标准加入法同时测定复方扶芳藤合剂中人参皂苷rg1及人参皂苷rb1的含量

第2 5 卷增刊 2 0 0 6 年1 1 月 分析测试学报 F E N X IC E S H IX U E B A O ( J o u r n a lo fI n s t r u m e n t a lA n a l y s i s ) V 0 1 2 5 N O V 2 0 0 6 标准加入法同时测定复方扶芳藤合剂中 人参皂苷R g l 及人参皂苷R b l 的含量 覃洁萍1 ，叶勇1 ，李芸2 ，张赘赘1 ，张炜1 ( 1 广西中医学院，广西南宁5 3 0 0 0 1 ；2 广西中医学院附属制药厂，广西南宁5 3 0 0 2 3 ) 复方扶芳藤合剂是由红参、黄芪、扶芳藤等补益中药经提取、精制而成的1 3 服液制剂。具有益气 补血，健脾养心等功效iJ 。由于制剂成分复杂，一直未能找到合适的方法分析其中红参的主要皂苷类 成分的含量。曾参照有关红参、三七药材皂苷类成分的含量测定方法进行试验陋。4 】，反复摸索色谱条 件，但方法准确度无法满足要求。本文采用标准加入法，建立了同时测定复方扶芳藤合剂中人参皂苷 R g l 、人参皂苷R b l 的R P H P L C 含量测定方法，实验结果表明，该法准确可靠，重复性好，可作为复 方扶芳藤合剂的质量控制方法之一。 1实验部分 1 1 材料与仪器 美国A g i l e n t11 0 0 型高效液相色谱仪，配标准自动进样器，智能化柱温箱，可变波长紫外检测器， 二极管阵列紫外检测器，A g i l e n tl1 0 0s e r i e s 色谱工作站；超纯水系统( M i l l i p o r e ) ；L G l 6 W 型离心沉 淀机( 北京医用离心机厂) 。 人参皂苷R g 。及人参皂苷R b 。对照品购自中国药品生物制品检定所，复方扶芳藤合剂样品由广西 中医学院制药厂提供；乙腈( 一级色潜纯，天津四友生物医学技术有限公司) ；磷酸( A R 级，汕头市光 华化学厂) ；异丙醇( 色谱纯，天津四友生物医学技术有限公司) ；供试品、对照品溶液均用优级纯甲 醇配制，其余试剂皆为分析纯。 1 2 色谱条件 色谱柱为日本岛津s h i m - p a c kC L C - O D S 柱( 6 0m m l DX1 5 0m n l ) ，5 岬；流动相A 为乙腈，流动相B 为0 0 5 磷酸，梯度洗脱；柱温：2 5 c c ；检测波长：2 0 3r i m ；分析时间：8 0m i n ，流速：1 0m L r a i n ； 进样量：1 0I x L ，理论塔板数以人参皂苷R g l 峰计应不低于2 0 1 0 5 。在此色谱条件下，供试品溶液色谱 图见图1 。 图l复方扶芳藤合剂样品溶液的H P L C 图谱 1 人参皂苷R g l ；2 人参皂苷R b l 1 3 供试品溶液的制备 精密量取复方扶芳藤合剂样品2 5m L ，用氯仿振摇萃取两次，每次3 0m L ，弃去氯仿层，剩余液体 用水饱和的正丁醇分别振摇萃取5 次( 3 0 、2 0 、2 0 、2 0 、2 0m L ) ，合并正丁醇液，再用氨试液洗涤2 次，第1 次用1 0 0m L ，第2 次用8 0m L ，弃去氨水层，减压回收正丁醇，残渣用甲醇溶解并定容至 2m L ，摇匀，用微孔滤膜( 0 4 5 斗m ) 滤过，取续滤液，即得。 基金项目：广西自然科学基金资助项目 一9 5 第2 5 卷分析测试学报增刊 1 4 样品测定 取复方扶芳藤合剂样品，按“1 3 ”项下方法制备供试品溶液。分别准确移取同一批号供试品溶 液1 0m L 共5 份于系列2 0m L 容量瓶中，其中1 份不加标准混合溶液，其余各加不同量的标准混合 溶液，然后用甲醇稀释至刻度，摇匀。使各溶液浓度分别为c 。+ 0 ，C x + C 。，C 。+ 2 c 。，c 。+ 3 C 。，c 。 + 4 C 。分别精密吸取上述溶液各l O l L 注入高效液相色谱仪，测定相应峰面积，用外推法计算出样品 中人参皂苷R g l 和人参皂苷R b l 的含量。 2 结果与讨论 复方扶芳藤合剂成分复杂，由于各成分相互间的干扰不能消除，用常规的R P H P L C 方法很难分离 与测定其中的人参皂苷类成分。本文首次采用标准加入法，尝试了在无法消除干扰的情况下对复方扶 芳藤合剂中人参皂苷R g l 及人参皂苷R b l 同时进行定量分析的方法，该法加样回收率试验结果见表l 。 实验结果表明本法准确可靠，重复性好，可作为复方扶芳藤合剂的质量控制方法之一。 表12 个化合物的加样回收率( 9 6 ) ( n = 9 ) 参考文献： 1 中国药典( 一部) s 2 0 0 5 ，V o lI ：5 3 0 2 中国药典( 一部) S 2 0 0 5 ，V o lI ：1 0 5 ，1 1 3 张萍，张南平，肖新月，等 J 药物分析杂志，2 0 0 4 ，2 4 ( 3 ) ：2 2 9 4 苏静，朱卫泉 J 药物分析杂志，2 0 0 5 ，2 5 ( 2 ) ：2 1 2 R P H P L CD e t e r m i n a t i o no fG e n s e n o s i d eR g la n dG e n s e n o s i d eR b l i nt h eF u f a n gF u f a n g t e n gM i x t u r e Q I NJ i e p i n g ，Y EY o n 9 1 ，L IY u n 2 ，Z H A N GY u n y u n l ，Z H A N GW e i l ( 1 G u a n g x iT r a d i t i o n a lC h i n e s eM e d i c a lU n i v e r s i t y ，N a n n i n g5 3 0 0 0 1 ，C h i n a ； 2 P h a r m a c e u t i c a lF a c t o r yo fG u a n g x iT r a d i t i o n a lC h i n e s eM e d i c a lU n i v e r s i t y ，N a n n i n g5 3 0 0 2 3 ，C h i n a ) A b s t r a c t ：D e t e r m i n a t i o no fg e n s e n o s i d eR g la n dg e n s e n o s i d eR b li nt h eF u f a n gF u f a n g t e n gm i x t u r eb ys t a n d a r da d d i t i o nm e t h o dw a sr e p o a e di nt h i sp a p e r C h r o m a t o g r a p h i cc o n d i t i o n si n c l u d e dS h i m p a c kC L CO D Sc o l - u m na n dt h em o b i l ep h a s ec o n s i s t i n go fam i x t u r eo fC H 3C N 一0 0 5 H 3P 0 4 ，g r a d i e n te l u t i o na tt h er a t eo f1 0 m L m i n T h ed e t e c t i o nw a v e l e n g t hw a s2 0 3n m T h em e t h o dcans i m u l t a n e o u s l yd e t e r m i n et h ec o n t e n t so f g e n s e n o s i d eR g la n dg e n s e n o s i d eR b li nt h eF u f a n gF u f a n g t e n gm i x t u r e ，t h ea v e r a g er e c o v e r i e so fg e n s e n o s i d e R g la n dg e n s e n o s i d eR b lw e r e9 8 a n d1 0 0 ，r e s p e c t i v e l yw i t hc o r r e s p o n d i n gR S Do f2 7 a n d1 7 ( n = 9 ) T h em e t h o di sp r o v e dt ob ea c c u r a t e ，r e l i a b l e ，a n dr e p r o d u c i b l e ，i tc a nb eu s e df o rt h eq u a l i t yc o n - t r o lo fF u f a n gF u f a n g t e n gm i x t u r e K e yw o r d s ：F u f a n gF u f a n g t e n gm i x t u r e ；G e n s e n o s i d eR g l ；G e n s e n o s i d eR b l ；S t a n d a r da d d i t i o n ；R P H P L C 一9 6