蔬菜水果蘑菇农药残留检测细则

蔬菜、水果和食用菌农药残留检测参考操作方法按NY/T 761-2008方法，称取35 g匀浆试样，加入70 mL乙腈，高速匀浆2 min后用滤纸过滤或抽滤，氯化钠盐析后，分取4份：第一份：取10 mL提取液，按照NY/T 761有机磷类农药测定步骤进行前处理，用气相色谱（FPD）进行测定。第二份：取10 mL提取液，按照NY/T 761有机氯和菊酯类农药测定步骤进行前处理，用气相色谱（ECD）进行测定。第三份：取10 mL提取液：按照NY/T 761氨基甲酸酯类农药的前处理测定氨基甲酸酯（柱后衍生），同一溶液用高效液相色谱（紫外检测器）同时测定吡虫啉、多菌灵、辛硫磷、除虫脲、灭幼脲、啶虫脒、氟虫腈和阿维菌素。注：定容时现加3 mL甲醇，充分溶解残渣，再用水定容至5 mL。充分混匀后过0.45 µm的膜，上机测定。HPLC色谱参考条件： C18柱，3 mm´5µm´25cm；柱温：40；流量：0.5mL/min；进样量：10µL。吡虫啉、啶虫脒、多菌灵、除虫脲、氟虫腈、灭幼脲、辛硫磷和阿维菌素溶剂梯度及波长见表1和表2。表1 溶剂梯度时间min水%甲醇/乙腈（7+3）%0.006535 6.30653516.00653517.70653520.00010021.50010023.00010023.01010028.006535表2 波长变化表时间，min06.316.0017.721.5波长/nm2752452252802450.2mg/L吡虫啉、啶虫脒、多菌灵、除虫脲、氟虫腈、灭幼脲、辛硫磷和阿维菌素标准溶液色谱图见图1。图1 0.2mg/L吡虫啉、啶虫脒、多菌灵、除虫脲、氟虫腈、灭幼脲、辛硫磷和阿维菌素标准溶液色谱图快速液相色谱参考条件： BEHC18柱，10 cm；柱温：40；流量：0.45mL/min；进样量：5µL。多菌灵、吡虫啉、啶虫脒、除虫脲、灭幼脲、氟虫腈、辛硫磷和阿维菌素溶剂梯度及波长见表3和表4。表3 溶剂梯度时间min乙腈%0.05%氢氧化铵溶液(pH=1011)%02575490104.390104.3125755.52575表4 波长变化表时间，min03.23.54.2波长/nm2552252852450.2mg/L多菌灵、吡虫啉、啶虫脒、除虫脲、灭幼脲、氟虫腈、辛硫磷和阿维菌素溶标准溶液色谱图见图2。图2 0.2mg/L多菌灵、吡虫啉、啶虫脒、除虫脲、灭幼脲、氟虫腈、辛硫磷和阿维菌素溶标准溶液色谱图注：如果氟虫腈在液相色谱上有无法克服的干扰，也可用GC-ECD进行检测，参考色谱条件见表5。表5仪器条件：色谱柱：RTX-1 30 m×0.25 mm×0.50m进样体积 L：1.00载气流量 mL/min：0.8进样口温度 ：250.0检测器温度 ：320.0初始温度 ：150.0初始时间min：1.00程序升温：升温速率 /min最终温度 保留时间 min130.00220.00.00色谱图见图3。溴氰菊酯氟氰戊菊酯氰戊菊酯氟氯氰菊酯联苯菊酯氟虫腈百菌清乙烯菌核利图3 0.1 mg/L百菌清、乙烯菌核利、氟虫腈、联苯菊酯、氟氯氰菊酯、氟氰戊菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯标准溶液色谱图第四份：取10 mL提取液，过石墨炭黑氨基串联柱（在样品色素不严重的情况下，也可用氨基柱代替石墨炭黑氨基串联柱）预淋液5 mL：乙腈+甲苯=3+1；淋洗液：25 mL乙腈+甲苯=3+1，定容后用于质谱项目。50农药的净化方式和所用检测器见表6。表6 50种农药净化方式和所用检测器分组组分名称净化方式检测仪器1甲胺磷、氧乐果、磷胺、久效磷、甲拌磷、对硫磷、甲基对硫磷、甲基异柳磷、水胺硫磷、乐果、敌敌畏、毒死蜱、乙酰甲胺磷、三唑磷、丙溴磷、杀螟硫磷、二嗪磷、马拉硫磷、亚胺硫磷、伏杀硫磷不净化GC-FPD2氯氰菊酯、氰戊菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、联苯菊酯、三唑酮、百菌清、滴滴涕、六六六、氟胺氰菊酯、氟氰戊菊酯、三氯杀螨醇、腐霉利、五氯硝基苯、异菌脲、乙烯菌核利弗罗里矽柱净化GC-ECD3氟虫腈、啶虫脒、哒螨灵、苯醚甲环唑、嘧霉胺石墨炭黑氨基串联柱净化GC-MS4涕灭威（包括涕灭威砜涕灭威亚砜）灭多威、克百威（包括3-羟基克百威）、甲萘威氨基柱净化LC-氨基甲酸酯分析系统吡虫啉、多菌灵、辛硫磷、除虫脲、灭幼脲、啶虫脒、氟虫腈和阿维菌素氨基柱净化LC-紫外检测器可用气相色谱串联质谱仪进行确认农药的参考色谱条件见表7和见表8。表7色谱条件色谱柱Restek-5ms 30 m×0.25 mm×0.25 µm载气类型He柱头压120 KPa线速度48.8 cm/sec总流速30.0 mL/min柱流速1.75 mL/min尾吹流速5.0 mL/min分流模式不分流分流比-1.0进样时间7.0min进样口升温程序升温速率 /min最终温度 保留时间 min1-120.06.50280.00250.030.00色谱柱升温程序升温速率 /min最终温度 保留时间 min1-82.06.0028.00300.05.00表8选择离子保留时间农药名称特征离子1特征离子2特征离子310.848甲胺磷949514111.084敌敌畏10918518713.565乙酰甲胺磷949513613.872敌百虫10913914515.747氧乐果10911015617.09久效磷12716419217.227甲拌磷12123126017.337六六六（1）21721922118.071六六六（2）21721922118.223六六六（3）21721922118.742磷胺（1）12713826418.876六六六（4）21721922118.99百菌清26426626819.39抗蚜威16616723819.712磷胺（2）12713826419.937甲基对硫磷10912526320.28甲霜灵16020624920.475五氯硝基苯29329529720.651杀螟硫磷10912527720.907嘧霉胺19819920020.939马拉硫磷12512717321.143倍硫磷10912527821.2毒死蜱19931431621.219对硫磷10913729121.29三唑酮12820821021.384水胺硫磷13623028921.435二嗪磷17927630422.47腐霉利9628328522.776滴滴涕（1）31631832023.441丙溴磷33733937423.539滴滴涕（2）31631832023.752滴滴涕（3）16523523724.403三氯杀螨醇13925025224.558滴滴涕（4）16523523724.625滴滴涕（5）16523523724.667甲基异柳磷19923124124.972三唑磷16116231324.968氟虫腈36736937125.452滴滴涕（6）16523523725.878克螨特13517335026.405异菌脲31431626.595亚胺硫磷16016131726.7联苯菊酯16516618126.858甲氰菊酯18126534927.517伏杀硫磷18218436727.971氯氟氰菊酯18119720829.653氟氯氰菊酯（1）16316522629.767氟氯氰菊酯（2）16316522629.876氟氯氰菊酯（3）16316522629.921氟氯氰菊酯（4）16316522630.057氯氰菊酯（1）16316518130.175氯氰菊酯（2）16316518130.283氯氰菊酯（3）16316518130.325氯氰菊酯（4）16316518130.332氟氰戊菊酯（1）15719945130.575氟氰戊菊酯（2）15719945131.242反式氰戊菊酯（1）16722541931.248苯醚甲环唑（1）32332432531.349苯醚甲环唑（2）32332432531.483氟胺氰菊酯18125025231.534哒螨灵11714732332431.553氟胺氰菊酯18125025231.943溴氰菊酯（1）18125125532.242溴氰菊酯（2）181251255可用液相色谱串联质谱仪进行确认农药的参考色谱条件如下： a）色谱柱: ACQUITY UPLCTM BEH C18 1.7um 2.1×50mm Column 。b) 柱温：35 。c) 进样量：10 L。d) 流动相及流速见表9。g) 毛细管电压：3 KV。h) 离子源温度：110 。i) 去溶剂气温度：350 。j) 去溶剂气流量：500 L/hr。k) 锥孔反吹气流量：50 L/hr。l) 碰撞气流速：0.18 mL/min。m）MRM 监测离子见表10。表9 梯度洗脱程序时间min流速mL/minA（甲醇）%B（1.0 mmol 醋酸胺溶液）%曲线Initial0.2510903.50.25901066.00.25901067.00.2510901表10 MRM 监测离子序号农药名称保留时间min电离方式母离子锥孔电压V子离