实验步骤

1、DeadEndTM Colormetric TUNEL System1. 概述12. 产物成分及贮存条件 33. 测定法规程.4A 规程文献 .4B 组织片段中细胞凋亡的分析步骤5C 细胞培养中细胞凋亡的检测步骤.7D 阳性对照（随机）进行.9E 采用茴香霉素诱导的HL-60细胞凋亡的步骤.94. 故障循迹105. 缓冲液和溶液的成分组成。

2、免疫共沉淀 CHIP实验步骤 (2012-11-28 14:29:54)转载甲醛处理细胞-收集细胞，超声破碎-加入目的蛋白的抗体，与靶蛋白-DNA复合物相互结合-加入ProteinA，结合抗体-靶蛋白-DNA复合物，并沉淀-对沉淀下来的复合物进行清洗，除去一些非特异性结合-洗脱，得到富集的靶蛋白-DNA复合物-解交联，纯化富集的DNA-片断-PCR分析。一、细胞的甲醛交联与超声破碎（ 第一天）1. 取出1平皿细胞（10 cm平皿），加入243 ul 37%甲醛，使得甲醛的终浓度为1%（培养基共有9 ml）。2. 37孵育10 min。3. 终止交联：加甘氨酸至终浓度为0.125 M。450 ul 2.5 M甘氨酸。

3、Comment f1: 若浆液很粘稠则可能 是 DNA 和蛋白形成的胶粘物，可以 用微量移液器反复吹打得以解决。 （吹打过程中应避免混入过多的空气 而形成泡沫）1附录一附录一 WesternWestern blottingblotting 实验步骤实验步骤1 1组织总蛋白样品制备：组织总蛋白样品制备：取适量组织 50mg，待组织块自行溶解，用滤纸吸去其表面水分，将组织块放入玻璃匀浆器球状部位，用组织剪尽量将其剪碎，将剪碎的心肌组织放入玻璃匀浆器的杆状部，按 1mlRIPA+10ulPMSF/100mg 组织的比例加入 RIPA 和PMSF（先加 RIPA 再加 PMSF） ，将玻璃匀浆器插入冰中，匀浆。

4、western bolt 实验操作步骤中心实验室内部文件WESTERN BLOT 操作步骤聚丙烯酰胺凝胶电泳 灌胶：注意：Acrylamide（聚丙烯酰胺）剧毒，需戴手套操作。1、将玻璃板用清洗剂洗干净后，自来水冲洗干净，蒸馏水冲洗三遍（勿用酸泡） 。2、固定好玻璃板，配置分离胶溶液(10ml 两板，一板可以减半配制)根据分子量选择相应浓度的分离胶。胶浓度 超纯水 凝胶储备液Gel bufferPH8.810%SDS10%APSTEMED10%常用 4.1ml 3.3ml 2.5ml 0.1ml 50l 15l12%小分子量 3.4 ml 4.0 ml 2.5ml 0.1ml 50l 15l8%大分子量 4.7ml 2.7ml 2.5ml 0.1ml 50l 15l3、用 1000l 。

5、现场总线及其应用西门子工业网络通讯技术应用-实验内容,一.熟悉STEP 7的使用STEP 7 V5.0 使用入门.pdf，二.在实验中完成以下内容，并写出主要步骤：（建立工程-硬件组态、通讯组态、配置I/O参数和特性） 1.PLC S7-300 2DP一类主站(DPM1) +I/O组成的PROFBUS-DP网络 2.由PC+CP5611二类主站(DPM2) +PLC S7-300 2DP+I/O组成的PROFBUS-DP网络 3.组态CPU 416-2DP一类主站，ET200B 、ET200M DP从站，CPU 315-2DP为核心的智能从站 4. S7-300与S7-200的EM277之间的PROFIBUS DP通讯链接 5.搭建网络化PCS实验控制系统,1.由PLC S7-300 2DP一类主站(DPM。

6、Transwell实验步骤1将小室放入培养板中，在上室加入300 l预温的无血清培养基，室温下静置1530 min，使基质胶再水化。再吸去剩余培养液。2 消化细胞，终止消化后离心弃去培养液，用PBS洗2遍，用含BSA的无血清培养基重悬。调整细胞密度至1-10105，个人认为不要超过5105。如果需要对细胞预处理而不得不分开计数，那么计数一定要多重复几次，力求准确，尽量保证对照组和处理组细胞密度一致。3 取细胞悬液200 l加入Transwell小室。4 24孔板下室一般加入500 l含FBS或趋化因子的培养基，这里要特别注意的是，下层培养液和小室间常会有气泡产生，。

7、仪器和设备培养箱、恒温水浴、振荡水浴摇床、压力蒸汽消毒器、干热烤箱、低温冰箱(-80) 或液氮生物容器、普通冰箱、天平(精密度0.1g和0.0001g)、混匀振荡器、匀浆器、菌落计数器、低温高速离心机，玻璃器皿等。实验材料标准试验菌株(配套菌株)：有四种TA98、TA97 ：检测移码突变 TA100：检测碱基置换突变 TA102：对醛、过氧化物及DNA交联剂较敏感 实验步骤1. 准备好经无菌处理过的（0.22微米）待测发酵液；2. 配置好底层培养基（VS、 GS 培养基加水溶解并灭菌），加入到无菌培养皿中，做好标记，混匀、静置凝固；3. 实验当天配置顶层培养。

8、一、样品制备一、样品制备对于 Western Blotting 实验而言，样品处理是关键步骤之一，获得的蛋白样品必须均质、可溶，并解离成单个多肽亚基，且尽量减少相互间的聚集，使其最终仅依赖本身的分子量大小进行分离。当目标蛋白的含量很低时，需要选取目标蛋白含量较高的组织或细胞器（如核抽提物），或者通过免疫沉淀等方式进行富集。通常样品有重组蛋白、细胞和组织等。1.1. 样品收集样品收集1）培养的细胞贴壁和悬浮细胞收集方式不同，细胞裂解液种类各异，推荐含 SDS 的凝胶加样缓冲液裂解，煮沸即可。2）动物组织与细胞不同，组织块由于体。

9、序号序号实验名称实验名称内容提要内容提要实验实验学时学时每组每组人数人数时间时间1工具绘图工具绘图建立选区、绘图工具的运用等412图像特效图像特效制作印象派画等一些特殊的图像效果413文字特效文字特效 制作基于文字的各种特殊效果等614图像合成图像合成运用多种技巧进行图像的合成等615网页广告网页广告制作网页广告416平面广告设计平面广告设计 综合运用各种工具，进行平面广告创意设计101实验一、工具绘图 （1）打开 Photoshop 软件，按下 Ctrl+N，新建 600*480 像素的 RGB 模式图像文件； （2）打开“小狗”和“苹果”素材，复。

10、Westernblot 实验步骤1. 组织块称重2. 利用液氮、研钵粉碎组织块3. 加入 RIPA 缓冲液（每克组织3 ml RIPA ）， PMSF （每克组织30l， 10 mg/ml PMSF），利用 Poly tron 进一步匀浆（ 15,000 转/分*1 分钟）维持44. 加入 PMSF （每克组织30l，10 mg/ml PMSF），冰上孵育30 分钟5. 移入离心管4 约 20,000 g （约 15,000 转） 15 分钟6. 上清液为细胞裂解液可分装-20保存7. 进行 Bradf ord 比色法测定蛋白质浓度8. 取相同质量的细胞裂解液（体积*蛋白质浓度），并加等体积的2 电泳加样缓冲液9. 沸水浴中 3 分钟10. 上样11. 电泳（浓缩胶20mA 。

11、芬顿 (Fenton)试剂对有机污染物的化学降解是前景广阔的高级氧化技术，具有反应快、降解完全等优点：1、了解芬顿试剂氧化降解水中有机污染物（如亚甲基蓝、农药）的原理；2、熟悉芬顿试剂的制备、操作过程和影响因素。实验原理过氧化氢与亚铁离子结合形成的芬顿(Fenton)试剂，具有极强的氧化能力，其氧化机理主要是在酸性条件下，利用亚铁离子作为过氧化氢分解的催化剂，反应过程可以生成反应活性极高的羟基自由基，其具有很强的氧化能力。羟基自由基可进一步引发自由基链反应，从而降解大部分有机物，甚至使部分有机质达到矿化。过氧自由。

12、Western bolt 一、实验目的通过实验了解 western blot技术的原理和操作。二、实验原理SDS-PAGE 是最常用的定性分析蛋白质的电泳方式, 特别是用于蛋白质纯度 检测和测定蛋白质分子量。 PAGE能有效的分离蛋白质 , 主要依据其分子量和电 荷的差异 , 而 SDS-PAGE 的分离原理则仅根据蛋白质的分子量的差异。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS （十二烷基 硫酸钠）， SDS会与变性的多肽，并使蛋白带负电荷，由于多肽结合SDS的量几 乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此 SDS多肽复合物在丙稀酰胺 凝胶电泳中的。

13、DeadEndTM Colormetric TUNEL System1. 概述12. 产物成分及贮存条件 33. 测定法规程.4A 规程文献 .4B 组织片段中细胞凋亡的分析步骤5C 细胞培养中细胞凋亡的检测步骤.7D 阳性对照（随机）进行.9E 采用茴香霉素诱导的HL-60细胞凋亡的步骤.94. 故障循迹105. 缓冲液和溶液的成分组成。

14、第四节 凝胶蛋白质点的酶解 一 蛋白质点酶解 准备工作 1 检查冻干机 调好水浴锅 37 56 2 检查各种试剂的量是否足够 DTT IAA NH4HCO3 3 检查酶解房卫生状况 每一步注意事项 1 每一步加入的液体量视胶块大小定 一般是。

15、IP 实验步骤 基本实验步骤 (1）收获细胞，加入适量细胞 IP 裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂） ，冰上或者 4裂解 30min， 12,000g 离心 30 min 后取上清；(2) 取少量裂解液以备 Western blot 分析，剩余裂解液将 1g 相应的抗体和 10-50 l protein A/G-beads 加入到细胞裂解液，4C 缓慢摇晃孵育过夜；(3）免疫沉淀反应后，在 4C 以 3,000 g 速度离心 5 min，将 protein A/G-beads 离心至管 底；将上清小心吸去，protein A/G-beads 用 1ml 裂解缓冲液洗 34 次；最后加入 15l 的2SDS 加样缓冲液，沸水煮 10 分钟；(4）SDS-PAGE, Western blotting 。

16、脂代谢相关基因 siRNA 沉默的实验步骤第一部分：siRNA 转染条件的优化及靶点筛选。写文章所需要的数据：1. 三对 siRNA 序列；2. 转染效率及图片；3. 对 mRNA 的抑制率及图片（非常重要）4. 对蛋白质的抑制率及图片（非常重要）实验步骤：1. 准备工作（1）培养瓶、玻璃吸管和枪头消毒；分装培养液、青霉素-链霉素和胰酶的管子消毒及分装；PBS 配置及消毒。（2）培养液分装 100ml/瓶，使用 100ml 玻璃瓶分装；青霉素 -链霉素分装 1ml/管，使用冻存管分装；胰酶分装 1ml/管，使用冻存管分装。（3）培养液的配置，每 100ml 细胞培养液（美国 H。

17、1、 创建基本对话框，工程名:Eg8_3，双击IDD_EG8_3_DIALOG2、 删除“TODO在这里设置对话控件”3、 单击“”树形控件，拖到对话框内，右击弹出对话框“树形控件属性”，输入ID：IDC_TREE 单击“样式”标签，选中 Has buttons(有按钮)、Has lines(有线条)复选框，这样用起树视图控件就同Windows中资源管理器中的一样了。4、 列表控件添加成员变量m_Tree，右击对话框资源的标题，弹出对话框当中选择“建立类导向”，选择Obeject IDs:IDC_TREE，再单击“MemberVariables”标签，单击“Add Variable”按钮，输入Member Variable name：m_Tree，。

18、一 免疫共沉淀 COIP 1 免疫沉淀 IP 概念 利用抗原与抗体特异性结合的特征 将抗原 靶蛋白 从混合体系中沉淀下来 初步分离靶蛋白的方法 2 免疫共沉淀 COIP 概念 一种在体外检测蛋白和蛋白之间是否存在特异性相互作用的方法 如果两个蛋白在体外能发生特异性作用 那么当一种蛋白的抗体进行沉淀时 另一个蛋白也被同时沉淀下来 3 应用 纯化蛋白 浓缩蛋白 蛋白质相互作用验证 4 原理 靶蛋白A与。

19、1.制作植物细胞临时装片实验步骤：1、 选择实验材料用具：所选的材料用具可以满足实验（如：洋葱鳞片叶，镊子，刀片，载玻片，盖玻片，清水，稀碘液，滴管，卫生纸，吸水纸，显微镜）2、 制作洋葱表皮细胞的临时装片并观察： 1、 准备： （1） 用洁净的卫生纸把载玻片和盖玻片擦拭干净，把载玻片平放在实验台上，用滴管在载玻片的中央滴一滴清水。 （2） 用刀片在洋葱鳞片内表皮上，轻轻划出边长为25的小方格；然后用镊子从小方格内的内侧撕取一小块透明表皮，并将其浸入载玻片的水滴，用镊子将表皮展平。 （3） 用镊子夹起盖玻片，使它的。