兽医流行病学课件：血清流行病学

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,血清流行病学,1.,概述,一、定义：血清学,(,免疫学,),和流行病学原理和方法来研究血清中特异抗体的产生和分布规律，阐明疾病在畜群中的分布与原因，并在采取相应措施后，检验其效果。,血清中物质：生化测定、抗体测定,二、用途：,1.,查明疾病在动物群体中流行情况，特别是隐性感染为主疾病，需用血清学方法；,2.,探讨某些疾病的地理分布,3.,检查疫苗免疫效果；,4.,病因研究，特别是爆发传染病时，比较发病初与康复期双份血清，效价升高,4,倍有诊断意义。,5.,疾病监测与预报；用于疾病消灭计划中，淘汰阳性，建立健康畜群。,三、方法,（一）调查方法,短期调查：作为诊断用，从群体中随机采集一定量样本检测，另一种是暴发时采双份血清比较；,长期调查：确定疾病的时间、空间和畜群间分布情况，血清学监测，建立健康群时均用到；对于疫苗免疫为主的疾病，需监测母源抗体的影响。,（二）检测方法：,1.,凝集类,2.,沉淀类,3.,补体反应类,4.,标记类,（三）分析方法：结果与正常参考水平比较；,2.,血清抗体的测定,一抗体量的表示法,血清转阳：由阴性变为阳性；,1,、稀释度的对数转换 血清稀释时通常以几何级数,(,常用倍比稀释,),，平均滴度常以几何均数计算，并使样本的分布趋向正态分布。,表示滴度的方法：,直接表示或倒数,.,Log2,平均滴度,（,1,）算出,对数滴度,的算术平均数,-,即对数平均滴度,.,（,2,）对数平均滴度的反对数,-,即几何平均滴度；,以表,11-1,为例：,(0+1+2+3+4+5+6)/7=21/7=3,对数平均滴度,二抗体测定,1.,单个稀释度测定,：均只作一个稀释度，如,ELISA,最后比较,OD,值；,2.,单系列稀释测定,：作若干个稀释度，但每个稀释度均只测一次；如,HA,或,HI,；,3.,多,系列稀释测定,：作若干个稀释度，但每个稀释度均有多个重复管（孔、头）需测几次，以求得更准确的滴度。,例如,TCID50,、,LD50,、,EID50,，以可出现感染、死亡等指标为判定标准，常用,50%,为判定终点。,TCID50,计算,表,11-2,，说明中和效价的计算方法，不过，在病毒学中通常用,Reed-Muench,二氏法计算，见以下内容，结果都一样。,血清,稀释度,稀释系数对数,10,x,细胞,病变,正,常,累计和,病变,正常,病变比例,保护率,%,1/1,0.00,0,5,0,26,0/26,100,1/2,-0.3,0,5,0,21,0/21,100,1/4,-0.6,0,5,0,16,0/16,100,1/8,-0.9,1,4,1,11,1/12,99.2,1/16,-1.2,1,4,2,7,2/9,78.8,1/32,-1.5,3,2,5,3,5/8,37.5,1/64,-1.8,4,1,9,1,9/10,10,1/128,-2.1,5,0,14,0,14/14,0,计算,1.,距离比例（高于,50%,保护率,50%,的保护率）,（高于,50%,保护率低于,50%,的保护率）,（,78.8,50,）,（,78.8,37.5,）,0.697,2 .Log,10,ED,50,=,高于,50%,保护率的血清稀释度对数距离比例,稀释系数的对数,1.2,0.6970.3,1.01,ED50=,1.01,的反对数为（？）,三,畜群中血清抗体水平的估计和比较,检测抗体存在否？抽样检查，按结果分为阳、阴性两类，此时涉及暴露水平，样本量大小、所用检查的方法。,抗体水平的比较,第三节 血清学试验的解释,精密性（,refinement,）,抗原成分存在精密性：型、亚型、毒株之分；,取决于：,试验方法的精密性；,所用抗原的性质；,所测抗体的类型,二、准确性（,accuracy,）,1,阳性结果：,真阳性：实际感染；,假阳性：交叉反应、非特异性反应（尤其是血清高浓度时）；故血清学反应中通常要将被检血清作一系列的稀释；,2,阴性结果,真阴性：未有感染或免疫耐受；,假阴性：采血时间不当，抗体尚未出现；试验选择不当；非特异性抑制物；不完全抗体或封闭抗体；试验不敏感；,三、敏感性和特异性,上图：左移虚线，特异性下降，假阳性增加；,下图：左移虚线，敏感性增加，假阴性下降；,初筛时趋向于使敏感性增加；,第,13,章 分子流行病学,研究内容,传染病（病原分类、传染源、传播途径、进化分析、耐药性）,肿瘤、心血管病、遗传代谢病,研究方法,核酸电泳图谱分析、,核酸酶切图谱分析、,寡核苷酸指纹图谱分析,基因探针和核酸杂交,PCR,核酸序列分析,其他技术,