微孔反应板包被机微孔反应板包被机微孔反应板全自动封闭生产线微孔反应板全自动封闭生产线灌封流水线灌封流水线超声波洗瓶机超声波洗瓶机全自动进口分装机全自动进口分装机生物安全柜生物安全柜酶标仪酶标仪横枕式包装机横枕式包装机生产工艺流程图生产工艺流程图合并分装纯化包被结酶纯化配制配制配制抗-HBs血清酶标用抗-HBs抗-HBs-HRP酶结合物反响板包板用单抗-HBs单抗-HBs腹水正常人血清、阳性血阴、阳性对照显色剂、终止液、洗涤液TMB、硫酸、吐温20成品半成品滴配半成品检定成品检定外购原辅料控制外购原辅料控制l原辅料必须从合格供给商目录所载厂家购入。

l采购的生产用原辅料，均应符合药品的标准、包装材料标准、生物制品规程或其它标准，不得对产品的质量产生不良影响 自制主要原料生产和质量控制要点自制主要原料生产和质量控制要点l 工艺用水l 抗原l 抗体l 酶标记物基因工程基因工程HBsAg生产和质量控制要点生产和质量控制要点生产工序质量控制要点细胞培养基因工程细胞株，经接种复苏后，进行细胞传代培养无菌操作，培养基的配制，细胞培养温度，细胞的形态及传代速度纯化收集的细胞培养上清液经抗-HBs 亲和层析柱等纯化层析柱填料的使用次数， 所用缓冲液的pH值， 上样、平衡、洗脱速度基因工程基因工程HBsAg质量标准质量标准l效价：效价： ELISAl纯度：采用纯度：采用SDS-PAGEl功能性实验功能性实验 ：阴性对照、阳性对照、阴性参考：阴性对照、阳性对照、阴性参考品符合率、最低检出量、精细性、稳定性品符合率、最低检出量、精细性、稳定性l蛋白浓度：用双缩脲法测定蛋白浓度：用双缩脲法测定单抗单抗-HBs生产和质量控制要点生产和质量控制要点生产工序质量控制要点细胞复苏及传代培养单克隆抗体细胞株，经接种复苏后，进行细胞传代培养。

无菌操作，培养基的配制，细胞培养温度腹水制备福氏不完全佐剂免疫，7-10天后单克隆抗体细胞悬液注射于F1代小鼠 ，10天后采集小鼠腹水，离心，制得单抗-HBs腹水对数生长期细胞接种腹水纯化用制备的单抗-HBs腹水，经饱和硫酸铵二步沉淀，经离子交换层析柱纯化即为单抗-HBs层析填料的使用次数， 所用缓冲液的pH值， 上样、平衡、洗脱速度纯化的得率单抗单抗-HBs质量标准质量标准l纯度纯度 ：采用：采用SDS-PAGE法法l蛋白含量蛋白含量 ：采用：采用Lowry法法l效价效价 ：：ELISA效价效价l功能性检测：免疫活性、稳定性功能性检测：免疫活性、稳定性多抗多抗-HBs生产和质量控制要点生产和质量控制要点生产工序质量控制要点抗血清制备用福氏佐剂和纯化HBsAg抗原 制成乳化胶乳剂注射实验动物 ，经多次免疫后，采集动物血清动物的选择，乳剂配制的均一性纯化 抗血清，经亲和层析柱粗提后，正常人全血清等多种亲和层析柱等纯化制得亲和柱的制备及使用次数，所用缓冲液的pH等的控制， 纯化的收率多抗多抗-HBs的质量标准的质量标准l纯度纯度 ：：SDS-PAGE法检定法检定l蛋白含量蛋白含量 ：：Lowry法法l效价效价 ：对流电泳法测定效价：对流电泳法测定效价l功能性检测：免疫活性、稳定性功能性检测：免疫活性、稳定性多抗多抗-HBs-HRP生产和质量控制要点生产和质量控制要点生产工序质量控制要点酶的活化 HRP与 NaIO4反应，再加入乙二醇制成活化的酶溶液。

辣根过氧化物酶RZ值≥3.0 及活化时间的控制酶的偶联 酶溶液液加入抗-HBs抗体pH,温度及时间的控制还原酶反应液加入NaBH4溶液还原还原时间的控制纯化 饱和硫酸铵纯化纯度控制辣根过氧化物酶质量标准辣根过氧化物酶质量标准l溶解性 ：应符合要求lPH值 ：应符合要求l活性测定 ：应符合要求l 多抗-HBs-HRP质量标准l免疫活性l稳定性试验生生产工序工序生生产要点要点质量控制点量控制点反反应板制板制备1包被液的配制包被液的配制pH值的控制的控制2*反反应板的包被板的包被包被液量的准确性，反包被液量的准确性，反应板包被放置板包被放置的温度、湿度及的温度、湿度及时间的控制的控制3反应板的洗涤、反应板的洗涤、加封闭液加封闭液液量的准确性液量的准确性4*反反应板的封板的封闭房房间温度的控制，封温度的控制，封闭时间的控制的控制5反反应板的抽干板的抽干抽干机的真空度、温度抽干机的真空度、温度6*铝箔袋的箔袋的热封封房房间的湿度控制，的湿度控制，铝箔袋的密封性箔袋的密封性7*反反应板的抽板的抽检应符合相关符合相关质量要求量要求反响板制备生产和质量控制要点反响板制反响板制备包被液配制包被液配制l质量控制点：包被缓冲液pH l测定方法：用pH计测定反响板制反响板制备反响板的包被反响板的包被质量控制点：包被液量的准确性量控制点：包被液量的准确性 要求：要求：100μl/孔孔 操作：操作： 将待包被的微孔反响板放置将待包被的微孔反响板放置传送送带上，上，开开场包被，每包被，每块包被板包被板应用目用目测法法检查其其96孔加液是否完整。

前孔加液是否完整前10块包被板包被板检查加液量加液量是否准确，是否准确，检后的包被板放入后的包被板放入报废专用用盘内，内，作作报废处理 连续100块包被板包被板检查合格后，合格后，进入正常入正常包被包被过程正常包被程正常包被过程中每程中每100块包被板包被板应抽抽1块作作过程程检查反响板制反响板制备反响板的包被反响板的包被质量控制点：量控制点： 反响板包被放置的温度及反响板包被放置的温度及时间的控制的控制 要求：要求： 2-8℃冷冷库包被包被过夜 操作：包被板操作：包被板应堆放整堆放整齐，并用一次性塑料布覆，并用一次性塑料布覆盖注明产品名称、批号和品名称、批号和时间，放入，放入2-8℃冷冷库包被包被过夜反响板制反响板制备反响板的洗涤、加封闭液反响板的洗涤、加封闭液质量控制点：液量的准确性质量控制点：液量的准确性 要求要求: 洗板液量：洗板液量：200μl/孔孔 封闭液量：封闭液量：250μl/孔孔 反响板制反响板制备反响板的封闭反响板的封闭质量控制点：质量控制点： 封闭温度：封闭温度：37±0.5℃℃ 封闭时间：封闭时间：2小时小时 操作：将加好封闭液的包被板整齐堆放在托盘操作：将加好封闭液的包被板整齐堆放在托盘内，注明批号、封闭开场时间和完毕时间，内，注明批号、封闭开场时间和完毕时间，放入恒温房。

到达规定时间后，迅速取出包放入恒温房到达规定时间后，迅速取出包被板，转入下一道工序的生产被板，转入下一道工序的生产 反响板制反响板制备反响板的抽干反响板的抽干质量控制点：抽干机的真空度、温度量控制点：抽干机的真空度、温度 要求：要求： 真空度：低于真空度：低于100Pa，，维持持4小小时以上以上 温度：温度：20±2℃ 反响板制反响板制备铝箔袋的箔袋的热封封质量控制点：量控制点： 房房间的湿度：＜的湿度：＜40% 铝箔袋的密封性：箔袋的密封性： 端面刀封温度端面刀封温度210±5℃ 中封刀封温度中封刀封温度210±5℃ 操作：操作： 房房间湿度控制：生湿度控制：生产操作前提前操作前提前2小小时，翻开，翻开去湿机去湿机进展工作展工作场地去湿，使地去湿，使车间湿度到达湿度到达40%以下 铝箔袋的密封性：在箔袋的密封性：袋袋袋袋检。

反响板制反响板制备 反响板的抽反响板的抽检质量量标准：准：阴性参考品符合率：用国家参考品或国家参考品阴性参考品符合率：用国家参考品或国家参考品标化的参考化的参考品品进展展检定，不得出定，不得出现假阳性阳性参考品符合率：用国家参考品或国家参考品阳性参考品符合率：用国家参考品或国家参考品标化的参考化的参考品品进展展检定，不得出定，不得出现假阴性 最低最低检出量：用国家参考品或国家参考品出量：用国家参考品或国家参考品标化的参考品化的参考品进展展检定，定， HBsAg adr、、adw及及ay亚型的最低型的最低检出量出量应符合要符合要求 精精细性：用国家参考品或国家参考品性：用国家参考品或国家参考品标化的参考品化的参考品进展展检定，定，CV〔〔%〕〕应不高于不高于15%〔〔n=10〕生生产工序工序生生产要点要点质量控制点量控制点阴、阳性阴、阳性对照的配照的配制制1阴性血清的阴性血清的灭活活灭活的活的时间，温度，温度2*阴性阴性对照的配制照的配制检测阴性阴性OD值3阳性血清的阳性血清的灭活活灭活的活的时间，温度，温度4*阳性阳性对照的配制照的配制检测阳性阳性OD值阴、阳性阴、阳性对照制照制备的生的生产和和质量控制要点量控制要点阴、阳性血清的阴、阳性血清的灭活活l要求：要求：l 灭活活时间：：1小小时l 温度：温度：60℃l操作：将血清置水浴箱内。

随操作：将血清置水浴箱内随时注意注意测量血清量血清温度，当血清温度到达温度，当血清温度到达60℃时，开，开场计时至至规定定时间止 阴、阳性阴、阳性对照的配制控制照的配制控制阴性阴性对照的配制照的配制l质控点：阴性对照OD值l要求：OD值≤0.050 阳性阳性对照的配制照的配制l质控点：阳性对照OD值l 通用试剂制备的生产和质量控制要点通用试剂制备的生产和质量控制要点生生产工序工序生生产关关键点点质量控制点量控制点显色色剂、、终止液、止液、洗洗涤液等通用液等通用试剂的制的制备1显色色剂B的配的配制制避光配制、分装避光配制、分装溶液配制的溶液配制的pH、、电导的控制的控制配制后配制后12小小时内内进行分装行分装2显色色剂A的配的配制制72小小时内内进行分装行分装溶液配制的溶液配制的pH、、电导的控制的控制3终止液的配制止液的配制比重控制比重控制 4洗洗涤液的配制液的配制pH、、电导的控制的控制显色色剂B的配制的配制l质量控制点：量控制点：l 1 溶液配制的准确性溶液配制的准确性l 用用pH计测定溶液定溶液pH值应符合要求符合要求l 用用电导率率仪测定溶液定溶液电导率率应符合要求符合要求l 2 配制、分装配制、分装环境：避光境：避光l 3 配制后溶液分装的即配制后溶液分装的即时性：性：12小小时内内进展分展分装装显色色剂A的配制的配制l质量控制点：量控制点：l 1溶液配制的准确性溶液配制的准确性l 用用pH计测定溶液定溶液pH值l 用用电导率率仪测定溶液定溶液电导率率l 2配制后溶液存放：配制后溶液存放：72小小时内内进展分展分装装终止液的配制止液的配制l质量控制点：量控制点： 溶液配制的准确性：溶液配制的准确性： 用婆美用婆美计测定溶液的比重定溶液的比重应符合要求符合要求 洗涤洗涤液的配制液的配制l质量控制点：量控制点： 溶液配制的准确性溶液配制的准确性 用用pH计测定溶液定溶液pH值 用用电导率率仪测定溶液定溶液电导率率 酶酶结合物制合物制备生产和质量控制要点生产和质量控制要点生生产工序工序生生产关关键点点质量控制点量控制点酶酶结合物的制合物的制备、滴配、滴配1酶酶稀稀释液的配液的配制制pH的控制的控制2*酶酶结合物的滴合物的滴配配通通过比比较阳性参考品、阳性参考品、阴性参考品、精密性以阴性参考品、精密性以及最低及最低检出率情况，用出率情况，用方方阵滴定法滴定法进行行EIA法法测定确定定确定酶酶结合物的合物的浓度度半成品检定质量标准半成品检定质量标准l物理检查 l试剂空白l阴性对照l阳性对照 l阴性参考品符合率l阳性参考品符合率l最低检出量l精细性l稳定性实验 :试剂的分装、的分装、贴签生生产和和质量控制要点量控制要点除菌过滤除菌过滤l质量控制点：过滤膜的起泡点实验l要求：滤器灭菌121℃30分钟；μm滤芯泡点≥3.5bar  分装分装l质量控制点：液量的准确性、试剂瓶的密封性 要求： 分装液量应大于等于标示量 ； 分装好的试剂瓶应无漏液现象。

 贴签l质量控制点：批号打印的准确性l 要求：批号等打印正确、清晰l操作：l 贴瓶开场后，前30瓶应仔细检查瓶贴质量，包括瓶贴位置，批号等打印是否正确、清晰，粘贴是否结实、平整等 l 合格后，每50瓶抽1瓶进展检查 合并包装合并包装生生产和和质量控制要点量控制要点生生产工序工序生生产要点要点质量控制点量控制点合并包装合并包装1包装盒的包装盒的压印印生生产日期、批号打印的准确日期、批号打印的准确性、清晰度性、清晰度2合并合并合并合并组分的分的齐全性全性印刷印刷类包装品的物料平衡包装品的物料平衡成品成品检定定质量量标准准l物理检查 l试剂空白l阴性对照l阳性对照l阴性参考品符合率l阳性参考品符合率l最低检出量l精细性l稳定性实验 成品入成品入库库入库入库l控制点：产品放行报告；入库数l要求： 凭由质量管理部经理签署的成品出厂合格报告，成品检定书办理入库手续，入库数应与成品出厂合格报告中所报数量一致P2生物平安实验室管理生物平安实验室管理l人员卫生l 进入P2实验室必须加穿干净防护服，带一次性乳胶手套和一次性口罩只允许工作人员进入，制止非工作人员进入实验室。

l生物平安柜l 实验室的操作严格按操作规程进展操作，对存在感染性或潜在感染性的操作须在生物平安柜内进展做好相应的消毒、使用记录l消毒及灭菌l 所有直接或间接接触病原微生物的仪器、设备、器具，均需进展消毒处理，能高压的选择121℃高压灭菌30分钟处理，不能高压的选择1%次氯酸钠消毒实验中产生的具有感染性或潜在感染性的穿透性利器废物置入黄色塑料利器盒中，其他非利器废物置入黄色医疗废物塑料袋中l 实验室应指定专人负责感染性或存在潜在感染性材料的保藏，做好标识，建立台帐【产品名称】【产品名称】l人类免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗体诊断试剂盒(胶体金法)【包装规格】【包装规格】l 50人份/盒【预期用途】【预期用途】l本试剂盒适用于对人血清/血浆或全血中的(HIV1/2)抗体的快速检测金标产品检验原理 本品采用胶体金免疫层析技术，在玻璃纤维膜上预包被金标记HIVgp160和gp36抗原等，在硝酸纤维膜检测线和质控线上分别包被HIVgp41、gp36混合抗原和抗体等，当检测进展时，样品中HIV抗体可与金标记HIV抗原结合形成复合物，由于层析作用复合物沿试纸条向前移动。

假设样品中含有可被检测的HIV抗体，那么与检测线预包被的HIV抗原结合形成“金标记HIV抗原—HIV抗体—HIV包被抗原〞复合物而凝聚显色；假设样品中没有HIV抗体或HIV抗体的含量低于检测限时，那么不形成复合物而不显色示 意 图 阴性加样区加样区 阳性 无效检测线质控线主要组成成份主要组成成份 lHIV(1/2)抗体胶体金试纸条抗体胶体金试纸条/板板 50 Testsl l说明书说明书1份份金标产品主要生产设备点样仪点样仪切割机切割机核酸蛋白仪核酸蛋白仪电子防潮箱电子防潮箱全自动喷点系统全自动喷点系统划膜机划膜机多功能薄膜封口机多功能薄膜封口机干燥箱干燥箱金标产品生产工艺流程图金标产品生产工艺流程图氯化金胶体金标记抗原HIVgp36HIVgp160金标记抗原金反响垫烧金标金喷金枯燥包被抗原HIVgp36A抗原检测线包被液抗HIVgp160单抗质控线包被液配制配制反响膜划膜枯燥试纸大板组装试纸条切割试纸板封装氯化钠等配制样品稀释液待检成品合并出厂成品检定滴配 滴配检定半成品检定半成品检定成品检定分装、帖签物料质控点工序关键工序gp160抗原制备的生产和质量控制抗原制备的生产和质量控制生产工序质量控制要点细胞培养取工程细胞株，经接种复苏后，进行大规模细胞连续培养，收集培养上清液。

上清液经灭活、过滤、超滤，得浓缩上清液，置-20℃保存无菌操作，培养温度，溶氧值，pH值，细胞密度，细胞表达水平 纯化浓缩上清液经亲和层析柱纯化，用适宜的缓冲溶液淋洗、洗脱，收集洗脱峰，经浓缩即得纯化的gp 160抗原层析柱填料的使用次数，所用缓冲液的pH值，上样、淋洗、洗脱速度gp160抗原质量标准抗原质量标准l物理性状：为澄清溶液 l纯度：采用SDS-PAGEl分子量 ：免疫活性l稳定性gp36抗原制备的生产和质量控制抗原制备的生产和质量控制生产工序质量控制要点发酵用gp36工程菌发酵，收集菌体 工程菌诱导温度，工程菌诱导时间纯化菌体经超声破碎，制得粗制gp36抗原粗制gp36抗原经亲和层析柱纯化，用适宜的缓冲液进行透析，经浓缩即得纯化的gp 36抗原超声破碎时间，层析柱填料的使用次数，所用缓冲液的pH值控制，上样、淋洗、洗脱速度gp36抗原质量标准抗原质量标准l纯度l分子量 l功能性试验 l稳定性gp41抗原制备的生产和质量控制抗原制备的生产和质量控制生产工序质量控制要点发酵用工程菌发酵，收集菌体工程菌诱导温度，工程菌诱导时间纯化超声破碎，制得粗制gp41抗原粗制gp41抗原经亲和层析、分子筛等纯化，收集目的蛋白峰，即得纯化的gp 41抗原。

超声破碎时间，层析柱填料的使用次数，所用缓冲液的pH值，上样、淋洗、洗脱速度 gp41抗原质量标准抗原质量标准l纯度：采用SDS-PAGE法检定应符合要求l分子量 l功能性试验 l稳定性 抗抗HIV单抗制备的生产和质量控制单抗制备的生产和质量控制生产工序质量控制要点细胞复苏及传代培养单克隆抗体细胞株，经接种复苏后，进行细胞传代培养无菌操作，培养基的配制，细胞培养温度腹水制备福氏不完全佐剂免疫，7-10天后单克隆抗体细胞悬液注射于F1代小鼠 ，10天后采集小鼠腹水，离心，制得单抗-HIV腹水对数生长期细胞接种纯化用制备的抗HIV 单抗腹水，经亲和层析柱纯化等即得抗HIV 单抗层析柱填料的使用次数，所用缓冲液的pH值，上样、平衡、洗脱速度单抗质量标准单抗质量标准l纯度纯度 l分子量分子量 l功能性检测功能性检测l稳定性试验：稳定性试验：37℃℃放置放置15天，检测上述标本，天，检测上述标本，可到达上述功能性检测标准可到达上述功能性检测标准 金反响金反响垫制制备的生的生产和和质量控制要点量控制要点生生产工序工序生生产关关键点点质量控制点量控制点金反金反应垫的的制制备1 1胶体金的制胶体金的制备颜色、波色、波长的控制的控制2 2* *金金标抗原的制抗原的制备pHpH值、、颜色、波色、波长的控制的控制3 3* *滴配滴配适当地适当地调整两种金整两种金标抗原的抗原的浓度度和比例，比和比例，比较灵敏度和特异性灵敏度和特异性结果，确定最佳的工作果，确定最佳的工作浓度。

度4 4* *喷金金包被量的控制包被量的控制5 5抽干抽干真空度、真空度、时间的控制的控制6 6保存保存避光、干燥的控制避光、干燥的控制金反响金反响垫的制的制备胶体金的制胶体金的制备l控制点：胶体金颜色、波长的控制l要求： 胶体金颜色：红色； 波长：528±4nm金反响金反响垫的制的制备金金标抗原的制抗原的制备l质量控制点：GP160和GP36抗原标记时 pH值、颜色、波长的控制l要求：用PH计测定，pH值：6-7； 颜色：红色 波长：533±4nm金反响金反响垫的制的制备滴滴 配配质量控制点：金量控制点：金标抗原的灵敏度和特异性抗原的灵敏度和特异性要求：通要求：通过HIV快速快速诊断断试剂国家参考品国家参考品测定方法：适当地定方法：适当地调整两种金整两种金标抗原的抗原的浓度和比度和比例，比例，比较灵敏度和特异性灵敏度和特异性结果，确定最正确的果，确定最正确的工作工作浓度用HIV快速快速诊断断试剂国家参考品国家参考品检验，，应符合要求符合要求金反响金反响垫的制的制备喷 金金质量控制点：包被液量的准确性量控制点：包被液量的准确性 要求：要求：2μl/mm 方法：方法： 将待包被的玻璃将待包被的玻璃纤维放置于面板，开放置于面板，开场包被，每包被，每张玻璃玻璃纤维应用目用目测法法检查加液加液是否完整。

是否完整连续5张玻璃玻璃纤维检查合格后，合格后，进入正常包被入正常包被过程正常包被程正常包被过程中每程中每100张金反响金反响垫应抽抽1张作作过程程检查金反响金反响垫的制的制备金反响金反响垫的抽干的抽干质量控制点：真空度、量控制点：真空度、时间的控制的控制要求：要求： 真空度：低于真空度：低于100Pa100Pa 时间：：维持持2 2小小时以上以上 金反响金反响垫的保存的保存质量控制点：金反响量控制点：金反响垫的存放的存放要求：避光、枯燥〔湿度＜要求：避光、枯燥〔湿度＜30% 30% 〕〕操作：操作： 用目用目测法法检测保存金反响保存金反响垫的的铝箔袋的箔袋的密封性 存放金反响存放金反响垫的枯燥柜的枯燥柜 每天每天监测湿度湿度2 2次金反响垫的制备金反响垫的制备金反响膜制备生产和质量控制要点生生产工序工序生生产关关键点点质量控制点量控制点金反金反应膜制膜制备1 1质控控线包被液的配制包被液的配制pHpH值及及浓度的控制度的控制2 2检测线包被液的配制包被液的配制pHpH值及及浓度的控制度的控制3 3* *包被抗原滴配包被抗原滴配适当地适当地调整抗原的整抗原的浓度和比例，度和比例，比比较灵敏度和特异性灵敏度和特异性结果，确定果，确定最佳的工作最佳的工作浓度。

度4 4* *划膜包被划膜包被点点样量的控制、量的控制、质控控线及及检测线间距的控制距的控制5 5抽干抽干真空度、真空度、时间控制控制6 6保存保存避光、湿度的控制避光、湿度的控制金反响膜制金反响膜制备质控控线包被液的配制包被液的配制l控制点： 包被缓冲液pH值及包被浓度l要求： 包被缓冲液pH值：用pH计测定 包被浓度：用核酸蛋白仪检测其蛋白浓度应符合要求金反响膜制金反响膜制备检测线包被液的配制包被液的配制l质量控制点： 包被缓冲液pH值及包被浓度l要求： 包被缓冲液pH值：pH计测定 包被浓度：用核酸蛋白仪检测其蛋白浓度应符合要求金反响膜制金反响膜制备包被抗原滴配包被抗原滴配控制点：包被抗原滴配的灵敏度和特异性控制点：包被抗原滴配的灵敏度和特异性要求：通要求：通过HIVHIV快速快速诊断断试剂国家参考品国家参考品测定方法：适当地定方法：适当地调整抗原的整抗原的浓度和比例，度和比例，比比较灵敏度和特异性灵敏度和特异性结果，确定最正确的果，确定最正确的工作工作浓度用国家参考品度用国家参考品检验，，应符合要符合要求金反响膜制金反响膜制备划膜包被划膜包被控制点：点控制点：点样量、量、质控控线及及检测线间距距操作：操作： 将待包被的硝酸将待包被的硝酸纤维素膜放素膜放置于置于轨道，用卡尺道，用卡尺检测质控控线和和检测线出出样管的管的间距，符合要求后开距，符合要求后开场包被。

包被观察包被液体出察包被液体出样情况，情况，连续5 5分分钟无异无异常，那么常，那么进入正常包被入正常包被过程正常包被程正常包被过程中每卷金反响膜抽程中每卷金反响膜抽1 1张进展展检查金反响膜制金反响膜制备金反响膜的抽干金反响膜的抽干质量控制点：真空度、量控制点：真空度、时间的控制的控制要求：要求： 真空度：低于真空度：低于100Pa100Pa 时间：：维持持2 2小小时以上以上金反响膜制金反响膜制备金反响膜的保存金反响膜的保存控制点：金反响膜存放控制点：金反响膜存放要求：避光、枯燥〔湿度＜要求：避光、枯燥〔湿度＜30% 30% 〕〕操作：操作： 用目用目测法法检测保存金反响膜的保存金反响膜的铝箔袋的密封箔袋的密封性 存放金反响膜的枯燥柜存放金反响膜的枯燥柜 每天每天监测湿度湿度2 2次样品稀释液制备生产和质量控制要点样品稀品稀释液的配制液的配制质量控制点：量控制点： pH pH值要求：用要求：用pHpH计进展展测量量试纸大板的大板的组装及分装生装及分装生产和和质量控制要点量控制要点生生产工序工序生生产关关键点点质量控制点量控制点试纸大板的大板的组装及分装装及分装1 1* *试纸大板的装大板的装配配加加样垫、金反、金反应垫、金反、金反应膜、膜、吸水吸水纸等各等各组分分衔接的控制接的控制2 2* *试纸条的切割条的切割试纸条切割条切割宽度的控制度的控制3 3CTCT盒的盒的组装装试纸条完整性的条完整性的检验4 4装装铝箔袋箔袋铝箔袋的密封性箔袋的密封性试纸大板的大板的组装及分装装及分装试纸大板的装配大板的装配质量控制点：量控制点： 加加样垫、金反响、金反响垫、金反响膜、、金反响膜、吸水吸水纸等各等各组分分应衔接接严密密试纸大板的大板的组装及分装装及分装试纸条条的的切割切割l质量控制点：试纸条切割宽度 要求：300±2mm*8mm 试纸大板的大板的组装及分装装及分装CTCT盒的盒的组装装l质量控制点：应检查试纸条的完整性 试纸大板的大板的组装及分装装及分装控制控制装装铝箔袋箔袋l质量控制点： 铝箔袋应密封样品稀品稀释液的配制、分装及液的配制、分装及贴签生生产工序工序生生产关关键点点质量控制点量控制点样品稀品稀释液的制液的制备1 1配制配制溶液配制溶液配制pHpH的控制的控制2 2分装、灯分装、灯检液量的准确性，分装液量液量的准确性，分装液量应不不低于低于标示量示量3 3标签打印打印批号打印的准确性及清晰度批号打印的准确性及清晰度合并包装的生合并包装的生产和和质量控制要点量控制要点l质量控制点：质量控制点：1.1.包装盒的批号打印准确、清晰。

包装盒的批号打印准确、清晰2.2.合并合并组分的分的齐全性，物料的全性，物料的损耗是耗是否符合否符合规定要求成品成品检验质量量标准准Ø外观 ：试纸条外观平整，材料附着结实每条宽不小于3mm Ø物理检查：膜面无破损、划痕 Ø阴性参考品符合率 ：应符合要求Ø阳性参考品符合率 ：应符合要求Ø最低检出限参考品符合率：应符合要求Ø精细性试验：应符合要求Ø滤血功能：应符合要求Ø稳定性试验：试剂盒各组分置37℃15天 ，应符合性能要求【产品名称】【产品名称】乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒〔乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒〔PCR-荧光探针法〕荧光探针法〕【包装规格】【包装规格】 32人份人份/盒盒【预期用途】【预期用途】 本试剂盒采用本试剂盒采用PCR技术、实时荧光探针技术、用于对技术、实时荧光探针技术、用于对临床血清或血浆标本中的乙型肝炎病毒核酸临床血清或血浆标本中的乙型肝炎病毒核酸DNA的定量检的定量检测PCR诊断试剂的原理本品系由乙型肝炎病毒特异性引物、荧光探针、以及Taq酶等成分组成，采用PCR体外扩增的方法，用过荧光信号的变化，定量检测人血清或血浆标本中的HBV DNA【试剂盒组份】样品处理液样品处理液A样品处理液样品处理液BHBV PCR反应液反应液AHBV PCR反应液反应液BHBV PCR反应液反应液C工作标准品工作标准品①①工作标准品工作标准品②②工作标准品工作标准品③③工作标准品工作标准品④④阴性对照阴性对照 生产工艺流程图生产工艺流程图Tris、PEG 6000、氯化钠、辛酸钠、EDTA-Na2样品处理母液引物、探针、Taq酶、dNTP、UNG酶样品处理试剂样品处理液A样品处理液BPCR工作母液PCR扩增反应试剂PCR反应液APCR反应液B PCR反应液C基因工程菌株工作标准品质粒配制配制配制配制培养、抽提工作标准品①工作标准品②工作标准品③工作标准品④HBV DNA阴性血阴性对照配制配制分装待检半成品半成品检定半成品待检成品贴签、合并出厂成品成品检定物料工序关键工序质控点功能性试验工作参数标定PCR产品生产和质量控制要点生生产工序工序质量控制点量控制点原原辅料的料的检验主要原主要原辅料按料按质量量标准要求准要求进行行检验，合格才能用于，合格才能用于生生产提取试剂的配制及分装提取试剂的配制及分装配制完成的试剂立即分装配制完成的试剂立即分装 ，分装的装量准确性控制，分装的装量准确性控制扩增试剂的配制及分装扩增试剂的配制及分装配制完成的试剂应立分装配制完成的试剂应立分装 ，分装的装量准确性控制，分装的装量准确性控制*工作标准品的制备工作标准品的制备工作标准品的定标工作标准品的定标半成品检定半成品检定应符合相符合相应标准准成品检定成品检定应符合相符合相应标准准工作标准品的定标工作标准品的定标 根据测定的HBV质粒含量，取适量HBV质粒用模拟血清稀释后，以质控参考品为标准进展标定，使最终稀释浓度为约107Copies/ml，即为工作标准品①。

然后将工作标准品①进展10倍系列梯度稀释，稀释后为工作标准品②、工作标准品③、工作标准品④质量标准l阴性对照：阴性对照的检测结果应为阴性，l工作标准品： 工作标准品Q1～Q4的测定值符合下表的范围，并且其线性相关系数|r|≥0.950l工作标准品 拷贝数〔IU/ml〕 拷贝数允许范围〔IU/ml〕lQ1〔工作标准品①〕K1×1073.54K1×106～2.83K1×107lQ2〔工作标准品②〕K2×1063.54K2×105～2.83K2×106lQ3〔工作标准品③〕K3×1053.54K3×104～2.83K3×105lQ4〔工作标准品④〕K4×1043.54K4×103～2.83K4×104l阴性参考品符合率：l检测国家标准品，对8份阴性参考品检测结果不得出现假阳性l阳性参考品符合率：l检测国家标准品，对9份阳性参考品检测结果不得出现假阴性l最低检出限：l检测国家标准品中，线性和灵敏度参考品L0~L5必须检出，L6仅供参考与标准值的线性回归系数R≥97.0%l精细性：l测定公司工作标准品10次，定量结果的变异CV≤10%假设以Ct计算，CV值小于15％〔n＝10〕。

【产品名称】【产品名称】葡萄糖试剂盒〔氧化酶法〕葡萄糖试剂盒〔氧化酶法〕【预期用途】【预期用途】 本试剂盒用以测定人血清中葡萄糖本试剂盒用以测定人血清中葡萄糖的含量生化产品的包装规格规格1（240ml）R1:2*80ml R2:1*80ml 校准液:1*3ml规格2（210ml）R1:2*70ml R2:1*70ml 校准液:1*3ml规格3（288ml）R1:2*96ml R2:6*16ml 校准液:1*3ml规格4（480ml）R1:10*32ml R2:10*16ml 校准液:2*5ml规格5（180ml）R1:10*12ml R2:10*6ml 校准液:1*5ml规格6（300ml）R1:4*50ml R2:2*50ml 校准液:1*3ml规格7（150ml）R1:2*50ml R2:2*25ml 校准液:1*3ml规格8（180ml）R1:4*30ml R2:4*15ml 校准液:1*3ml规格9（270ml）R1:3*60ml R2:3*30ml 校准液:1*3ml规格10（1680ml）R1:2*70ml*8 R2:1*70ml*8 校准液:1*3ml*8规格11（1440ml）R1:2*80ml*6 R2:1*80ml *6校准液:1*3ml*6葡萄糖试剂盒〔氧化酶法〕的检测原理葡萄糖+O2+H2OGOD葡萄糖酸+H2O2H2O2+苯酚+4-氨基安替比林POD醌亚胺+H2O生产工艺流程图待检成品成品 入库原辅料R1、R2、校准品溶液半成品检验原辅料检验配制分装灯检贴签合并包装成品检验试剂盒组份 R1试剂 R2试剂 校准液【生产和质量控制要点】生生产工序工序质量控制点量控制点原原辅料的料的检验按按质量量标准要求准要求对主要原主要原辅料料进行行检验，合格才能用于生，合格才能用于生产R1试剂的配制试剂的配制PH值控制控制R2试剂的配制试剂的配制PH值控制控制*校准品的制备校准品的制备校准品的定校准品的定值半成品检验半成品检验按照按照质量量标准中的半成品准中的半成品检验项目目进行行检验*分装分装应加加强强不同不同规格格产品分包装的清品分包装的清场，防止混批，防止混批成品检验成品检验应符合相符合相应的的质量量标准准质量标准检验项目标准试剂空白吸光度纯化水或生理盐水作为空白标本，重复测定两次，计算吸光度平均值精密度 批内变异，批间相对极差 准确度 取质控血清，重复测定三次，取平均值，测定结果应在该质控血清规定的范围内 分析灵敏度 测定试剂盒所附标准液，在一定波长处，计算吸光度与空白吸光度之差线性范围 将葡萄糖配成一定的浓度,然后用生理盐水按稀释,以每个稀释度作为标本,按标准实验操作步骤进行测定,对理论值和实测值进行回归计算,要求试剂盒在标本浓度时，整个反应呈线性。

校准液 取次级参考物作为校准品，以待测校准液作为样本进行测定,重复三次,取均值，计算相对偏差反应速度取血清标本，加入试剂混匀，连续监测根据其连续吸光度图谱，计算每分钟的吸光度变化值最低检测限用待测试剂盒按标准操作步骤，以生理盐水作标本，多次测定 计算平均值及标准差，以平均值加三倍的标准差（X+3SD）作为最低检测限 谢谢！汇报完毕谢谢大家!请各位批评指正。