尿液干化学检查中常见影响因素的分析

尿液干化学检查中常用影响因素的分析 尿液分析；化学检测 尿液干化学联合尿沉渣检测,使尿液分析发生了划时代的变化。自动化限度的日益提高，检测参数的逐渐增长，测试速度的不断加快，极大地提高了工作效率,减轻了检查人员的劳动强度。但由于干化学检测的局限性、干化学试纸的诸多影响因素以及检查过程中忽视了许多中间环节，从而直接影响了尿液自动化分析的精确性。我们对尿液干化学检测过程中常常遇到的干扰因素及注意事项简介如下。 1 H、尿蛋白和尿比重的互相影响 干化学法尿蛋白、比重和pH的检测原理都是基于p的变化而设计的，这是pH、尿蛋白和比重之间互相影响的本源。pH507.0的正常尿液对尿蛋白和尿比重无影响,过低的强酸性尿液几乎不存在。因此，需要我们引起足够注重的是pH值升高的强碱性尿。p升高的病理因素涉及碱中毒、原发性醛固酮增多症、变形杆菌和铜绿假单胞杆菌引起的膀胱炎、肾盂肾炎等尿路感染。许多药物如枸橼酸钠、嘧啶、碳酸类药物及某些中草药常可引起尿液pH值不同限度的升高。强碱性尿对比重的影响重要是尿液中的OH-中和了一部分H+,引起膜块上的p变化导致比重成果减少。实验室检测H超过7.0时,在原尿比重基本上应增长0.005,超过8.时增长.010。p>.5时，对仪器报告的尿蛋白阳性标本均应通过其她措施加以证明。而作为两性电解质的蛋白质,自身可电离出H，与a+从多聚电解质中解离出来的H+共同作用于尿比重膜块上的批示剂，发生显色反映，使比重检测成果偏高。 2 细菌和真菌对尿隐血的影响 尿隐血检查是诊断泌尿系统疾病,特别是肾脏疾病的重要实验指标之一。尿路感染的病例中，部分杆菌、球菌及真菌（重要为假丝酵母菌)一方面也许释放过氧化物酶,另一方面为了代谢的需要在增殖过程中也许合成过氧化物酶、触酶或超氧化物歧化酶。目前，尿隐血检查是一种非特异性的检测措施，上述酶类物质在尿隐血的干化学测定中,可不同限度地使试纸膜块上的过氧化氢茴香素或过氧化氢稀枯分解出游离氧,引起色原颜色的变化,浮现假阳性反映。大量实验已经证明,尿中少量细菌和真菌对隐血无影响，但延长显色时间有时也可呈弱阳性反映。不同细菌引起尿隐血的阳性限度不同,假单胞菌属（如铜绿假单胞杆菌）最严重，杆菌强于真菌和球菌。大量细菌和真菌是引起干化学法尿隐血假阳性的因素之一。 药物对尿液检查的影响 药物具有生物活性，药物自身及其代谢产物干扰尿液测定的现象并非少见。临床治疗中滥用抗生素的现象时有发生，许多新药对临床检查的干扰还尚未发现。药物对尿液检查的影响给实验室检查和临床诊断增添了许多困难。 青霉素是临床最常用的抗生素,滴注后76于6 h内以原形从尿中排出。青霉素构造中具有类似蛋白质分子构造中的肽键，可使磺柳酸法成果增强，而干化学法成果削弱。干化学法是基于试纸带膜块上pH值的变化。青霉素分子构造中的-COO可电离出H+,也许通过H+影响值的变化而导致尿蛋白的阳性削弱。因此，静脉滴注青霉素最佳5 h后再做尿液检查，对蛋白尿患者使用青霉素治疗时,不同的测定措施应考虑不同的干扰作用，干化学法可使成果削弱甚至为假阴性。氧哌嗪青霉素仅影响磺柳酸法尿蛋白的测定，而不影响干化学法的检测。氧哌嗪是青霉素的衍生物，静滴后重要以原形从尿中排出。氧哌嗪分子构造中具有两个牢固结合的肽键，与磺柳酸可发生明显的结合，产生类似尿蛋白的假阳性反映。因此，遇到磺柳酸法尿蛋白强阳性，与仪器检测或显微镜检查明显不符时,应具体询问病情，理解用药史，及时反馈给临床。 维生素是最常用的维生素类药物。本药水溶性好,口服或滴注后体内代谢快,尿中浓度迅速升高。维生素具有较强的还原性，对尿液成分测定的影响机制可理解为竞争性克制反映,使成果削弱或浮现假阴性。一般觉得,常规剂量口服维生素C对实验成果无影响，而大剂量口服特别是静脉滴注时，3 min内尿中浓度即迅速升高，随着尿液的浓缩其浓度不断上升。高浓度的维生素C可影响尿中葡萄糖、隐血、胆红素和亚硝酸盐的测定。不同浓度的维生素C对尿液检查的影响不同,同样浓度的维生素C对尿液中不同成分的影响也不相似,不同批号的试纸抗维生素C的干扰不同。从事尿液分析的检查人员，应参照本实验室的仪器和试纸,建立健全维生素在多大浓度范畴内才对以上实验产生影响及影响限度如何,选择维生素滴注后的最短取尿时间。 干化学测定与尿液有形成分显微镜检查的关系 . 干化学测定与白细胞显微镜检查的关系 干化学法白细胞检查的原理是依赖于白细胞浆内粒细胞酯酶的存在。该酶作用于试纸膜块上的吲哚酚酯游离出吲哚酚，吲哚酚与重氮盐反映形成紫色缩合物。粒细胞酯酶重要存在于粒细胞质内,单核细胞具有少量,淋巴细胞中无此酶。因此，干化学法重要测定粒细胞。甲醛防腐尿液及应用某些药物(如呋喃坦啶)时,可使尿白细胞呈假阳性。而陈旧性尿液中的脓细胞，尿中具有大量先锋和庆大霉素,尿蛋白不小于 g/L，乳糜尿及深棕色尿均可导致尿白细胞阳性削弱或呈假阴性。由于干化学测定的原理与显微镜计数的形态学检查是两种截然不同的概念，因此有时浮现成果不一致的状况。 42 干化学测定与红细胞显微镜检查的关系 显微镜血尿是许多泌尿系统疾病病理变化的初始信号之一,很少量红细胞有时只体现为隐血阳性。临床无症状的尿隐血阳性对疾病的初期诊断更为重要。尿隐血检测涉及尿液中的红细胞和(或)红细胞变形裂解后溢出的血红蛋白。红细胞和血红蛋白均具有亚铁血红素,具有过氧化物酶样活性，亚铁血红素还原试纸带膜块上的过氧化物释放出游离氧，氧化色原显色。因此尿隐血报告的阳性限度往往高于显微镜检查的红细胞数。许多患者红细胞在肾脏或泌尿道中因渗入压过低或p值偏高而破坏,血红蛋白释放，浮现所谓干化学检查的假阳性现象。因此遇到与显微镜检查成果不符时,一定要结合临床加以分析,寻找因素,切不可一概对干化学法加以否认,更不可武断地调节仪器的敏捷度。尿隐血假阴性重要见于维生素C的干扰所致。假阳性重要是尿液中存在对热不稳定的酶(如过氧化物酶、类过氧化物酶)和肌红蛋白。前者加热后酶类破坏即转为阴性，后者是一类特殊的疾病。 4.3 干化学测定与管型显微镜检查的关系 尿液干化学检查中,没有管型的检测项目。管型是尿液检查中最故意义的成分，是尿液中蛋白质、肾小管分泌物、变性的肾上皮细胞及其剥脱物、红细胞或白细胞及其崩解产物在远曲小管、集合管内形成的。因此尿液中浮现管型时，绝大多数尿蛋白阳性。尿液中检出病理性管型表达肾小管有一过性尿潴留,常可反映肾脏的病变。因此，必须严格按规定镜检,以保证管型不被漏诊。干化学试纸带受诸多因素的影响，不同尿液分析仪检测的敏捷度也有一定差别。目前，任何一台尿液分析仪只能起显微镜检查的过筛实验，虽然可进行无玻片镜检及细胞分布直方图报告的电脑遥控显像尿液分析仪，也不能完全取代显微镜。基于以上因素,实验室需要常规镜检的状况至少应涉及:（1)泌尿系统或可疑泌尿系统疾病的患者;(2)尿蛋白、白细胞、红细胞、亚硝酸盐有阳性者或四项均阴性而尿维生素（+)以上或标本留取前使用了对尿液检查有影响的药物；（3）可疑尿中有管型、肾上皮细胞、亚硝酸盐还原酶阴性的细菌、病理性结晶等异常成分;（)尿液混浊或尿色异常者;（）近期内尿检异常正在治疗观测的患者。 5减小误差,提高尿液分析的精确性 5.1 标本的采集与放置 干化学检查规定尿液应新鲜,最佳不要超过2h。长时间放置的尿标本，某些化学成分或有形成分也许会分解、破坏或转化成其她成分（待测物或非待测物），从而直接或间接影响成果的精确性。例如尿液中大量繁殖的细菌在葡萄糖和蛋白质的分解过程中，细菌大量增长,葡萄糖和蛋白质逐渐减少；红细胞无氧酵解过程中对葡萄糖的运用及多种细胞成分的破坏,都不同限度地增长了实验的误差。又如新鲜尿中的酮体形式重要为乙酰乙酸，长时间放置的尿标本,乙酰乙酸的含量逐渐减少,而丙酮和-羟丁酸逐渐增高，由于三种酮体物质检测的敏捷度差别甚大，势必导致同一份标本应用同一台仪器和试纸在不同步间检测成果的差别。干化学检查更不可应用加入防腐剂（如甲苯、甲醛）和克制剂(如氟化钠）的尿液，否则加入的化学试剂将直接影响到某些成分的测定。 5.2 干化学试纸的保存、浸湿时间及测试温度 干化学试纸一旦启封应尽快用完，且每次使用后必须紧塞筒盖，勿放入冰箱保存，以免被空气氧化或吸水变质。由于各项目的检测原理不同,延长浸湿时间加之室内温度增高,可使葡萄糖、蛋白质、胆红素和尿胆原的阳性增强，而酮体阳性削弱，pH值减少。严禁用手触摸试纸带上任何一种测试膜块，浸湿后的试纸带不适宜甩动,以免互相污染影响成果。因此尿液检查必须原则化，试纸浸湿时间应严格控制在2 s或规定的时间,启封后应在1周内用完，保存于室温在15 5的通风干燥处为宜。 .3 使用配套试纸、定期校准仪器、开展室内室间质控 由于尿试纸带各项目的检测原理不同，同一项目不同厂家的试纸反映原理也不尽相似，各膜块反映的敏捷度及色泽变化也存在一定差别。因此不同仪器和试纸对同一标本的测定成果也许存在一定误差,同一仪器、同一标本应用不同厂家试纸测定的成果也也许有一定差别。因此建议各实验室不可频繁更换试纸厂家。同步,应积极开展室内室间质量控制。室间质控可随时观测仪器的反复性与否,室内质控可及时发现仪器的精确性与否。定期用高下质控物作对照,用校正带校准仪器,在无可比性对照措施的状况下,不要随意调节仪器检测的敏捷度。