不同加热方式对透明质酸钠黏度的影响
不同加热方式对透明质酸钠黏度的影响刘文庆 樊保平 陈捷红 石滨透明质酸（hyaluronic acid,简称HA）是酸性黏多糖物质之一，是由葡糖 醛酸-N-乙酰氨基葡糖为双糖单位组成的直链高分子多糖，通常以其钠盐形式 存在。国内外已对HA的分布、化学结构、理化性质、生理功能及应用方面 进行了广泛深入的研究1，目前HA广泛应用于眼科、骨科等医学领域和化妆 品工业中。目前所用的HA的平均分子量一般大于106，近年来的研究发现， 分子量较小的HA具有特殊的生理功能。HA大分子容易发生降解，因此可利 用不同的方法处理高分子量HA，得到分子量较小的HA产品。加热降解是简 单、易于控制的HA降解方法，本实验就不同加热方式对HA黏度的影响进行 了考察。1材料与方法1.1仪器与试剂恒温水浴（土 0.1 °C），电热恒温干燥箱，立式灭菌锅、平式黏度计（ 1.0mm ）HA，山东福瑞达生化工有限公司生产，批号20011018,20020209。1.2方法1.2.1 HA运动黏度的测定，按中国药典2000版附录VI G的黏度测定法（第 一法）测定其运动黏度，精密称取按十品计算的HA100mg于100ml容量瓶中， 以蒸馏水溶解，定容至刻度，在25°C恒温水浴中，以0 1.0mm平式黏度计测 定其运动黏度。1.2.2不同加热方式对HA运动黏度的影响1.2.2.1 60° C、80°C、100°C水浴加热对HA溶液运动黏度的影响 将20011018 批HA配制成0.1% (g/ml)溶液置于水浴中，每隔15min取样测定其运动黏 度，共保温90min。1.2.2.2 121 °C湿热处理对HA黏度的影响 取150ml碘量瓶，精密称取按十品 计算的HA粉末，加棉塞，置于立式灭菌锅中，121°C加热处理，取出后加入 100ml水溶解，测定运动黏度。1.2.2.3 100°C十烘对HA黏度的影响 将HA粉末置于电热恒温干燥箱中，100 °C加热处理，取样测定运动黏度。1.2.2.4 121 °C加热处理对1%HA溶液运动黏度的影响 在2000ml三角瓶中加 入1000ml蒸馏水，在不断搅拌下缓缓加入精密称取按十品计算的 HA粉末 10g，摇匀，放入立式灭菌锅中，121 °C加热处理，冷却全室温，称取5gHA 溶液，放入50ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，测定运动黏度。2结果2.160° C、80°C、100°C水浴加热对0.1%HA溶液运动黏度的影响T/(min)015304560759060°C47.5848.5447.9648.6348.5448.7348.5480°C47.1047.2947.1946.9145.9545.6746.81100°C46.8140.3035.5233.9830.9230.7330.632.2 121。湿热处理对HA黏度的影响T/(hr)00.51.01.52.02.53.03.5运动黏度77.95.83.52.01.81.61.31.2/(mm2/s)2.3 100°C烘箱内干烘对HA黏度的影响T/(hr)02468101214运动黏度/(mm2/s)34.831.026.223.021.118.016.913.62.4 1%HA溶液121 ° C降解T/(hr)00.51.01.52.0运动黏度/(mm2/s)39.512.56.25.44.1HA大分子易发生降解，采用不同方式处理所得的低分子量HA,可能 会因为降解部位的不同，其生理功能略有差异囹。与双氧水氧化、紫外线照射、 Y射线照射等方法相比，加热处理具有操作简单、易于控制的优点，尤其是HA溶于水后，由于水的保护作用，HA的降解更加温和。60°C处理0.1%HA 溶液，对其黏度几乎没有影响，80°C短时间(小于60min)处理对其黏度影 响甚小，100°C短时间处理后，其黏度也仅有轻微下降。HA浓度越高，加热 处理后，其黏度下降越剧烈。120°C湿热处理HA粉末，虽然可以迅速降低其 运动黏度，但出现了溶液颜色变黄的现象。120°C处理1%HA溶液，只有加 热时间超过4小时以上，才会出现这种现象。我们采用120°C加热处理1%HA 溶液的方法，可以得到平均分子量小于200000的产品。值得注意的是，HA 在其分子量下降到一定程度后，其黏多糖的性质会发生改变，这为制备低分子 量HA固体带来了一定的困难。参考文献1王凤山，凌沛学，郭学平，等.生化药物研究，北京：人民卫生出版社，1997, 266 2712国家药典委员会.中华人民共和国药典，北京：化学工业出版社，2000,4446 （附录）3凌沛学，贺艳丽，郭学平，等.北京：中国轻工业出版社，2000, 21234郭学平，凌沛学，张天民.山东省药学会第五次生化药物学术研讨会论文集，2002，24 27原文发表于：2003年全国生化与生物技术药物学术研讨会论文集，丹东，2003，94 95
