乙肝两对半检测的意义-穆仁懋课件

四川大学华西医院感染性疾病中心,病毒性肝炎血清学检测结果的判断及临床意义,穆仁懋,肝炎的病因,中毒性酒精、药物、化学、生物 免疫性自身免疫性肝病 感染性寄生虫、原虫、细菌、病毒,1.自身免疫性肝炎 2.原发性胆汁性肝硬化 3.硬化性胆管炎,巨细胞病毒(CMV),EB病毒(EBV),疱疹病毒(SHV),病毒性肝炎,肝炎病毒(HV),肝炎病毒的类型,甲肝,戊肝,丁肝,丙肝,乙肝,急性肝炎,重症肝炎,慢性肝炎,原发性肝细胞癌,肝硬化,肝纤维化,病毒分离培养 血清学检测抗原、抗体,病毒性肝炎的诊断,直接从粪便查甲肝病毒颗粒（免疫吸附电镜检查） 甲肝抗体IgM（抗HAV IgM） 甲肝抗体IgG（抗HAV IgG）,急性甲型肝炎病毒感染及甲肝的诊断,HAV直径27nm，肠道病毒属单股线状，只有一种血清型和一个抗原抗体系统,临床用ELISA检测血清抗-HVA IgM，于发病数日即可检出，黄疸期达高峰，持续2-4月，检测抗-HAV IgM作为早期诊断甲型肝炎的特异性指标,血清抗-HAV IgG出现于病程恢复期，较持久，甚至终身阳性，是获得免疫力的标志，一般用于流调。,急性戊肝病毒感染及戊肝的诊断,HEV呈球状，基因组为单股正链RNA，用ELISA检测戊肝患者血清 抗-HEV，抗-HEV IgM和抗-HEV IgG在血清中基本上同步出现，抗抗-HEV IgM消失较早，抗-HEV IgG于9-12月后达低水平。,丙肝病毒感染及丙肝的诊断,抗HCV(无法确定现症感染) HCV-RNA(定性、定量）,HCV在受感染者的血清及肝组织内数量少，用电镜是看不到，HCV为黄病毒科丙型肝炎病毒属，HCV直径30-60nm球形颗粒，基因组为单股正链RNA,HCV在血中浓度低，检测不出HCVAg，检测抗-HCV，无法确定现症感染，且常出现假阳性，抗HCV为非保护性抗体,PCR法检测HCV RNA在血中检出HCV RNA，表明血液中有HCV存在，是有传染性的直接证据。HCV感染后4-8周，血中才能检出抗HCV，HCV感染后1-2周即可从血中检出HCV RNA,丁肝病毒感染及丁肝的诊断,HBsAg（重叠感染或合并感染） HD-Ag or 抗HD HDV-RNA,HDV是一种缺陷RNA病毒，必须有HBV或其他嗜肝DNA病毒（WHV）的辅助才能复制表达抗原及引起肝损伤。 HDV为杆状病毒属单股负链环状RNA,HDV可与HBV同时感染人体（合并感染），也可在HBV感染的基础上引起重叠感染。当HBV感染结束时，HDV感染也随之结束。,用RIA或ELSA法可检出血清中抗-HD，急性感染时抗-HDIgM首先出现，起病后30-40天才消失，继而出现抗-HDIgG,在慢性HDV感染时，可在血清中检出高滴度抗-HD，当HDV处于复制状态时，可在肝细胞，血液及体液中检出HDV RNA,流行状况,乙型肝炎在美国 100125万慢性患者 大部分新感染者为 20-39岁 大约 50% 有急性症状 大约 5,000 由于慢性肝炎死亡 在中国 HBsAg携带达10%（高发地区13%） 2800万乙肝患者 每年新发病人23/10万 感染率5080%,南方高于北方 全球3.5亿带菌者,几乎一半在中国,HBV感染的地域分布*,* Note: The map of HBsAg prevalence generalizes available data, patterns may vary within countries.,乙型肝炎的危害性,WHO估计 2000年全球慢性HBV感染达4000万 全球因乙肝死亡数100万/年 慢性HBV感染是引起肝硬化和肝细胞癌的最主要原因 肝癌(HCC)在HBV感染者的发病率是正常人群的1000倍(江苏启东,广西龙安) 3040%肝硬化病人的尸检是HCC,而90%HCC的发生在肝硬化的基础上 我国每年有数百万人死于肝硬化和HCC,乙型肝炎病毒属嗜肝病毒科，双链DNA病毒，HBV感染者血清中存在三种形式的颗粒，大球形颗粒，又名Dane颗粒，为完整的HBV颗粒，直径42nm；小球形颗粒，直径22nm；核状颗粒，直径22nm。,乙肝病毒感染,HBV基因结构由不完全的环状双链DNA组成，两条链长度不等，长链（正链）、负链（短链） HBV基因组中有4个开放读框（ORF）均位于长链。分别为S区、C区、P区和X区,S基因区编码前S1蛋白（pre S1），前S2蛋白（pre S2）及HBsAg,C基因区，由前C基因和C基因组成，前C基因开始编码的蛋白为HBeAg，前C基因核苷酸变异时，不能合成HBeAg，形成HBeAg阴性的前C区变异株。 C基因开始编码的蛋白为HBcAg，血中检测不出游离的HBcAg,P基因区是最长的ORF，编码多种功能蛋白，包括HBV DNA多聚酶，逆转录酶，RNA酶 H等,X基因区，编码X蛋白HBxAg。血清HBxAg也是HBV复制和传染性标志，可能激活肝细胞基因组内的原癌基因，促使肝细胞癌变,HBV基因组易突变，S基因突变可引HBsAg亚型改变及HBsAg阴性，前C区突变可致HBeAg阴性，抗-Hbe阳性，C区突变致抗HBc阴性，P区突变可致HBV复制停止,抗体 Anti-HBc Anti-HBc-IgM Anti-HBe Anti-HBs 肝脏严重损害指标 Bilirubin Albumin Prothrombin time,病毒标志 HBV DNA HBeAg HBsAg 肝脏损害指标 ALT AST,Hepatitis B 常用诊断指标,慢性乙肝携带者无血清学转变图,慢性乙肝携带者后期出现血清学图,急性乙肝痊愈的血清指标变化图,HBsAg第一个出现（13月） 12月后，HBc-IgM出现，AST/ALT升高，黄疸出现，HBsAg和HBc-IgM并存 随病毒消除，HBsAb出现 在少部分病人中，出现“Core Window”，只有HBc-IgM 恢复期，HBsAb和HBcAb会长期存在,乙肝病毒感染及乙肝的血清学诊断,HBVm HBV-DNA的定性或定量,HBsAg +,HBeAg +,HBsAb -,HBeAb -,HBcAb +,大三阳 双抗原阳性,HBsAg +,HBeAg +,HBsAb -,HBeAb -,HBcAb -,病毒复制， 具有传染性,HBsAg +,HBeAg -,HBsAb -,HBeAb +,HBcAb +,小三阳 小二阳,HBsAg +,HBeAg -,HBsAb -,HBeAb -,HBcAb +,一般说，病毒停止复制，不再具传染性，但如为复制，查HBV-DNA定,HBsAg -,HBeAg -,HBsAb +,HBeAb -,HBcAb -,HBsAg -,HBeAg -,HBsAb +,HBeAb -,HBcAb +,HBsAg -,HBeAg -,HBsAb +,HBeAb +,HBcAb +,接种乙肝疫苗成功，或乙肝病毒感染恢复期，对乙肝已有免疫力。,HBsAg -,HBeAg -,HBsAb -,HBeAb +,HBcAb +,既往感染 单独抗HBc阳性不 是传染性的指标。,HBsAg -,HBeAg -,HBsAb -,HBeAb -,HBcAb +,HBsAg -,HBeAg -,HBsAb -,HBeAb -,HBcAb -,未感染乙肝，但为易感者。,前S蛋白,1.前S1病毒蛋白出现在急性HBV感染的最早期 2.前S1病毒蛋白持续存在者将发展至慢性肝炎 3.前S1病毒蛋白与HBV DNA，HBeAg高度相关 4.在抗-Hbe阳性的HBV感染者中，检出前S1蛋白，表明病毒的复制,区分好：,乙肝患者 乙肝病毒携带者（无症状、肝功正常）,乙肝病人病情发展的过程,急性感染,肝纤维化,肝 硬 化,慢性感染,慢性肝炎,反复炎症活跃,携带者 患者,重肝 恢复,失代偿期 原发性肝细胞癌,乙肝两对半定量检测的临床意义,定量检测的定义 乙肝两对半定量检测是对两对半的各项内容进行定量和半定量测定，而有别于定性检测的阳性或阴性报告,乙肝定量检测的Cutoff值,HBsAg(定量)0.05 HBsAb(定量)10.0 HBeAg(半定量)1.0 HBeAb(半定量)1.0,定量检测的优势,能动态检测其变化，特别是疗效，其灵敏度可达0.1ng/ml。（ELISA为2ng/ml）可检出低浓度的感染者 协助判定定性矛盾结果,案例分析,大三阳” 与“小三阳”的问题 郭×× 男 30岁 一直为“小三阳”，突然查出“大三阳” 即作HBVm定量复查： HBsAg 250 HBsAb 0.51 HBeAg 0.341 HBeAb 0.01 HBcAb 15.31,案例分析,肖×× 男 32岁 一直为“小二阳”，HBV-DNA定量106，用贺普丁治疗后仍为“小二阳”，HBV-DNA定量103。 因停药问题查HBVm定量： HBsAg 250 HBsAb 0.82 HBeAg 0.698 HBeAb 0.72 HBcAb 13.57,案例分析,王×× 男 17岁 一直为“大三阳”，用-干扰素(600万impd×6月) ,停药7月,一直查仅HBeAb + HBcAb +。 复查HBVm定量： HBsAg 0.06 HBsAb 1.52 HBeAg 0.523 HBeAb 0.25 HBcAb 12.8,案例分析,李×× 男 33 一直为“大三阳”，用护肝药后肝功正常，但查时有“小二阳”。 复查HBVm定量 HBsAg 250 HBsAb 0 HBeAg 3.132 HBeAb0.85 HBcAb14.94,案例分析,HBsAg和HBsAb同时阳性的问题： 王×× 男 40岁 HBsAg及HBsAb均为阳性，且多次变化很大。 HBVm定量结果： HBsAg 0.89 HBsAb 28.29 HBeAg 29.89 HBeAb 2.53 HBcAb 13.79,案例分析,程×× 男 42岁 因“大三阳” 用贺普丁1年，HBV-DNA转阴 HBVm为“小二阳”，继续用药至18个月，仍为“小二阳”。 HBV定量： HBsAg 6.2+ HBsAb 250.1 HBeAg 2.4+ HBeAb 0.8 HBcAb 15.7,案例分析,程××男42岁 再作HBVm为： HbsAg + HbsAb + HBcAb + 复查HBVm定量： HBsAg 14.1 HBsAb 228.75 HBeAg 2.453 HBeAb 0.65 HBcAb 13.6,谢谢!,