食品工程与科学论文保健品中β胡萝卜素的含量分析

目 录摘要1关键词1Abstract1Key words1引言2一、实验部分2（一）仪器与试剂21仪器 22检验试剂2（二）测定方法31色谱条件 32. 标准品储备液的配制33. 样品溶液的制备 34. 标准曲线 35. 样品测定 3 （三）讨论 31. 样品的取样量32. 提取溶剂的选择 33. 流动相的选择 3二、结果与分析 41. 标准曲线 42. 精密度试验 53. 回收率试验 64. 对不同品牌的-胡萝卜素胶囊测定 6三、结论 6致谢7参考文献8保健品中-胡萝卜素的含量分析摘要：对不同品牌保健品中胡萝卜素的含量进行分析，拟建立HPLC快速测定保健品中-胡萝卜素含量方法。方法：甲醇：氯仿=85：15(v/v)；AgilentCl8 柱(4.6 mm×300mm，5um)；流速1.0 mLmin，柱温30，检测波长448nm，进样量10uL。结果-胡萝卜素在10ugmL50ugmL时，浓度与峰面积呈良好的线性关系(R2=0.9994)，加标回收率为98.2101.2 ，最低检出限为1ugmL，相对标准偏差RSD为0.23 2.6 。结论：用该方法测定了多种保健品中的-胡萝卜素，操作简单、快速、准确，结果令人满意。 关键词：-胡萝卜素；RPHPLC；保健品；含量分析Health care products of - carotene content analysisStudent majoring in Food science and Engineering Qing Gao Tutor Yanxia LiAbstract：To different brands of health products of - carotene content carries on the analysis, proposed the establishment of health care products HPLC rapid determination of - carotene content in method. Methods: methanol: chloroform =85:15 ( v/v ); Agilent Cl8 column ( 4.6 mm× 300mm, 5um ); the flow rate was 1 mL / min, column temperature was 30 , the detection wavelength was 448nm, sampling quantity 10uL. Results - carotene in 10ug / mL 50ug / mL, concentration and peak area showed a good linear relationship ( R2=0.9994 ), the recovery is 98.2% 101.2%, the minimum detectable limit of 1ug / mL, the relative standard deviation is 0.23% 2.6% RSD. Conclusion: this method was used to determination of a variety of health products of - carotene, operation is simple, rapid, accurate, with satisfactory results.Key words: Beta carotene；RPHPLC；Health care products；Content analysis引言 -胡萝卜素，名字得自拉丁文的胡萝卜，属于天然化学物家庭的一员。胡萝卜素是缓解眼睛疲劳、保持正常视觉、保持上皮细胞健全和提高人体免疫力的主要营养素，会被人体转换成维生素A，被人们称为”维生素A原”，-胡萝卜素具有维生素A所没有的较好的抗氧化作用和预防癌变的作用。和其他的类胡萝卜素一样，-胡萝卜素是一种抗氧化物。食用富含-胡萝卜素中的食物可以防止身体接触一种称为自由基的破坏分子。通过一个氧化的过程，自由基会对细胞造成伤害。长此以往，将有可能导致人体患上各种各样的慢性疾病。 一些研究表明从日常饮食中摄入足量的-胡萝卜素可能减少患上两种慢性疾病的危险 心脏病和癌症。有研究表明高剂量的-胡萝卜素会减少人们对太阳的敏感度，尤其对那些由于被太阳暴晒而引起皮肤病的人特别有帮助。他们可以在保健专业人士适当的指导下，有针对性地补充-胡萝卜素。缺乏-胡萝卜素眼睛易疲倦，疼痛，视力下降，影响男性精子的生成，并使女性雌激素分泌的周期性变化消失，导致不能受孕,上皮细胞的正常分化受阻，这是引起癌变的基本原因、导致人体对某些化学性致癌物质的敏感性增加。因此，适时、适当补充胡萝卜素是增强免疫力的有效途径，现在市场上含-胡萝卜素保健品特别多，至2003年12月底，我国批准的以“-胡萝卜素”化合物为功效成分的保健食品有63种，占保健食品总数的1.33%，这类保健产品具有以下特点：主要以免疫调节、血脂调节和抗疲劳等功效为主；产品形态以胶囊和片剂为最多，也包括口服液和营养液。以“-胡萝卜素”化合物为功效成分开发保健品具有潜在的优势，-胡萝卜素被许多保健品作为营养强化剂。目前分析保健品中-胡萝卜素的方法有柱色谱法、纸色谱法、分光光度法、高效液相色谱法，前3种方法过程复杂，精密度差。高效液相色谱法简便、快速、准确、成本低，是目前检测-胡萝卜素最理想的方法。一 实验部分（一）仪器与试剂1. 仪器 Agilent 1200 高效液相色谱仪Agilent 1200 紫外检测器Agilent液相化学工作站BS224S精密电子天平2 检验试剂-胡萝卜素标准品(中检所)含-胡萝卜素保健品(市面出售)甲醇(色谱纯)石油醚(分析纯)丙酮(分析纯)（二）测定方法1. 色谱条件 色谱柱： Agilent-Cl8 (4.6 mm×300 mm，5um)，流动相： 甲醇：氯仿=85：15(v/v)，流速： 1.0 mLmin，柱温： 30，检测波长： 448nm，进样量： 10uL。2 标准品储备液的配制 精密称取标准品20.0mg于烧杯中，加三氯甲烷溶解，再转移至100 mL容量瓶中，用三氯甲烷定容至刻线，摇匀，即成标准储备液(200.0ugmL)。 3. 样品溶液的制备称取适量试样于100mL分液漏斗中(如果试样中-胡萝卜素量较少，取样量可以多些)，加入石油醚5mL,丙酮20mL混合液振摇提取，振摇10 min，静置5 min，将提取液转入盛有100 mL 5硫酸钠液的250mL分液漏斗中，多次反复提取，将提取液并入250mL分液漏斗中,直至提取液无色为止。将上述提取液经5硫酸钠溶液洗涤后，进行浓缩，并用氮气吹干，加入10mL甲醇溶解转移至100 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻线。用0.45um 微孔滤膜过滤，滤液作HPLC分析用。4 标准曲线精密吸取标准品储备液(0.50、1.00、1.50、2.00、2.50)mL，分别加于10 mL容量瓶中，加三氯甲烷释稀至刻线，即成浓度为(10、20、30、40、50)ugmL标准品溶液。按上述色谱条件进样1OuL，以峰面积Y为纵坐标，标准品-胡萝卜素的浓度x为横坐标绘制标准曲线。 5. 样品测定 按上述色谱条件，注入样品溶液1OuL，测得峰面积，按标准曲线计算即得。（三）讨论1.样品的取样量由于市场上保健品中-胡萝卜素含量相差较大，统一取样量在实际操作中并不理想，本实验根据样品中-胡萝卜素含量多少，-胡萝卜素的线性范围决定取样量，测定得的结果很满意。2 提取溶剂的选择 在样品提取过程中，用石油醚+丙酮、石油醚、丙酮、三氯甲烷分别进行振摇提取，再用不同配比石油醚+丙酮进行提取，经过比较以石油醚+丙酮(20+80)为溶剂进行提取，提取较为完全，且样品中有机杂质相对较少。3 流动相的选择本试验用甲醇和乙腈、丙酮和水、甲醇：氯仿、乙腈：甲醇：二氯甲烷四种流动相反复进行试验，同时改变流动相的配比和流速，从分离效果进行比较，最终选定甲醇：氯仿=85：15(v/v)；流速1.0 mLmin，为本次试验的条件。二 结果与分析1.标准曲线以标准品-胡萝卜素的浓度x为横坐标，以峰面积Y为纵坐标绘制标准曲线，结果表明-胡萝卜素在1050ugmL时，其峰面积与浓度有良好的线性关系(R2=0.9994)，回归方程为Y=5.O059X+0.0038。见图12. 精密度试验精密吸取低、中、高三种浓度的标准品溶液1OuL，重复进样6次，本法的精密度符合分析要求。结果见表3-1。 表3-1 精密度试验结果( ugmL)标准液测定值XSRSD(%)1010.029.999.9810.019.9810.0510.010.030.273030.0630.0329.9630.0729.9230.0230.010.060.205050.0249.9850.0350.0149.8849.9949.990.050.113. 回收率试验